WST 60-1996尿中五氯酚的分光光度测定方法.pdf

中华人民共和国卫生行业标准尿中五氯酚的分光光度测定方法WS/T60-1996Urine-Determination of pentachlorophenol-Spectrophotometric method1主题内容与适用范围本标准规定了尿中五氯酚的分光光度测定方法。本法最低检测浓度为0.1mg/L。本标准适用于接触五氯酚的工人尿中五氯酚的测定。2原理尿中五氯酚在弱酸性条件下随水蒸气蒸馏出来，吸收在氢氧化钠溶液中。生成的五氯酚钠在铁氰化钾（氧化剂)存在下，与4-氨基安替比林作用产生蓝色络和物，用二甲苯萃取，比色定量。3仪器3.1分光光度计，10mm比色杯。3.2全玻璃磨口蒸馏器，500mL，带垂直冷凝器。3.3锥形瓶，100mL。3.4具塞比色管，50mL。3.5吸量管,1 mL,2 ml,5mL。3.6尿比重计。3.7聚乙烯塑料瓶。4 试剂本标准所用试剂除另有说明者外，均为分析纯试剂。4.1实验用水：为蒸馏水或具有同等纯度的去离子水。4.2氢氧化钠溶液，1mol/L。4.3氢氧化钠溶液，0.1mol/L。4.4柠檬酸溶液，200g/L。4.5柠檬酸缓冲液（pH=6）：称取21.0g柠檬酸，用200mL1mol/L氢氧化钠溶解后，稀释至1000mL。取59.5mL加入40.5mL0.1mol/L氢氧化钠，混匀。4.64-氨基安替比林溶液，0.04g/L。在冰箱（4℃)中可保存一周。4.7铁氰化钾溶液，100g/L。在冰箱（4℃）中可保存一周。4.8二甲苯。4.9标准溶液的配制：准确称取五氯酚100mg或五氯酚钠108.7mg，加10mL0.1mol/L氢氧化钠（五氯酚钠时加6.2mL），使其溶解后，用水稀释至100mL，此溶液1mL相当于1000μg五氯酚。再将此溶液用水稀释成1mL相当于100μg五氯酚的标准应用液。4.10质控样：用加标的模拟尿、接触者混合尿或加标的正常人混合尿作质控样1997-05-01实施中华人民共和国卫生部1996-10-14批准 WS/T60-19965采样、运输和保存取工作周末的下班前的尿，测比重后，按100mL尿加入23滴浓盐酸，置于聚乙烯塑料瓶中，在冰箱（4℃）中可保存两周。6分析步骤6.1样品处理取尿样100mL放入有数粒玻璃珠的蒸馏瓶中，加5mL柠檬酸溶液（4.4）及75mL水。用锥形瓶(3.3)作接收器，在锥形瓶中加约3mL水及0.7mL氢氧化钠溶液（4.2）。将冷凝管出口浸入接收器的溶液中，加热蒸馏。至馏出液约到达100mL时，停止蒸馏，将蒸馏液加水至100mL。取出20mL蒸馏液于比色管（3.4)中。6.2标准曲线的绘制6.2.1取6支比色管（3.4），按下表配制标准管。五氯酚标准管的配制管 1:0. 2标准应用液（4.9），mL0. 40. 60. 8水,mL2019. 919.819. 619. 419. 201020五氯酚含量，ug4060806.2.2向各管中加入1mL缓冲液（4.5），1mL4-氨基安替比林溶液（4.6），混匀，再向各管中加入1mL铁氢化钾溶液（4.7），立即混匀，在2min内向各管加入5mL二甲苯（4.8），用力振摇100次，待分层后取出有机相，以零管作空白，在2h之内用10mm比色杯于波长600nm下比色测定。6.2.3以五氯酚含量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。6.3样品测定将6.1条所得蒸馏液按6.2.2条操作，由标准曲线查得样品中五氯酚的含量。在测定前后以及每测定10个样品后，测定一次质控样。7 计算7.1按式（1)计算尿样换算成标准比重（1.020）下的浓度的校正系数。1.020-1.000k=(1)实测比重1.0007.2按式(2)计算尿中五氯酚的浓度。m.kX=(2 )20°式中：X.尿中五氯酚的浓度，mg/L。由标准曲线查得的五氯酚含量，ug。m8说明8.1本法检测限0.1mg/L。线性范围0~80 μg。精密度:CV=1.1%~2.0% (五氯酚含量10~80μg,n=6）。尿样加标平均回收率85%（五氯酚浓度0.23～1.5mg/L，n6）。8.2尿样的采集应在工作周的后半期。尿样采于聚乙烯塑料瓶中，按100mL加入2～3滴盐酸。在冰箱（4℃）中可保存两周。8.3酚及三氯酚的干扰可忽略。 WS/T60-19968.4测定时室温高于30℃时，反应生成的络合物蓝色减弱，因此应在分析样品的同时作标准曲线；测定过程中，加入铁氰化钾后，必须立即加二甲苯萃取，否则对颜色深度有影响。二甲苯分层后的比色时间也应致，最长不得超过2h。8.5质控样用加标的模拟尿或加标的正常人尿时，可以考察准确度及精密度。用接触者尿时可以考察精密度。但人尿不易久存。模拟尿只含人尿的大量成分。附加说明：本标准由卫生部卫生监督司提出。本标准由中国