NY_T 2727-2015蔬菜烟粉虱抗药性监测技术规程.pdf

ICS 65.020B 16NY中华人民共和国农业行业标准NY/T2727—2015蔬菜烟粉虱抗药性监测技术规程Guideline for insecticide resistance monitoring ofBemisia tabaci (Gennadius) on vegetables2015-05-21发布2015-08-01实施中华人民共和国农业部发布 NY/T 2727—2015前言本标准按照GB/T1.1--2009给出的规则起草。本标准由农业部种植业管理司提出并归口。本标准起草单位：全国农业技术推广服务中心、中国农业科学院蔬菜花卉研究所、天津市植保植检站。本标准主要起草人：张帅、张友军、邵振润、王少丽、杨爱宾、谢文。- NY/T2727—2015蔬菜烟粉虱抗药性蓝测技术规程1范围本标准规定了琼脂保湿浸叶法对烟粉虱[Bemisiatabaci（Gennadius）成虫、浸茎系统测定法和叶片浸渍法对烟粉虱若虫和卵抗药性的蓝测方法。本标准适用于烟粉虱成虫、若虫和卵对常用杀虫剂的抗药性监测。2术语和定义下列术语和定义适用于本文件。2. 1琼脂保湿浸叶法leafdippingmethod将浸过药液的叶碟放在玻璃管底部平铺的固体琼脂上，昆虫通过接触和取食带毒叶片而进行生物测定的方法。2. 2 浸茎系统测定法stemdippingmethod将带有供试昆虫的植物茎部插入装有药液的玻璃瓶中饲养，昆虫通过取食进人植物体内并传导扩散的药剂而进行生物测定的方法。2. 3叶片浸渍法leaf-pestdippingmethod将带有供试昆虫的植物叶片浸渍在药液中，昆虫通过接触药液和取食叶片而进行生物测定的方法。3试剂与材料3.1生物试材试虫：烟粉虱成虫、若虫和卵。供试植物：甘蓝苗和棉花苗。成虫采用甘蓝叶片，若虫和卵采用棉花苗。3.2试验药剂杀虫剂原药。3.3试验试剂TritonX-100（或吐温-80）；丙酮（对不易溶解的药剂，可添加其他助溶剂）；所用试剂为分析纯，水为蒸馏水。4仪器设备电子天平（感量0.1mg）；打孔器（直径2.2cm）；平底玻璃管（长7.8cm，直径2.2cm）；微波炉；移液器（5mL）；容量瓶（10mL、50mL、100mL、500mL）；量筒（500mL）；1 NY/杯(10mL、25mL、100mL、500mL)；塑料培养皿（直径5cm）；吸虫器；棕色玻璃瓶（10mL）；显微镜；人工气候箱：温度（25士1)℃、相对湿度60%～80%、光照周期16h：8h（L：D）。5试验步骤5.1试材准备5.1.1无虫苗培育甘蓝苗的培育PUBLIBLISHINGRD料将甘蓝籽播种到装好料在的单出苗，待甘蓝苗生长后过20d～30d后，即4片什NDG棉花苗的培到装好RESE将催芽后的棉思，无虫温室内培育，叶片直径2cm棉美P时，从根部切断棉10力ZS5.1.2试虫准备蛋风虫选当地具有性的农2块地采集烟电院1000头放采集带置于玻璃试管内伪蛹的植粉虱的型。养，鉴定UT接虫产卵：造过的培养皿养血中。方法如下直径3cm血的的圆孔，用直径cm的封上在培养血底各开一个力100自纱网米直径约为1cm国的中间位圆内A骨将海绵切于放置棉每茎，另一侧用于计背面卵的产地24数目，至少20粒25.2药剂配制c5.2.1琼脂玻璃E爱用三角瓶配制波炉h，至瓶口无热D气涌出。用微量移液平底玻璃管底人05.2.2药剂溶解和配制度 0. 1% Triton X 准确称取一定量的原用有机溶齐或0.1%吐温-80）定容，配制成母液。用移液管吸液，用1溶液度配制片7个系列浓度。每个浓度药液量不少于250mL。5.3处理方法5.3.1叶碟制作及浸药用打孔器将新鲜、平展的甘蓝叶片打成直径2.2cm叶碟，避开叶脉部位。将叶碟浸于待测药液中，10s后取出晾干，叶背向上平铺于琼脂玻璃管中。按浓度从低到高的顺序重复上述操作，每处理不少于4次重复，并设不含药剂的Triton水溶液作空白对照。5.3.2接虫与计数烟粉虱成虫琼脂保湿浸叶法：将铺好叶碟的玻璃管，管口朝下倾斜放在有烟粉虱成虫的寄主植物上，轻拍植株或用吸虫器等使烟粉虱进人管内，每管20头～25头，将棉塞塞至距离管底1.5cm处。接虫30min后。记录每管内的活虫数（即总虫数）。2 NY/T2727—20烟粉虱卵将带卵棉苗置于显微镜下检查记录每叶卵数，进行药剂处理。内吸性杀虫剂采用浸茎系统测定法，非内吸性杀虫剂采用叶片浸渍法。浸茎系统测定法：将带卵棉苗的棉茎插人装有10mL药液的棕色玻璃瓶中，并设空白对照。叶片浸渍法：将带卵棉苗的叶片浸人药液中，20s后取出晾干，将棉茎插人装有清水的棕色玻璃瓶中，并设空白对照。烟粉虱若虫将带有发育至2龄若虫的棉叶置于显录若虫基数，采用浸茎系统测定法或叶片浸渍法进行测定。5.