NYT 1332-2007乳与乳制品中 5-羟甲基糠醛含量的测定 高效液相色谱法.pdf

ICS 67.100.10C 53NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 1332-2007乳与乳制品中5-羟甲基糠醛含量的测定高效液相色谱法Milk and Dairy Products-Determination of 5-hydroxymethylfurfuralby HPLC2007-04-17 发布2007- 07-01实施中华人民共和国农业部5发布 NY/T 1332--2007前言本标准中附录 A为资料性附录。本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由全国畜牧业标准化技术委员会归口。本标准起草单位：农业部食品质量监督检验测试中心（上海）。本标准主要起草人：孟瑾、郑冠树、韩奕奕、吴榕、韩惠雯。 NY/T 1332—2007乳与乳制品中5-羟甲基糠醛含量的测定高效液相色谱法1范围本标准规定了乳与乳制品中5-羟甲基糠醛(5-HIMF)含量的高效液相色谱测定方法。本标准适用于乳与乳制品中 5-羟甲基糠醛(5-HIMF)含量的测定。本方法检出限为0.005mg/kg。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的必威体育精装版版本。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本适用于本标准。GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法3原理乳与乳制品中蛋白质经沉淀除去,滤液中的5-羟甲基糠醛(5-HMF)经反相高效液相色谱柱分离，以紫外检测器检测,外标法定量。4试剂和材料除非另有规定，仅使用分析纯试剂。4.1 水:GB/T 6682 规定的级水。4.2甲醇(CHOH):色谱纯。4.3草酸溶液1c[(COOH)2]=0.15mol/LI:准确称取 1.8930 g 草酸[(COOH)2·2H2O],溶解并稀释至 100 mL。4.4　亚铁氰化钾溶液:92g/L,准确称取亚铁氰化钾[K4Fe(CN)6·3H2O】106.0g,溶解并稀释至1000mL.4.5乙酸锌溶液:183g/L,准确称取219.0g乙酸锌[Zn(CHsCOO)2·2HO],溶解并稀释至 1000mL。4.6标准溶液4.6.1标准贮备液:每毫升含 5-羟甲基糠醛标准物质 0.3 mg准确称取质量分数不低于99.0%的5-羟甲基糠醛标准物质0.03g，充分溶解于10mL甲醇(4.2)后，用水(4.1)稀释定容至100mL,混合均匀。该溶液每毫升含 5-羟甲基糠醛标准物质0.3mg。冷藏于冰箱中,有效期 90 d。4.6.2标准工作液:每毫升含5-羟甲基糠醛标准物质3.0 μg准确吸取标准贮备液(4.6.1)1.0mL,用水(4.1)稀释定容至 100mL,混合均匀。该溶液每毫升含5-羟甲基糠醛标准物质 3.0 μg。冷藏于冰箱中,有效期 14 d。4.7定量滤纸：中速,直径约15 cmo4.8滤膜:水相,0.45 μm。1 NY/T 1332--20075仪器和设备常用实验室仪器及以下各项。5.1 分析天平:感量0.0001g。5.2高效液相色谱仪:配有紫外检测器。6分析步骤6.1试样制备6.1.1贮藏在冰箱中的待测试样,应在试验前预先取出,并达室温。液态试样准确称取试样 10g,精确至0.000 1g。置于具塞试管中,待测。固态试样准确称取试样1g,精确至0.0001g。置于具塞试管中,乳粉加人约7.3mL25℃左右的温水（4.1）,振摇溶解；干酪加人30mL温水(4.1）,匀浆溶解；黄油试样温热融化,待测。6.1.2试样(6.1.1)中加人5mL草酸溶液(4.3),混合均匀,沸水浴中加热25min,冷却至室温。6.1.3将试样(6.1.2)转移至50mL容量瓶中,用约10mL甲醇(4.2)分次淋洗,使完全转移。加人3mL亚铁氰化钾溶液(4.4)和3mL乙酸锌溶液（4.5），剧烈振摇后静置15min。用甲醇(4.2)定容、混匀,冷却至室温。中速定量滤纸(4.7)过滤,弃去最初的滤液,收集滤液于烧杯中，用滤膜(4.8)过滤,用于高效液相色谱仪(5.2)测定。6.2 液相色谱分析6.2.1 色谱参考条件色谱柱:C18,250 mm ×4.6 mm,5 μmo流动相：甲醇+水(15+85)。流速:1.0 mL/min。检测波长:280 nm。柱温：室温。进样体积：10 μL。6.2.2测定准确吸取各不少于2份的10μL标准工作液(4.6.2)和10uL试液（6.1.3）,分别进样,得到标准工作液和试液中 5-羟甲基糠醛的峰面积,外标法定量。典型色谱图参见附录 A中的图A.1。6.3 空白试验以水(4.1)代替待测样品,按6.2.2步骤同时完成空白试验。7 结果计算试样中5-羟甲基糠醛的含量按式(1)计算：AivL·(1)