SBT 10315-1999孢子数测定法.pdf

备案号：2742-1999中华人民共和国行业标准SB/T 10815-1909孢子数测定去代替ZB X 66028--87Enumeration of spore一菌种的孢子数测定。本方法适用于酿造酱油半成品-1 仪器与试剂a.显微镜、血球计数板、盖片;b.95%酒精、稀硫酸（1：10);c、天平：感量0.001g。2操作方法2.1样品稀释：精确称取种曲或二级菌种1g（称准至0.002g），倒入盛有玻璃珠的250mL锥形瓶内，加95%酒精5mL，加无菌水20mL，加稀硫酸10mL，充分振摇，使分生孢子个个分散，然后用多层纱布过滤、冲洗，务使滤渣不含孢子，稀释至500mL。2.2制片：取稀释液1滴，滴于血球计数板的计算格上，然后将盖片轻轻由一边向另一边压下，使盖片与计数板完全密合，液中无气泡，用滤纸吸干多余的溢出悬浮孢子液，静置数分钟，待孢子沉降。2.3观察计数：用低倍镜头或高倍镜头观察。由于稀释液中的孢子，在血球计数板上处于不同的空间位置，要在不同的焦距下才能看到，因而计数时必须逐格调动微细螺旋，才能不使遗漏。孢子常位于大格的划线上，应一律取二边计数，而弃另二边，以减少误差。使用16×25的计数板时，只计板上四个角上的.4个大格（即100个小格）。如果使用25×16的计数板，除计四个角的4个大格外，还需要计中央一大格的数目（即80个小格）。每个样品重复观察计数不少于2次，然后取其平均值。即为该样品种曲的孢子数。3 计算3.116×25的计数板VX 400×10000 X孢子数（个/克）C100nV(1)=4X10*XG100小格内孢子总数，个；式中： n一一孢子稀释液体积，mL;V-1999-04-15 实施国家国内贸易局1999-04-15批准226 SB/T 10815-1999G——样品重量，g。3.225×16的计数板Ln×400×10000×孢子数 (个/克)=G80nV=5×10*×(2)C式中：n-80小格内孢子总数，个;；V-一孢子稀释液体积，mL;G——样品重量，g。注意事项4.1称样要尽量防止孢子的飞扬。4.2测定时，如果发现有许多孢子结集成团或成堆，说明样品稀释未能符合操作要求，因此必须重新称重、振摇、稀释。4.3生产实践中应用时，种曲以干物质计算。因而需要同时测定种曲水分，计算时样品重量则改为绝干重量。(3)样品绝干重量-G（1－W)式中：G-—样品重量，g;W-样品水分的百分比含量，%。附加说明：本标准由国家国内贸易 局提出。本标准由上海市酿造科学研究所起草。本标准主要起草人须凤高。227