SN_T 4656.4-2016进出口纺织品生物安全检验方法 第4部分：金黄色葡萄球菌.pdf

SE中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 4656.4—2016进出口纺织品生物安全检验方法第4部分：金黄色葡萄球菌Biosafety testing methods of the textiles for import and export-Part 4 : Staphylococcus aureus2016-12-12 发布2017-07-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局 SN/T 4656.4—2016前言SN/T4656《进出口纺织品生物安全检验方法》共分为5部分：第1部分：白假丝酵母菌；第2部分：大肠埃希氏菌；第3部分：大肠菌群；第4部分：金黄色葡萄球菌；第5部分：菌落总数。本部分为SN/T4656的第4部分。本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本部分起草单位：中华人民共和国河南出境检验检疫局、四川农业大学。本部分主要起草人：李辑、郭会清、郭华麟、韩国全、禹建鹰、苗丽、徐超、乔晴、杨娜。 SN/T 4656.4--2016进出口纺织品生物安全检验方法第4部分：金黄色葡萄球菌1范围SN/T4656的本部分规定了进出口纺织品中金黄色葡萄球菌的定性、定量检验方法。本部分适用于进出口纺织品金黄色葡萄球菌的检验。其他纺织类产品可参考使用本部分。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T8170数值修约规则与极限数值的表示和判定SN/T1538.1培养基制备指南第1部分：实验室培养基制备质量保证通则SN/T 1538.2培养基制备指南第2部分：培养基性能测试实用指南3术语和定义下列术语和定义适用于本文件3.1纺织品生物安全biosafety of textiles纺织品中携带的有害生物本身或其代谢产物对生态环境和人体健康产生的潜在威胁，及对其所采取的一系列有效预防和控制措施。3.2金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus在36 ℃土1℃条件下,Baird-Parker 培养基或血平板培养基上生长良好,分解甘露醇产酸，血浆凝固酶阳性的革兰氏染色阳性的葡萄状球菌。4设备与材料4.1常规微生物检测用的基本设备与材料。4.2无菌剪刀。4.3电子天平：0.01g。4.4全滤网无菌均质袋。4.5.拍击式均质器：400 mL。4.6无菌规格板：20cm²。4.7无菌干燥棉拭子。4.8恒温培养箱：36℃±1℃。4.9接种环。4.10显微镜:10×～100×。 SN/T 4656.420164.11无菌试管 8 mmX100 mm。4.12微量移液器:200 μL～1000 μL。4.13无菌小三角瓶：25ml。4.14无菌吸头：1000μuL。4.15无菌L形玻璃捧。4.16 冰箱:2℃～8℃。4.17放大镜(放大5倍～10倍)或菌落计数器。5 培养基、试剂5.1磷酸盐缓冲液：见A.2。5.2无菌生理盐水：见A.3。5.3SCDLP 培养基:见 A.4。5.4金黄色葡萄球菌显色培养基：见A.5.5.5Baird-Parker 培养基:见 A.6。5.6营养琼脂平板：见A.7。5.7普通肉汤培养基：见A.8。5.8革兰氏染色液：见 A.9。5.9兔血浆:见A.10。5.10金黄色葡萄球菌测试片。注：本部分中无菌稀释液均为磷酸盐缓冲液（5.1)或无菌生理盐水(5.2)或SCDLP培养基(5.3）。6样品制备6.1称量法无菌方法打开用于检测的样品，用无菌剪刀（4.2)均匀剪样，在电子天平（4.3）上准确称取剪下的样品25g样品。剪碎后加人到盛有225mL无菌稀释液的全滤网无菌均质袋（4.4）中，用拍击式均质器（4.5)拍打1min～2min,充分混勾,得到一个1：10 的样品匀液。6.2多点采样洗脱法无菌方法打开送检的样品，在样品四周和中间均匀布控5个采样点，用无菌规格板（4.6)按每个采样点20cm面积范围剪裁，每20平方厘米采样面积为1份检样，每个样品共采集5份检样，采样面积为100cm²。将上述采集好的5份检样放人盛有200mL无菌稀释液的全滤网无菌均质袋（4.4)中，用拍击式均质器（4.5)拍打1min～2min，充分混勾，得到一个洗脱液，制成样品匀液作为原液。6.3棉拭子涂抹法无菌操作方法打开送检的样品，用无菌稀释液湿润无菌干燥棉拭子（4.7），在样品四周和中间均匀布控5个采样点，用无菌规格板（4.6)比照按每个采样点20cm²面积范围均匀涂抹，每个采样点用1个无菌干燥棉拭子（4.7），立即用无菌剪刀（4.2)剪去棉拭子手接触部分，将涂抹部分一块放人盛有50mL无菌稀释液的全滤网无菌均质袋（4.4)中，制