NYT 1727-2009稻米中吡虫啉残留量的测定 高效液相色谱法.pdf

ICS 65.100.01G 23NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 1727—2009稻米中吡虫琳残留量的测定高效液相色谱法Determination of imidacloprid residues in rice by HPLC2009-04-23 发布2009-05-20实施中华人民共和国农业部发布 NY/T 1727—2009前言本标准由中华人民共和国农业部种植业管理司提出并归口。本标准起草单位：中国水稻研究所、农业部稻米及制品质量监督检验测试中心本标准主要起草人：陈铭学、牟仁祥、朱智伟、金连登、应兴华、吴俐、许立。1 NY/T 1727—2009稻米中吡虫琳残留量的测定高效液相色谱法1 范围本标准规定了用高效液相色谱法测定精米、糙米、稻谷中吡虫啉残留量的方法。本标准适用于稻米中吡虫啉残留量的测定。本标准的方法检出限为 0.005mg/kg。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的必威体育精装版版本。凡是不注日期的引用文件,其必威体育精装版版本适用于本标准。GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法3原理试样中吡虫啉经乙腈提取，提取液经盐析,过凝胶渗透色谱(GPC)净化,经反相液相色谱分离后，在270nm处检测，根据保留时间进行定性，外标法定量。4 试剂除非另有说明,在分析中仅使用分析纯的试剂,水为GB/T 6682规定的二级水。4:1乙腈：色谱纯。4.2环己烷：色谱纯。4.3乙酸乙酯：色谱纯。4.4氯化钠：（140士2)℃烘烤4h，在干燥器内冷却至室温，贮于干燥器中备用。4.5GPC净化柱填料:Bio-Beads S-X3,200～400 目。4.6吡虫啉标准品：纯度≥98%。4.7吡虫啉标准储备溶液：称取0.0250g(准确至0.0001g)吡虫啉标准品，用乙睛溶解定容至25mL，配制成1000mg/L的标准储备溶液，于一18℃避光保存1年。4.8吡虫啉标准工作溶液：使用前根据需要用乙腈十水(1十3)稀释至适当浓度的标准工作液，0℃～4℃避光保存1个月。5仪器5.1高效液相色谱仪带紫外检测器。5.2凝胶渗透净化仪。5.3GPC净化柱,长 400 mm,内径25 mm。5.4高速匀浆机，转速大于10 000 r/min。5.5 旋转蒸发器。6 分析步骤6.1试样的制备1 NY/T 1727-2009样品经混匀后，缩分至约50g，经研磨至全部通过孔径0.25mm(60目）样品筛，混匀后于一18℃贮存备用。6.2样品处理6.2.1提取称取10g(精确到0.01g)试样于150mL锥形瓶中，加人15mL水，摇匀，静置 20min，加入50.0mL乙，高速匀浆2min，用滤纸过滤，滤液收集到装有5g～7g氯化钠的100mL具塞量筒中，收集全部滤液，盖上塞子，剧烈振摇1min，静置10min，使乙腈相和水相分层。6.2.2净化取50gGPC柱填料,加入适量乙酸乙酯十环已烷(1十1)浸泡过夜。装填，用乙酸乙酯十环已烷(1十1)淋洗，压紧至32cm。移取20.0mL上层乙腈溶液于蒸馏烧瓶中，在55℃水浴中减压浓缩至近干。用乙酸乙酯十环已烷(1十1)溶解残渣,并定容至10.0mL。取5.0mL上凝胶渗透净化仪过GPC柱净化，以乙酸乙酯十环已烷(1十1)为淋洗液，淋洗速度为5.0mL/min,弃去125mL流出液后，收集65mL淋洗液。转人旋转蒸发器于55℃水浴中浓缩至近干，用乙腈十水（1十3)溶解残余物，并定容至2.0mL,混匀。超声脱气后经0.45αm 微孔滤膜过滤,待测。6.3测定6.3.1色谱参考条件 色谱柱:Cls柱,250 mmX4.6 mm,5 μm。检测波长:270 nm。柱温：室温。进样量:20 μL。6.3. 1.5流速:0.75 mL/min。流动相梯度：见表1。表1流动相梯度乙腈(%)水(%)时间(min)80200. 005510.0045802011006.3.2样品测定按仪器条件，对标准工作液和试样溶液等体积交替进样，根据保留时间定性，外标法定量。同时做试剂空白。7结果计算样品中吡虫琳含量以质量分数α计，单位以毫克每千克(mg/kg)表示，按公式(1)计算：cXA, XViXV(1)() m XA2 XV2式中:-标准溶液中吡虫啉质量浓度，单位为毫克每升（mg/L）;A---样品测定液中吡虫啉的峰面积;A2——标准溶液中吡虫啉的峰面积;2 NY/T 1727—2009V--样品定容体积，单位为毫升（mL）；Vi-样品提取液的体积，单位为毫升(mL）；V,-分取乙腈提取液的体积，单位为毫升