NY_T 1970-2010饲料中伏马毒素的测定.pdf

ICS 65.120B 46NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 1970--2010饲料中伏马毒素的测定Determination of fumonsins in feeds2010-12-23 发布2011-02-01实施中华人民共和国农业部发布 NY/T 1970—2010言前本标准遵照GB/T1.1一2009给出的规则起草本标准包括两个方法：液相色谱串联质谱法和液相色谱法,其中，液相色谱串联质谱法为仲裁法。本标准由中华人民共和国农业部畜牧业司提出。本标准由全国饲料工业标准化技术委员会（SAC/TC76）归口。本标准起草单位：农业部农产品质量安全监督检验测试中心（宁波）。本标准主要起草人：吴银良、皇甫伟国、杨挺、孙亚米、王立君、赵健、朱勇、陈国、吕燕。 NY/T 1970—2010饲料中伏马毒素的测定1范围本标准规定了饲料中伏马毒素B,和伏马毒素B2含量的液相色谱串联质谱测定方法和液相色谱测定方法。本标准适用于植物源性饲料原料、精料补充料、配合饲料和浓缩饲料中伏马毒素B1和伏马毒素B2含量的测定。本标准的方法检出限和定量限：液相色谱串联质谱法的检出限为0.01mg/kg，定量限为0.05mg/kg;液相色谱法的检出限为0.01 mg/kg,定量限为0.05mg/kg。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T 14699.1饲料　采样GB/T 20195　动物饲料　试样的制备3试样制备按GB/T14699.1抽取有代表性的饲料样品，按GB/T20195用四分法缩减至500g，粉碎后过0.45 mm孔径的分析筛,混匀后装人密闭容器。4液相色谱串联质谱法(仲裁法）4.1原理试样中伏马毒素B1和伏马毒素B²用甲醇溶液提取，提取液经强阴离子固相萃取小柱净化后，用液相色谱一串联质谱仪测定，采用色谱保留时间和质谱碎片离子丰度比定性，基质校准外标法定量4.2试剂和材料除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和符合GB/T6682规定的一级水。4.2.1甲醇：色谱纯。4.2.2甲酸：色谱纯。4.2.3乙酸：优级纯。4.2.4氢氧化钠溶液(0.2mol/L)：准确称取4g氢氧化钠于烧杯中，加适量水溶解后，移人0.5L容量瓶中,加水定容至刻度。4.2.5盐酸溶液(0.2mol/L)：准确移取18mL盐酸于1 L容量瓶中,加水定容至刻度,混匀后备用。4.2.6乙酸甲醇(1%)：准确移取10mL乙酸于1L容量瓶中,加甲醇定容至刻度，混匀后备用。4.2.7甲酸甲醇溶液(0.1%）：准确移取1mL甲酸于1L容量瓶中，用甲醇定容至刻度，混匀后备用。4.2.8甲酸溶液(0.1%）：准确移取1mL甲酸于1L容量瓶中，用水定容至刻度，混匀后备用。4.2.9甲醇溶液（75%）：取甲醇750mL加水250ml,混匀后备用。4.2. 10伏马毒素B1,纯度≥95.0%。4.2. 11 伏马毒素 B2,纯度≥97. 0%。1 NY/T 1970--20104.2.12伏马毒素标准储备液：分别准确称取适量伏马毒素B和伏马毒素B2标准品，用甲醇溶液（4.2.9)溶解并定容至10mL，配制成200mg/L的标准储备液，一18℃冰箱中保存，有效期6个月。4.2.13混合标准储备液：取伏马毒素B和伏马毒素B²标准储备液（4.2.12)以1：1比例混合，得混合标准储备液，浓度为100mg/L，一18℃冰箱中保存,有效期6个月。4.2.14混合标准中间液：准确移取10mL混合标准储备液（4.2.13)于100mL容量瓶中，用甲醇溶液（4.2.9)定容至刻度，浓度为10mg/L，一18℃冰箱中保存，有效期3个月。4.2.15强阴离子交换固相萃取柱：500mg,3mL。使用前依次用5mL甲醇、5mL甲醇溶液（4.2.9)活化。4.2.16空白试料：含伏马毒素Bl和伏马毒素Bz均小于0.05mg/kg的植物源性饲料原料；含伏马毒素 Bl 和伏马毒素 B² 均小于 0.25 mg/kg 的精料补充料、配合饲料和浓缩饲料。4.3仪器和设备4.3.1液相色谱串联质谱仪：配电喷雾离子源。4.3.2离心机：最大转速5000r/min或以上。4.3.3分析天平：感量0.01mg。4.3.4天平：感量0.01g。4.3.5超声波清洗器。4.3.6氮吹仪。4.3.7固相萃取装置。4.3.8涡旋混合器。4.3.9 pH计。4.3.10匀质器。4.4分析步骤4.4.1提取称取 2g试样(精确到0.0lg)于50 mL离心管中,加人10mL甲醇溶液（4.2.9），涡旋1min,然后超声提取 5min，以5000r/m