SN_T 3297-2012植物种质资源鉴定方法 玉米的鉴定.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 3297—2012玉米的鉴定植物种质资源鉴定方法Detection and identification of Zea mays L2012-10-23发布2013-05-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局查真伙 SN/T 3297-2012前言本标准按照GB/T1.12009给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任，本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准负责起草单位：中华人民共和国吉林出人境检验检疫局本标准参加起草单位：中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国安徽出人境检验检疫局、中华人民共和国湖北出入境检验检疫局。本标准主要起草人：魏春艳、刘金华、刘阳、徐涛、姚剑、孟庆峰、王伟利、王振华、许瑾、曾宪东。I SN/T3297—2012云玉米的鉴定植物种质资源鉴定方法1范围本标准规定了进出境玉米种质资源鉴定的方法。本标准适用于进出境玉米种质资源的检测和鉴定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB1353玉米GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T14072林木种质资源保存原则与方法SN/T1193基因检验实验室技术要求SN/T1584出境玉米检疫操作规程ASTME1342用冷冻、冷冻于燥和低温养护法保存细菌、真菌、原生生物、病毒、遗传要素以及动物和植物组织的保存3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1种质germplasm亲代通过有性生殖过程或体细胞直接传递给子代并决定固有特性的遗传物质。3.2种质资源germplasmresources农作物、畜、禽、鱼、草、花卉等栽培植物和驯化动物的人工培育品种资源及其野生近缘种。3.3荐husk禾本科小穗上的小花，其外面具有两片苞片，在外一片称为外，包着的内部一片称为内。3. 4胚embryo由卵细胞和一个精子受精后发育而成，是种子内未发育的幼小植物体，包括胚芽、胚轴、胚根和子叶四部分。3.5颖果caryopsis单粒种子形成的果实，成熟时果皮、种皮不易分离，此为禾本科植物特有的果实。1 SN/T3297—20123. 6叶舌ligule叶片与叶鞘交界处内侧的膜状突起。叶舌是叶鞘的延长，其大小、形状和毛茸的有无，可作分类依据之一。禾本科的叶舌，常见的有撕裂状叶舌、二深裂叶舌、短叶舌、具睫毛叶舌和长叶舌等3.7叶耳falcate叶鞘与叶片接连处叶缘两侧的伸延物。常将杆卷抱着，末端分离，有时弯曲，多呈耳状或镰刀状。单子叶植物中，部分的禾本科植物具有叶耳，如大麦、小麦、水稻、竹等。在分类上，常根据是否有叶耳，作为区分物种的依据之一。4方法原理玉蜀黍族共有7个属，包括慧苡属（Goi）硬颖草属（Seleruchnme）、多裔黍属（Polytoca）、葫芦草属（Chionachne）、三裂草属（Trilobachne）、玉蜀黍属人Zeu）、摩擦禾属（Tripsacum），其中玉蜀柔属是玉蜀黍族最重要的种属，除栽培玉米亚种外，其他玉米野生近缘材料统称为大台草。玉米与大台草在植株和果穗的形态上存在显著的区别（参见附录A和附录13)。玉米进出境时，可能存在的形态有：种子、植株、叶片、花、花粉、胚、组培苗、原生质体、组织、细胞、核酸（基因组DNA、RNA)等，以形态学方法为主.并借助分子生物学手段作为其分类鉴定的依据，因IVR为玉米内源基因，故将其作为分子鉴定的靶标基因。5仪器、用具和试剂5.1仪器和用具生物显微镜、体视显微镜、光照培养箱、天乎、高压灭菌器、台式高速离心机、pH计、水浴锅、PCR扩增仪、电泳仪、生物安全柜、制冰机、组织粉碎机、凝胶成像系统紫外分光光度计、低温冰箱、研钵、微量加样器（2μL、10μL20μL、200μL、1Q00μL离心管液氮罐等。5.2试剂PCR反应常用试剂、电泳试剂和核酸分子量标准等.除另有规定外，均为分析纯或生化纯，水按照GB/T6682规定的执行。6现场查验现场查验按照SN/T1584执行。7实验室鉴定7.1形态学鉴定方法(参见附录C)7.1.1禾本科Grannineae形态特征一年生或多年生草本，少数为木本。植株散生或丛生，有地下茎。地上茎特称为杆”，常为圆形、有明显的节和节间，节间多中空，很少实心。单叶互生，排成2列，出叶片和叶鞘组成，在叶片和叶鞘的连接处有时有叶舌和叶耳，叶鞘包围茎杆，常一侧开裂。叶片与叶鞘连接处增厚的部分是叶颈。花小，两2 SN/T3297—2012性，稀单性，组成小穗。小穗由一至数朵小花、内颖和外颖组成。由小穗组成穗状花序或圆锥花序。小花由外、内、浆片、雄蕊、雌蕊