SN_T 4747.3-2017进出口食用动物大环内酯类药物残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 4747.3—2017进出口食用动物大环内酯类药物残留液相色谱-质谱/质谱法量的测定Determination of macrolide residues of live animals for import and export-LC-MS/MS2017-12-01 实施2017-05-12 发布中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局到层查真伪 SN/T 4747.3—2017前言本部分为SN/T4747系列标准的第3部分。本部分按照GB/T1.1--2009给出的规则起草本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本部分起草单位：中华人民共和国天津出入境检验检疫局。本部分主要起草人：宓捷波、李淑静、黄晨、王飞、张敏、许泓。I SN/T 4747.3—2017进出口食用动物大环内酯类药物残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法1 范围SN/T4747的本部分规定了进出口食用动物中红霉素、螺旋霉素、替米考星、泰乐菌素、交沙霉素、吉他霉素、竹桃霉素的检测方法。本部分适用于出人境检验检疫工作中牛、羊、猪、鸡血清和牛、猪、羊尿液中红霉素、螺旋霉素、替米考星、泰乐菌素、交沙霉素、吉他霉素、竹桃霉素的检测。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3试剂和材料3.1甲醇;色谱纯。3.2乙腈：色谱纯。3.3叔丁基甲醚:分析纯。3.4磷酸氢二钠:分析纯。3.5甲醇-水1十1)定容溶液：量取50mL甲醇(3.1)和50mL水混合均匀。3.6标准物质：红霉素、螺旋霉素、替米考星、泰乐菌素、交沙霉素、吉他霉素、竹桃霉素和内标物质罗红霉素（见附录A），纯度≥95%。3.7标准储备液：0.1mg/ml。称取3.6所述各标准物质，用甲醇分别配成0.1mg/mL的标准储备溶液，-15℃～20℃保存。3.8混合标准工作溶液：1.0 μg/mL。吸取3.7所述各标准储备溶液1mL于100mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度,2℃～8℃保存。3.9内标储备溶液：0.1 mg/mL。称取 1.0 mg罗红霉素于 10 mL容量瓶中，用甲醇溶解定容至刻度，混。15℃～20℃保存。3.10内标工作溶液：1.0μg/mL。吸取1mL3.9所述内标储备液于100mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度。3.11饱和磷酸氢二钠溶液:称取22 g磷酸氢二钠,溶于 100 mL水中。3.1215 mL具塞离心管。3.130.22 μm滤膜（有机系）。3.14　水:为 GB/T 6682规定的一级水。4仪器和设备4.1液相色谱串联质谱仪：配有电喷雾离子源。1 SN/T 4747.3-20174.2天平：感量分别为0.01g和0.0001g。4.3氮吹浓缩仪。4.4高速冷冻离心机（最高转速可达30000g）。5　样品的采集与保存5.1血样的采集采集动物血样，待自然凝固后分离血清，分装于小管，加盖密封。5.2尿样的采集采集动物尿样，于4℃，30000g离心10min后，上清分装于小管，加盖密封。5.3试样的保存将分装后的血清、尿样于一15℃～一20℃保存。6测定步骤6.1提取6.1.1血清试样称取约1g血清（精确至0.01g）于50mL离心管中，加入50μL内标工作溶液（3.10），再加人2mL 叔丁基甲醚,振荡3 min,4℃ 18 750 g 离心5 min,取叔丁基甲醚层置于 15 mL离心管中,用2mL叔丁基甲醚重复提取2次，合并提取液，40℃水浴氮吹至近干，以1.0mL甲醇-水定容液（3.5)复溶，过0.22 μm滤膜,待测。6.1.2尿样称取约1g尿样（精确至0.01g）,加人1mL饱和磷酸氢二钠溶液用以调节pH≥7,加入50μL内标工作溶液（3.10），再加人 2 mL叔丁基甲醚，振荡3min，4℃ 18750g 离心5min,取叔丁基甲醚层置于15mI离心管中，用叔丁基甲醚重复提取2次，合并提取液，40℃士1℃水浴氮吹至近干，以1.0mL定容液（3.5)复溶，过0.22 μm滤膜，待测。6.2基质工作曲线的配制取空白试样，不加内标工作溶液（3.10），按6.1.1或6.1.2进行提取，获得基质提取液。分别吸取2.5μL、5.0μL、10μL、20uL、50μL混合标准工作溶液（3.8），依次加人相应试剂瓶中，再分别加人50μL内标工作溶液（3.10），用基质提取液定容至 1.0 mL，获得 2.5 ng/ml、5 ng/mL、10 ng/mL、20 ng/mL和 50 ng/mL的系列基质标准混合溶液。6.3测定条件6.3.1液相色谱参考条件色谱柱:Zorbax