SN_T 4816-2017进出口食用动物中磺胺类药物残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 4816—2017进出口食用动物中磺胺类药物残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法Determination of sulfonamides residues in live animals for import andexport--LC-MS/MS2018-03-01实施2017-07-21 发布中华人民共和国发布KX国家质量监督检验检疫总局698231刮涂层查真伪 SN/T 4816-2017前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国辽宁出人境检验检疫局。本标准主要起草人：姚佳、张旭东、苏明明、闫超杰、孙兴权、孙剑、丁艳、刘芳伊。1 SN/T 4816—2017进出口食用动物中磺胺类药物残留量的测定液相色谱一质谱/质谱法1范围本标准规定了进出口食用动物的血清、尿液中共计14种磺胺药物残留量高效液相色谱-质谱/质谱测定方法。本标准适用于禽类和畜类动物血清，畜类动物尿液的磺胺间二甲氧基嘧啶、磺胺邻二甲氧嘧啶、磺胺喹恶啉、三甲氧胺嘧啶、磺胺氯哒嗪、磺胺甲氧哒嗪、磺胺-5-甲氧嘧啶、磺胺-6-甲氧嘧啶、磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲基嘧啶、磺胺噻唑、磺胺甲基异嗯唑、磺胺嘧啶、磺胺吡啶残留量的测定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3原理血清中磺胺类药物用乙腈和乙酸乙酯提取，尿液中磺胺类药物用乙酸乙酯提取，经乙腈饱和的正已烷脱脂净化，用HPLC-MS/MS检测，外标法定量。4　试剂和材料4.1除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。4.2乙腈：色谱纯。4.3乙酸乙酯：色谱纯。4.4正已烷：色谱纯。4.5氯化钠：分析纯。4.6甲酸:色谱纯。4.70.1%甲酸溶液：移取1mL甲酸（4.6），用水稀释并定容至1000mL，混匀。4.8乙腈饱和的正已烷：200mL正已烷中加人40mL乙腈，充分震摇，静置分层后待用。4.9空白基质提取液的配制：分别取阴性的血清和尿液样品1mL，按7.1操作。4.10标准物质：磺胺间二甲氧基嘧啶、磺胺邻二甲氧嘧啶、磺胺喹恶啉、三甲氧胺嘧啶、磺胺氯哒嗪、磺胺甲氧哒嗪、磺胺-5-甲氧嘧啶、磺胺-6-甲氧嘧啶、磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲基嘧啶、磺胺噻唑、磺胺甲基异唑、磺胺嘧啶、磺胺吡啶，纯度大于或等于99%。4.11标准储备溶液（100μg/mL）：准确称取各磺胺标准品10mg，分别置于100mL容量瓶中，甲醇溶解，定容至刻度，摇匀，得磺胺各标准储备液。每种磺胺标准品的浓度为100μg/mL，1℃～4℃冰箱保存,有效期1个月。4.12基质混合标准工作溶液：根据每种磺胺的灵敏度和仪器线性范围，用空白基质提取液配制成不同1 SN/T度（ng/mL)的基质混合标准工作溶液，基质混合标准工作液在1℃～4℃冰箱保存，可使用两周。5仪器和设备5.1高效液相色谱串联二级质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI)。5.2均质器。5.3旋转蒸发器。5.4氮吹仪。5.5涡旋混均器。5.6分析天平：感量0.1 mg和0.01 g各一台。5.7真空泵。5.8离心机。5.9超纯水机。5.100.22 μm有机相微孔滤膜。6试样制备与保存6.1试样制备将采集的血液置于未加抗凝剂处理的试管中，避光静置过夜，离心，上清液为血清，将血清用无菌容器分装，做好标签。尿液样品装人洁净的容器中加封做好标签。制样过程中应防止试样受到微生物及化学物的污染或发生残留变化。6.2试样保存血清样品于-5℃～一2℃条件下保存，尿液样品于一20℃～一18℃条件下保存。7测定步骤7.1提取和净化7.1.1血清:移取试样1 mL或称取试样 1g(精确至 0.1g）,置于 50 mL塑料离心管中,加人1 mL水和0.6 g氯化钠，混匀。加人乙腈4 mL，摇匀，再加人11mI.乙酸乙酯，充分涡旋提取，8000r/min离心5min。准确移取8mL上清液置于鸡心瓶中,38℃水浴中减压浓缩至近干。加人1 mL流动相（0.1%甲酸：乙腈为76：24)溶解残渣，再加1mL乙睛饱和的正已烷，振摇，溶液转移至玻璃离心管中，3000r/min离心5min，移取下清液过微孔滤膜，供液相色谱串联质谱仪测定。7.1.2尿：移取试样 1 mL或称取试样1g(精确至0.1g）,置于 50 mL塑料离心管中,加人1 mL水和2.5g氯化钠，混匀，加人15mL乙酸乙酯，充分涡旋提取，800