SN_T 5134-2019森林葱蜗牛检疫鉴定方法.pdf

ICS 65.020.01B 16SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 5134—2019森林葱蜗牛检疫鉴定方法Detection and identification of Cepaea nemoralis (Linnaeus, 1758)2019-09-03发布2020-03-01实施板封公中华人民共和国海关总署HG944440013168发布刮开涂层数活密码 SN/T5134--2019前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由中华人民共和国海关总署提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国福州海关、中华人民共和国张家港海关、中华人民共和国杭州海关、福建省农业科学研究院。本标准主要起草人：王沛、周卫川、陈雅菁、陆军、林阳武、吴志毅、吴宇芬。 SN/T5134—2019森林葱蜗牛检疫鉴定方法1范围本标准规定了森林葱蜗牛的检疫鉴定方法。本标准适用于森林葱蜗牛的检疫鉴定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。SN/T3067一2011软体动物常规检疫规范3术语和定义SN/T3067一2011界定的以及下列术语和定义适用于本文件。3. 1鞭状体flagellum蜗牛雄性生殖系统中的附器，一般由阴茎本体末端分枝形成鞭状体。3.2矢囊dartsack蜗牛生殖系统中一个藏有1枚中空的钙质或壳质骨针的肌肉质的囊。一般用长径与短径之比来描述矢囊的相对大小。3. 3盲管diverticulum受精囊柄分枝形成盲管，盲管的有无、长度和形状常用于分类。3. 4缝合线suture蜗牛贝壳各螺层之间下陷的连接处。缝合线有深有浅，有简单的或锯齿形的。3.5螺轴columella蜗牛贝壳的旋转中轴即称螺轴。3.6轴唇columellalip贝壳壳口的边缘为口唇，按其在壳口中的位置不同可分为内唇、外唇、轴唇、基唇、上唇和下唇，靠近螺轴的口唇即称轴唇，有些种类的轴唇常外折导致脐孔部分或完全被覆盖。4森林葱蜗牛基本信息学名:Cepaea nemoralis (Linnaeus, 1758)。1 SN/T5134—2019异名：HelixnemoralisLinnaeus，1758。英文名：Grovesnail，Brown-lippedsnail。中文名：森林葱蜗牛。分类地位：软体动物门Mollusca，腹足纲Gastropoda，肺螺亚纲Pulmonata，柄眼目Stylommattopgora，大蜗牛科Helicidae，葱蜗牛属Cepaea。森林葱蜗牛的近似种主要有花园葱蜗牛C.hortensis（Muller，1774）和维也纳葱蜗牛C.vindobonensis（Pfeiffer，1821）。森林葱蜗牛的其他信息参见附录A。5原理森林葱蜗牛的传播特点是不需要特定的寄主，凡接触过的物品都可传播。传播方式和生态习性是确定现场检疫方式的依据。贝壳形态、软体解剖和分子特征是实验室鉴定的主要依据。6器具和试剂6.1仪器和用具6.1.1仪器：体视显微镜、微型离心机、恒温金属浴、PCR仪、凝胶照相系统。6.1.2用具：放大镜、手电筒、塑料自封袋、广口标本瓶、4mm孔径土壤筛、小铁铲、游标卡尺、塘瓷盘、培养皿、镊子、剪刀、小剪刀、显微镊子、显微剪刀、微针（直径0.15mm）、解剖蜡盘、标签、1.5mL离心管、0.2mLPCR反应管、移液枪。6.2试剂除另有规定外，所有试剂均为分析纯。无水乙醇、硫酸镁、动物基因组DNA提取试剂盒、PCRMasterMix、ddH2O。7现场检疫对来自疫区（参见附录A)的运输工具和货物实施重点查验。仔细检查运输工具、木质包装材料、未经加工的植物性材料等是否有蜗牛附着其上。森林葱蜗牛昼伏夜出，尤其要注意阴暗处的检查，用手电筒仔细寻找蜗牛的行迹。森林葱蜗牛爬行过后，一般都会留下银灰色的丝带状黏液痕迹，这是判定是否有蜗牛污染的重要依据。发现蜗牛标本，随时装入塑料自封袋或标本瓶带回实验室做进一步的鉴定。发现盆景等携带土壤或其他细碎衬垫材料时，需过筛检查是否有卵或幼螺。8实验室鉴定8.1测量、观察和解剖用游标卡尺测量蜗牛贝壳的壳高、壳宽和卵粒直径。用肉眼或放大镜或体视显微镜仔细观察卵和螺的形态特征。将闷杀处理（见10.1)后的标本，按照SN/T3067-2011中8.3.1进行软体解剖，分离出生殖系统。8.2葱蜗牛属CepaeaHeld，1837鉴定特征贝壳无脐孔，圆球形或稍压扁，具有1条～5条色带或完全缺乏。有5个螺层，体螺层向下倾斜。2 SN/T口倾斜，口缘宽大且内变厚，下缘直。颚片粗壮，具有4条一6条粗肋，齿舌的中央齿和侧齿无齿尖。恋矢有时具有4条裂脊，黏液