SBT 10319-1999熟料消化率测定法.pdf

备案号：2746-1999中华人民共和国行业标准SB/T 10319-1999熟料消化率测定法代替ZBX66032-87Determination of digestibility of steamed material本方法适用于酿造酱油时在制品熟料的消化率测定。消化率系指原料经蒸煮后，其中蛋白质可被酶分解为水溶性肽类或氨基酸的百分比，以此来衡量蒸煮的质量。试剂与仪器1 所用试剂都为分析纯。1.1酶液（10%种曲浸出液）取约20g新鲜种曲，放入锥形瓶中，加20mL50%酒精（酒精：水一1：1）混匀，加180mL水搅拌均匀，置于40℃水浴中浸泡1h，频频摇动，用慢速滤纸或离心机分离（1500～2000r/min）5min，上清液或滤液用福林法测定蛋白酶活力在100单位/mL以上；但酶液的全氮含量须在0.06%以下，如不在此范围内，则须加以调节。酶液不必每次都在测定前进行制备。在几天内可根据需要量，一次制备好，调整好酶活力范围以后置冰箱中备用，但也不宜超过三天。1.2pH7.2磷酸盐缓冲液甲液：称磷酸二氢钠（NaH,PO·2H,O）31.2g，用蒸馏水定容至1000mL。乙液：称磷酸氢二钠（NazHPO.·7H,0）53.7g，用蒸馏水定容至1000mL。取甲液28mL，乙液72mL混合即成pH7.2的磷酸盐缓冲液。1.3高速组织捣碎机，型号DS一1（上海标本模型厂制造）功率200W，转速10000～12000r/min。1.4 水浴锅1.5离心机1.6 测定酶活力、全氮所用试剂、仪器见有关标准（SBT 10317-1999_GB/T 5009.5-85)。：2操作方法2.1熟料浆制备取100g熟料放入高速组织捣碎机中，加蒸馏水300mL。盖好盖子，合上开关，捣搅1min后停机，将飞溅在容器壁上的熟料颗粒用角匙刮下，再继续开机捣碎2min，使熟料捣成均匀勾的料浆。停机、开盖，将料浆倒入烧杯内。用四层纱布盖好备用。1999-04-15 实施国家国内贸易局1999-04-15批准237 SB/T 10819-19992.2测定步骤2.2.1精确称取熟料浆6g左右（精确到0.2mg）于150mL锥形瓶内，加入75mL酶液，再加入pH7.2缓冲液20mL摇匀，在瓶口塞上橡皮塞后，置于水浴锅中。55℃保持2h取出，拔下塞子，放在已煮沸的沸水浴中再煮沸10min。取出冷却，转入100mL容量瓶，定容至100mL。用慢速滤纸过滤，或离心分离10min（1500～2000r/min）。弃去开始滤出的滤液5mL左右。用移液管精确吸取滤液或上清液10mL，严格按照全氮测定法测定水解液的全氮（TN水）。2.2.2精确吸取酶液10mL，并测定其全氮含量（TN酶）。2.2.3精确称取熟料浆2g左右（精确到0.2mg），测出料浆的全氮含量（TN料）。3 计算消化率（%）TN水×1×75×100TN料×6式中：TN水×100——100mL水解液所含总氮量，g;TN酶×75—所加75mL酶液所含的总氮量，g;TN料×6——6g 熟料浆所含总氮量，g。4注意事项4.1料浆要尽量捣碎均匀，捣碎后要及时称量。水解用料浆和测定全氮用料浆要紧接在一起称量，以免水分蒸发而引起误差。4.2酶液可预先制备好。捣碎称量、测定酶液全氮、测定料浆全氮可在酶液浸出过程中和水解过程中交叉进行，以便压缩总的测定时间。4.3为使浓度呈梯度分布的上清液混合均匀，离心结束后须把上清液倾出摇均后再吸取，为防止倾出时把沉淀带出，可把上清液再用快速滤纸过滤一次，减少测定误差。附加说明：本标准由国家国内贸易;局提出本标准由上海市酿造科学研究所起草。本标准主要起草人须凤高。238