SN_T 4520-2016出口动物源食品中硝呋索尔代谢物残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 4520--2016出口动物源食品中硝呋索尔代谢物液相色谱-质谱／质谱法残留量的测定Determination of residue of nifursol metabolites in foodstuffs of animal originfor export--LC-MS/MS method2017-02-01实施2016-06-28 发布中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局登真 SN/T 4520—2016前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准负责起草单位：中华人民共和国上海出人境检验检疫局、中华人民共和国厦门出人境检验检疫局。本标准主要起草人：王传现、张缙、宋青、刘夏、王芳、任硕、方晓明、李晓虹、徐敦明1 SN/T 4520--2016出口动物源食品中硝呋索尔代谢物残留量的测定液相色谱-质谱／质谱法1范围本标准规定了动物源性食品中硝呋索尔的代谢物3,5-二硝基水杨酰耕残留量（3，5-dinitrosalicylicacid hydrazine，简称DNSAH)的液相色谱-质谱/质谱（LC-MS/MS)测定与确证方法。本标准适用于猪肉、鸡肉、鸡肝、猪肝、龙虾、草虾、肠衣、鳗鱼、蜂蜜中硝呋索尔代谢物残留量的测定和确证。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682　分析实验室用水规格和试验方法3方法提要试样中的硝呋索尔代谢物在酸性条件水解,在37℃下用 2-硝基苯甲醛衍生16 h,调节pH为7.0~7.5后，用乙酸乙酯提取，提取液用正已烷脱脂后，供LC-MS/MS测定，外标法定量。4试剂和材料除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的一级水。4.1甲醇：液相色谱级。4.2　乙腈：液相色谱级。4.3乙酸乙酯：液相色谱级。4.4　正已烷：液相色谱级。4.5浓盐酸:含量为36%～38%。4.6氢氧化钠。4.7，磷酸氢二钠。4.82-硝基苯甲醛。4.9二甲亚砜。4.10乙酸铵。盐酸溶液：1.0 mol/L。准确量取 90 mL浓盐酸（4.5），用水定容至1 L。4.11氢氧化钠溶液：1.0mol/L。准确称取40g氢氧化钠（4.6），用水溶解并定容至1I。4.124.13磷酸氢二钠溶液：0.1mol/L。准确称取12g磷酸氢二钠（4.7），用水溶解并定容至1I。4.142-硝基苯甲醛溶液：7.55 mg/mL。准确称取 75.5 mg 2-硝基苯甲醛（4.8），用1 mL二甲亚砜（4.9)溶解，乙腈定容至10mI中，现配现用。4.15乙酸铵溶液：5mmol/L。准确称取385.4mg乙酸铵（4.10），用水溶解并定容至1L。1 SN/T 4520—20164.16乙晴饱和的正已烷：准确量取100ml正已烷（4.4），加人10mL乙睛（4.2），充分混匀，静置后取出上层液体，备用。4.17定溶液：乙酸铵溶液-乙腈（8十2），准确量取80mL5mmol/L乙酸铵溶液（4.15），加人20mL乙腈（4.2），充分混匀，备用。4.18硝呋索尔代谢物标准品：3,5-二硝基水杨酸肼(DNSAH),CAS号：955-07-7,纯度大于或等于99%。4.19标准储备液的配制（0.1 mg/mL）：称取约10mg（士0.1 mg)的DNSAH标准品于100 mL容量瓶中，用适量乙睛溶解，并用乙睛定容，配成0.1 mg/mL标准储备溶液。一18℃避光保存，有效期为6个月。4.20标准中间溶液的配制：吸取DNSAH标准储备液（4.19），用乙稀释至终浓度为100.0μg/L，4℃以下避光保存，有效期为3个月。4.21标准工作液的配制：根据需要，临用时吸取-定量的标准中间溶液（4.20），用乙腈稀释配制成不同浓度的系列标准工作溶液，浓度分别为 0.5 μg/L、1.0 μg/L、2.0 μg/L、5.0 uμg/L、10 μg/L、20 μg/L、50μg/L，4℃以下避光保存，有效期1个月。4.22有机相滤膜:0.2 μm。4.23中性氧化铝:74 μm～149 μm(100 目～200目)。5仪器与设备5.1液相色谱-质谱/质谱仪，配有电喷雾(ESI)离子源。5.2涡旋混合器。5.31恒温振荡器。5.4天平:感量 0.1mg和0.01g。5.5离心机:4 000 r/min。5.6高速离心机：15 000 r/min。5.7氮吹仪。5.8 pH计。6试样制备与保存6.1猪肉、鸡肉、鸡肝、猪肝、龙