SC 3031-2006水产品中挥发酚残留量的测定 分光光度法.pdf

ICS 67.050B 50SC中华人民共和国水产行业标准SC/T 3031—2006水产品中挥发酚残留量的测定分光光度法Determination of volatile phenolic compounds residues in fishery productsSpectrophotometric method2006-12-06 发布2007-02-01实施中华人民共和国农业部发布 SC/T 3031—2006前言本标准的附录A为资料性附录。本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准的技术归口单位：全国水产品标准化技术委员会水产品加工分技术委员会。本标准起草单位：农业部渔业环境及水产品质量监督检验测试中心（哈尔滨）。本标准主要起草人：战培荣、王海涛、陈中祥、王崇、卢玲、赵彩霞、刘伟、薛玲玲。I SC/T 3031-2006水产品中挥发酚残留量的测定分光光度法1 范围本标准规定了水产品中挥发酚残留量的分光光度测定方法。本标准适用于水产品中可食部分挥发酚残留量的测定。2规范性引用文件本标准引用了下列文件中的条款作为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的必威体育精装版版本。凡不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本适用于本标准。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法。3原理用碱性溶液破坏样品组织结构，在酸性条件下用水蒸气蒸馏出挥发酚类化合物，在铁氰化钾存在下，与4-氨基安替比林反应生成橙红色的安替比林染料，用氯仿萃取，在460nm波长测定吸光度定量。4试剂本标准所用试剂除另有说明外，均为分析纯。水为无酚水。4.1无酚水的制备4.1.1用符合GB/T6682的实验用水，每升水中加人0.2g经200℃烘干30min的活性炭粉末（粒径0.1mm~0.5mm），充分振摇后，放置过夜，用双层中速滤纸过滤。4.1.2加氢氧化钠(NaOH)使水呈强碱性，并滴加高锰酸钾溶液至紫红色，移人全玻璃蒸馏器中加热蒸馏，取馏出液备用。4.2氯仿(CHCl3)。4.3 氨水(NH·HO)。4.450%硫酸溶液：浓硫酸在搅拌下缓缓加入等体积的实验用水中。4.510%氢氧化钠(NaOH)溶液：称取10g氢氧化钠溶于水中，稀释至100mL。4.68%铁氰化钾溶液：称取8g铁氰化钾(K［Fe(CN)6])溶于水中,稀释至100mL,4℃冷藏，可使用一周。4.710%硫酸铜溶液：称取10g硫酸铜(CuSO4·5H2O)溶于水中，稀释至100mL。4.80.05%甲基橙指示液：称取甲基橙0.05g溶于水中，稀释至100mL。4.9缓冲溶液：称取20g氯化铵(NH4CI)溶于100mL氨水(NH3·H2O)中，pH约10.7,4℃冷藏。4.102%4-氨基安替比林溶液：称取2g4-氨基安替比林(C1H13N3O)溶于水中,稀释至100mL,4℃冷藏，可使用一周。4.11标准贮备溶液：从国家标准物质机构购置标准溶液。4.12标准使用液：取适量苯酚标准溶液，用无酚水稀释至每毫升含1.00ug酚，配制后要在两小时内使用。5仪器实验室常规仪器及下列各项。1 SC/T 3031—20065.1500mL玻璃水蒸气蒸馏装置（见附录A)。5.2500mL(梨形)刻度分液漏斗。5.3分光光度计。5.4组织捣碎机。5.5电子天平。5.6调温电炉或调温电加热套。6测定步骤6.1#样品预处理取水产品可食部分，用组织捣碎机捣碎，贮存备用。6.2蒸馏提取称取预处理的样品10g～20g（精确到0.01g，同时做空白试验）。放烧杯中，加人10%氢氧化钠溶液（4.5)75mL,搅拌10min。再加3~5滴甲基橙（4.8)指示剂，用50%硫酸（4.4)调节pH≤4（溶液呈橙红色），再加10%硫酸铜溶液（4.7)5mL，混匀后，置于500mL蒸馏瓶中，用少量无酚水（4.1）洗净烧杯，洗涤液并入蒸馏瓶中并加数粒玻璃珠。连接好水蒸气蒸馏装置，确保严密不漏气，取250mL三角瓶接收馏出液。将水蒸气发生瓶中的水煮沸的同时，样品蒸馏瓶也应以略低于水蒸气发生器的温度加热，防止通入的蒸气冷凝而集水。中速蒸馏60min~90min，至馏出液约240mL时，停止蒸馏，蒸馏完成后应打开水蒸气发生瓶上的阀门，使瓶内外压力平衡。并用10mL无酚水（4.1)冲洗冷凝管，洗涤液并入馏出液中（蒸馏过程中保持酸性）。蒸馏液应尽量避免与橡胶制品接触（橡皮塞、橡胶管和乳胶管里含有酚类化合物添加剂），如需使用时用硅胶管(塞)代替。6.3显色将馏出液移入分液漏斗中，加2.0mL缓冲溶液（4.9），混匀。加1.5mL4-氨基安替比林溶液（4.10），混匀，再加1.5mL铁氰化钾溶液（4.6），充分混匀后，放置10min6.4萃取准确加人10