SN_T 3134-2012出口动物源性食品中硫柳汞残留量的测定 液相色谱-原子荧光光谱法.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 3134—2012出口动物源性食品中硫柳汞残留量的测定液相色谱-原子荧光光谱法Determination of thimerosal residues in foodstuffs of animal origin forexport--Liquid chromatogram-atomic fluorescence spectrometry(LC-AFS)method2012-11-16 实施2012-05-07 发布中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局 SN/T 3134—2012前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国天津出人境检验检疫局、中华人民共和国深圳出人境检验检疫局、北京吉天仪器有限公司。本标准主要起草人：肖亚兵、高健会、苏毅、林燕奎、王楼明、秦德元、刘欣。1 SN/T 3134--2012出口动物源性食品中硫柳汞残留量的测定液相色谱-原子荧光光谱法 范围1本标准规定了动物源性食品中硫柳汞残留量检测的液相色谱-原子荧光光谱检测方法。本标准适用于出口鱼肉、鸡肉、牛肉、猪肉、羊肉、猪肝、奶粉、鸡蛋中硫柳汞残留量的测定。2方法原理试样中残留的硫柳汞用提取液提取，经液相色谱分离后，先与氧化剂混合，再与空气混合，通过紫外光照射，硫柳汞被氧化成无机汞，最后与还原剂和盐酸发生氢化反应，进人原子化器，进行原子荧光分析测定。外标法定量。3 试剂除另有说明外，所用试剂均为分析纯，实验用永为丢离子永，3.1 乙腈:色谱纯。3.2甲醇：色谱纯。3.3盐酸：优级纯。3.4乙酸胺。3.5半胱氨酸。3.6氢氧化钾。3.7硼氢化钾。3.8 硫脲。3.9氯化钾。3.10过硫酸钾。碱提取液（5%KOH+0.5%硫脲）：称取氢氧化钾（3.6)50g，硫脲（3.8)5g溶于水中，稀释至3.111 000 mL混匀。3.12酸提取液（20%HCI+1%硫脲+0.15%KC1)：量取盐酸(3.3)200 mL，称取硫脲(3.8)10g，氯化钾(3.9)1.5g溶于水中,稀释至1000 mL混匀。3.13载流(7%HC1)：量取盐酸(3.3)70 mL，慢慢倒人 930 mL水中,混匀。3.14还原剂(0.5%KOH+2%KBH4）：称取氢氧化钾（3.6)5g、硼氢化钾（3.7)20g溶于水中,并稀释至1000 mL混匀。3.15氧化剂(0.5%KOH+0.3%K,S2O：）：称取氢氧化钾(3.6)5g，过硫酸钾（3.10)3g溶于水中,并稀释至1 000 mL混匀。3.16清洗液:量取甲醇(3.2)10 mL,倒人 90 mL水中,混匀。3.17硫柳汞(thimerosal,CAS 号:54-64-8,C,H,OzHgNaS)标准品:纯度大于等于 97%。3.18硫柳汞标准储备溶液：准确称取适量的硫柳汞标准品，用去离子水配成浓度为1 mg/mL的标准储备液。在0℃～4℃下保存。1 SN/T 3134—20123.19硫柳汞标准工作溶液：根据需要用去离子水将标准储备溶液稀释成适当浓度的标准工作液。在0℃～4℃下保存。4仪器与设备4.1形态分析预处理装置。4.2原子荧光光谱仪。4.3高压液相泵。4.4高速均质器。4.5 离心机:10 000 r/min。4.6涡旋混合器。4.7 纯水仪。5试样制备与保存5.1试样制备5.1.1 肉及肝脏将鱼肉、鸡肉、牛肉、猪肉、羊肉、猪肝等有代表性样品约500g用绞肉机绞碎，混匀，均分成两份，分装人洁净的盛样袋内，密封并标明标记。5.1.2奶粉、鸡蛋取有代表性样品500g(鸡蛋需去壳），搅拌均匀后，均分成两份，分装人洁净的盛样袋内，密封并标明标记。5.2试样保存肉及肝脏试样于一18℃以下冷冻保存；奶粉和鸡蛋试样于0℃～4℃保存。在制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。6测定步骤6.1提取称取2.5g(精确到0.01 g)试样于 50 mL离心管中，加10 mL碱提取液（3.11），均质 2 min 后，10000r/min离心5min,将上清液转移至50mL容量瓶中。残渣中再加人5mL碱提取液（3.11），在涡旋混合器上充分混合后，10000r/min离心5min，上清液合并至同一容量瓶中。残渣中再加人5mL酸提取液（3.12），在涡旋混合器上充分混合后，10000r/min离心5min，上清液合并至同一容量瓶中，用盐酸(3.3)或氢氧化钾(3.6)调节pH为 4～7,用水定容至刻度。此溶液过 0.45 μm滤膜后，供液相色谱-原子荧光光谱测定。6.2测定6.2.1液相色谱条件↑色谱柱:Cis柱