SN_T 3625-2013出口食品中细辛醚含量的测定 液相色谱法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 3625—2013出口食品中细辛醚含量的测定液相色谱法Determination of asarone in food for export--Liquid chromatographic method2013-08-30 发布2014-03-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局驾南 SN/T 3625-2013前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国浙江出人境检验检疫局。本标准主要起草人：彭芳、雷美康、杨兰花、许菲菲、丁慧瑛、韩超、徐建设。I SN/T 3625--2013出口食品中细辛醚含量的测定液相色谱法1范围本标准规定了食品中白菖蒲油主要成分α-细辛醚和 β-细辛醚含量的液相色谱测定方法。本标准适用于伏特加、白酒、猪肉、熏鱼肉、绿豆糕、调料粉、奶粉等出口食品中α-细辛醚和β-细辛醚含量的测定。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法3方法提要试样中的细辛醚用乙腈提取，浓缩后经硅胶固相萃取小柱净化洗脱液浓缩后用甲醇溶解定容，液相色谱荧光检测器测定，外标法定量。酒精类饮料样品过滤膜直接上机测定。1试剂和材料水为GB/T 6682规定的一级水4.1 乙酸乙酯:HPLC级。4.2 乙腈:HPLC级。4.3 正已烷:HPLC级。4.4甲醇:HPLC级。4.5细辛醚标准品：α-细辛醚。CAS号为2883-98-9，相对分子质量为208.25,纯度大于或等于98%；β-细辛醚，CAS号为5273-86-9，相对分子质量为208.25，纯度大于或等于95%。4.6标准储备液的配制：准确称取适量的细辛醚标准品，用甲醇配制成浓度为1.0 mg/mL的标准储备溶液。该溶液配制于棕色容量瓶中，一18℃以下避光保存。4.7标准中间溶液的配制：用甲醇将标准储备液浓度逐级稀释至1.0 μg/mL。该溶液配制于棕色容量瓶中，18℃以下避光保存。4.8标准工作溶液的配制：根据需要，临用时吸取一定量的标准中间溶液，用甲醇配制成适当浓度的混合标准工作溶液。在0℃～4℃避光冷藏保存。4.9硅胶固相萃取小柱:1g,6mL。使用前依次用5mL乙酸乙酯，5mL正已烷活化。4.10微孔滤膜:0.45 μm,有机系。1 SN/T 3625--20135仪器和设备5.1高效液相色谱仪，配有荧光检测器。5.2　电子天平：感量分别为0.01 g,0.0001 g。5.3组织捣碎机。5.4 涡旋振荡器。5.5真空旋转蒸发仪，配100 mL鸡心瓶。5.6固相萃取装置。5.7 离心机:不低于4 000 r/min。5.8离心管:15 mL,50 mL。6试样的制备与保存6.1猪肉、熏鱼肉等试样取代表性样品500g。将其切碎后，依次用捣碎机将样品捣碎混匀，分装入洁净的盛样袋内，密封并标明标记。6.2伏特加和白酒等试样取代表性样品500L。混匀，装人洁净的容器内，密封并标明标记。6.3绿豆糕、调味粉和奶粉等试样取代表性样品500g，依次用捣碎机将样品捣碎混匀，分装人洁净的盛样袋内，密封并标明标记。6.4试样的保存猪肉、熏鱼肉、绿豆糕、调味粉和奶粉等试样于一18℃冰箱避光冷冻保存；伏特加和白酒试样于0℃～4℃ 避光保存。在制样和试样的保存过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。7 测定步骤7.1猪肉、熏鱼肉、绿豆糕、调味粉和奶粉7.1.1 提取准确称取5g试样（精确到0.01g)置于 50 mL具塞离心管中,加人20 mL乙腈，涡旋振荡 5min，以4000r/min离心5min，将上清液转移至鸡心瓶中，再用20 mL乙腈重复上述提取步骤，合并提取液。在45℃下减压旋转蒸发浓缩至干,加人3mL正已烷，涡旋振荡溶解，待净化。7.1.2　净化将待净化溶液（7.1.1)转移至固相萃取柱（4.9）中，用3mL正已烷冲洗鸡心瓶，洗液上柱淋洗，弃去淋洗液，用8mL乙酸乙酯洗脱，收集洗脱液至上述鸡心瓶中.在45℃下减压旋转蒸发浓缩至干，用2 SN/T 3625—20132 mL甲醇溶解残渣,溶解液过滤膜(4.10),待测。7.2白酒和伏特加吸取适量试样置于15 mL离心管中,过滤膜(4.10),待测。7.3 测定7.3.1色谱条件色谱条件如下：a）色谱柱:Ci:柱,250 mmX4.6 mm(内径),5 μm;b）流动相：甲醇-水溶液（60十40，体积比）；c）流速:1.0 mL/min;d）检测波长：激发波长265nm：发射波长365nm；e）进样量：20μL