NY_T 2339-2013农药登记用杀蚴剂药效试验方法及评价.pdf

ICS 65.100B 17NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 2339—2013农药登记用杀坳剂药效试验方法及评价Efficacy test methods and evaluation of cercaria-killing for pesticide registration2013-05-20 发布2013-08-01实施中华人民共和国农业部发布 NY/T2339—2013前言本标准按照（GB/T1.1-2009给出的规则起草.本标准出中华人民共和国农业部提出并归口。本标准起草单位：农业部农药检定所、江苏省血吸虫病防治研究所。本标准主要起草人：戴建荣、李贤宾、朱春雨、张佳、王晓军、张宏军、张文君。1 NY/T2339—2013农药登记用杀坳剂药效试验方法及评价1范围本标准规定了本血吸虫（Schistisommujuponicum）尾坳杀蜘剂室内和模拟现场药效试验方法和药效评价指标。本标准适用于农药登记用杀坳剂的效果评价。2术语和定义下列术语和定义适用」本义件2. 1幼cercaria日本血吸虫尾蝴日本血吸虫生活史的-·个阶段，由体部和尾部组成；尾感染终宿主后发育成熟为日本而吸虫成虫。2. 2 感染性钉螺infectedOncomelania snail这里仅指能逸出口本血吸虫尾的钉螺。2. 3虫负荷wormburden小鼠体内感染日本血吸虫成虫的数量。3仪器设备3.1体式显微镜：放大倍数不低于10倍。3.2塑料杯：直径7cm～10cm.高10cm圆柱形带盖塑料杯，杯盖开有直径0.5cm的通气孔3个～5个。3.3玻璃：50cmX25cm×25cm矩形玻璃缸。3.4铁丝笼：用铁丝制作成长方体网格型鼠笼，鼠笼规格为45cm×7cm×7cm，隔成5格，周边网格孔径1cm。鼠笼的两端有可调挂钩，使测定鼠笼可挂于玻璃征上，：小鼠腹部和尾部接触到缸中水面。3.5培养板：24孔或16孔培养板。3.6移液器或微量移液管：0.1μl~200μL。3.7医用乳胶手套。4试剂与材料4.1生物试材4.1.1日本血吸虫尾蜘：将30只～50只日本血吸虫感染性钉螺，放人100ml的烧杯中，上盖尼龙沙网.倒人28℃脱氯水至淹没沙网，在白炽灯下逸蝴2h，获得尾蜘备用。4.1.2实验小鼠：选取体重（20士2)g清洁级小鼠，在卫生纸为垫料的饲养盒中饲养1d以1:，去除小鼠皮肤可能沾有的松油后备用。4.1.3感染性钉螺：获取50只以上口本血吸出感染性钉螺，在钉螺饲养盘中28℃饲养7d以上待用。 NY/T 2339—20134.2试验药剂原药与制剂。4.3对照药剂选择已登记的常用药剂。4.4空白对照脱氯自来水。5试验条件与方法5.1试验条件温度为（25十1）℃，相对湿度为（60+5）%。5.2杀蜘活性测定根据药剂特性，水溶性药物直接用脱氯水稀释，非水溶性药物选用适当的助剂进行稀释，将试验剂配制成5个～7个等比浓度。在培养板的各孔中加入2ml.脱氯水，用接种环吊取新逸出的日本血吸虫尾蜘10条30条放人培养孔中，然后在各孔中分别滴入上述各浓度药液10ul..设对照药剂组和空凹对照组.每浓度组处理3孔以上，用针刺法观察尾坳的死亡情况，记录5min和30min尾坳死亡数.计算LC值。试验不少于3次重复。5.3杀蜘感染试验设3个待测药剂剂量组，1个对照药剂组和1个空白对照组。将30mlL脱氯水倒人圆柱形带盖塑料杯，移人200条刚逸出的日本血吸虫尾蝴，分别将.1述各剂量组药液施于水体表面.在用药后（.5h。每个杯内放入1只实验小鼠并加盖，0.5h后，将小鼠移入饲养盒内，分组常规饲养，35d后按鼠解剖法解剖收集血吸出虫体.计数检获成虫数，计算感染率下降率和出负荷下降率。每个剂量组10只鼠。试验不少于3次重复。5.4模拟现场试验设3个待测药剂剂量组：1个对照药剂组和1个空白对照组。取50cm×25cm×25cm矩形玻璃l10只，分别注人28℃脱氯水201，然后在各缸中放置10只~20只感染性钉螺.1h后分别将.1述各剂量组药液施于水体表面.在用药后0.5h和2h，分别将装有10只小鼠的铁丝笼悬浮于水体表面.使得小鼠腹部和尾部接触水面0.5h后将小鼠移入饲养盒内分组常规饲养.35d后按鼠解剖法解收集血吸虫虫体，计数检获成虫数，计算感染率下降率和虫负荷下降率。试验不少于3次重复。6数据统计与分析6.1将试验数据按式(1)和式(2)计算各处理的死亡率或校正死亡率。计算结果均保留到小数点后两位。ZK:P:100(1)ZN.式中:P死亡率，单位为白分率（%）：ZK;表示死亡尾坳数，单位为只；ⅡN，——表示处理总尾数，单位为只。P.-P× 100P, = :(2)1-P.式中：2 NY/T 2339—2013P,_ 校止死亡率，单位为百分率（%）：P，——处理死亡率,单位为百分率（%）