WST 24-1996尿中汞的双硫腙萃取分光光度测定方法.pdf

中华人民共和国卫生行业标准尿中汞的双硫腺萃取分光光度WS/T 24-1996测定方法Urine--Determination of mercury-Dithizone extraction spectrophotometric method1主题内容与适用范围本标准规定了尿中汞的双硫腺萃取分光光度测定方法。最低检测浓度为0.005mg/L。本标准适用于接触汞及其化合物工人的尿中汞浓度的测定。2原理尿样经高锰酸钾-硫酸加热消化后，用盐酸羟胺还原过剩的高锰酸钾及二氧化锰，在0.5mol/L硫酸溶液中，汞离子与双硫腺生成橙色络合物，三氯甲烷萃取后，比色定量。3仪器3.1分光光度计，10mm比色杯。3.2锥形瓶，250mL。3.3刻度分液漏斗，250mL。3.4电炉或电热板。3.5聚乙烯塑料瓶，200mL。3.6尿比重计。3.7玻璃仪器和塑料器皿均用1+1硝酸浸泡过夜，冲洗干净，晾干后备用。4试剂本标准所用试剂除另有说明者外，均为分析纯试剂。4.1实验用水：为重蒸馏水或具有同等纯度的去离子水。4. 2 硫酸,P20=1. 84 g/mL。4.3三氯甲烷，不应含有氧化物。4.4饱和高锰酸钾溶液。4.5盐酸羟胺溶液，200g/L。4.6双硫踪洗除液：称取10gEDTA和10g氢氧化钠，加水溶解后稀释至500mL，并与500mL氮水(p20=0.9g/mL)混合。4.7双硫踪三氟甲烷溶液。4.7.1双硫腺的提纯，称取0.1g双硫溶于50mL三氯甲烷中，置于250mL分液漏斗中，用1+99氨水提取三次（每次约30mL），双硫踪进入氨水层。合并氨水溶液，用6mol/L盐酸调至酸性，此时双硫析出，加入适量三氯甲烷使双硫溶于三氯甲烷层中，用等量的蒸馏水洗涤二次，将双硫三氯甲烷1997-05-01实施中华人民共和国卫生部1996-10-14批准 WS/T 24-1996溶液放入棕色瓶中，加入15～20mL1十9硫酸，置冰箱中保存，可使用一个月。4.7.2使用时吸取提纯的双硫踪三氯甲烷液适量，用三氯甲烷稀释至透光度为60%（490nm，10mm比色杯），溶液应呈翠绿色。4.8汞标准溶液：准确称取0.1354g经干燥器干燥过的重结晶氯化汞（HgCl2），加0.5mol/L硫酸使其溶解后，定量转移至1000mL容量瓶中，稀释至刻度，此溶液1mL=0.1mg汞。使用前，用0.5mol/L硫酸稀释成1mL=10μg汞的标准应用液。4.9质控样：用标准尿样、加标的模拟尿、加标的正常人混合尿或接触者混合尿作质控样。5采样、运输和保存用聚乙烯广口瓶收集一次晨尿样约150mL，尽快测定比重后置冰箱中，4℃可保存一周。6分析步骤6.1样品处理6.1.1取尿50mL放入锥形瓶中，同时用50mL水作空白。6.1.2加30mL饱和高锰酸钾溶液（4.4)及5mL硫酸（4.2），摇匀。加热至沸（如发现尿样中高锰酸钾紫色褪去，可酌情补加适量的高锰酸钾溶液），保持10min，取下，冷却。6.2标准曲线的绘制6.2.1取6个锥形瓶，按下表配制标准系列。汞标准管的配制23451号0管0. 30. 50. 70. 900. 1汞标准应用液（4.8），mL505050505050水,mL9. 003. 05. 01. 05. 0乘含量,μg6.2.2按6.1.2条操作。6.2.3冷却至温热时，滴加盐酸羟胺溶液（4.5），随加随振摇，至完全无色透明，再振摇5min。放至室温后，转移到分液漏斗中，用水冲洗锥形瓶三次，洗液倒入分液漏斗至150mL左右。6.2.4加入5mL双硫踪三氯甲烷溶液（4.7.2），在2min内振摇200次，静置分层后，将三氯甲烷层放入另个已盛20mL双硫洗除液（4.6)的分液漏斗中，振摇50次，洗去过量的双硫，静置分层后将三氯甲烷层通过脱脂棉过滤于10mL干燥的具塞比色管中。6.2.5用10mm比色杯，在490nm波长下，以空白作参比，测定吸光度。以汞的含量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。6.3样品测定尿样按6.1条处理完后，按6.2.3～6.2.5条操作。测得吸光度后，在标准曲线上查得尿样中汞的含量（μg）。在测定前后以及每测定10个样品后，测定一次质控样。7 计算7.1按式(1)计算尿样换算成标准比重(1.020)下的浓度的校正系数(k）。1.020 -1.000(1)k=#实测比重=1.0007.2按式（2)计算尿中汞的浓度：m·kX=(2)V WS/T 24-1996式中：X一尿中汞的浓度,mg/L;m-尿样中汞的含量,μg;V-一分析时所取尿样体积，mL。8说明8.1本法的检测限，取50mL尿样时为0.005mg/L测定范围0.005~0.180mg/L。本法精密度：CV=3.4%~8.1%（尿样浓度0.01，0.05，0.10mg/L，n=6），准确度