SN_T 4656.2-2016进出口纺织品生物安全检验方法 第2部分：大肠埃希氏菌.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 4656.2—2016进出口纺织品生物安全检验方法第2部分：大肠埃希氏菌Biosafety testing methods of the textiles for import and export--Part 2 : Escherichia coli2017-07-01实施2016-12-12 发布中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局 SN/T 4656.2—2016前言·SN/T4656《进出口纺织品生物安全检验方法》共分为5部分第1部分：白假丝酵母菌；、第2部分：大肠埃希氏菌；第3部分：大肠菌群；第4部分：金黄色葡萄球菌；第5部分；菌落总数。本部分为SN/T4656的第2部分。本部分按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本部分起草单位：中华人民共和国河南出人境检验检疫局、江西省人民医院、四川农业大学。本部分主要起草人：郭会清、李辑、曹乾、郭华麟、禹建鹰、苗丽、杨娜、徐超、乔晴、王永杰。. SN/T 4656.2--2016进出口纺织品生物安全检验方法第2部分：大肠埃希氏菌1范围SN/T4656的本部分规定了进出口纺织品中大肠埃希氏菌的定量检验方法。本部分适用于进出口纺织品大肠埃希氏菌定量检验。其他纺织类产品可参考使用本部分。规范性引用文件2下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T8170数值修约规则与极限数值的表示和判定SN/T1538.1培养基制备指南第1部分：实验室培养基制备质量保证通则SN/T1538.2培养基制备指南第2部分：培养基性能测试实用指南3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1biosafety of textiles纺织品生物安全纺织品中携带的有害生物本身或其代谢产物对生态环境和人体健康产生的潜在威胁，及对其所采取的一系列有效预防和控制措施。3.2大肠埃希氏菌Escherichia coli通称大肠杆菌，是埃希氏菌属的代表菌，广泛存在于人和温血动物的肠道中，是人类和动物肠道中的正常菌群,在一定条件下可引起肠道外感染，某些血清型菌株的致病性强，引起腹泻，能够在44.5℃的革或一十-发酵乳糖产酸产气,IMViC(靛基质、甲基红、VP试验、柠檬酸盐）生化试验为十+一兰氏阴性杆菌。4设备与材料4.1常规微生物检测用的基本设备与材料。4.2无菌剪刀、镊子。4.3电子天平：0.01g。4.4全滤网无菌均质袋。4.5拍击式均质器：400mL。4.6无菌规格板：20cm²。4.7无菌干燥棉拭子。4.8微量移液器:200 μL～1 000 μL、l mL～10 mL4.9无菌小三角瓶:25 mL。 SN/T 4656.2-20164.10无菌吸头:1000 μL、10 mL。4.11无菌玻璃平皿或塑料平匪：15 mm×90:mm4.12·恒温水浴箱：45℃土1℃。4.13恒温培养箱：36℃±1.℃4.14.放大镜（放大5倍～10倍）或菌落计数器.4.15接种环。4.16显微镜:10×～100×4.17滤膜或-次性无菌滤膜：直径 47 mm,微孔径0.45 um4.18烧杯:500 mL。4.19冰箱:2℃～8℃4.20无菌滤器。4.21抽滤设备。4.22无菌三角瓶：300mL。5培养基、试剂5.1磷酸盐缓冲液：见A.2.5.2无菌生理盐水：见A.3。5.3大肠埃希氏菌显色培养基：见A.45.4营养琼脂：见A.5。5.5色氨酸肉汤：见A.6。5:6:Kovacs 靛基质试剂：见 A.7。5.7.MR-VP培养基：见 A.8。5.8V-P甲、乙液：见A.9。5.9.甲基红指示剂：见A.10。5.10Korser 柠檬酸盐肉汤：见·A.11。5.11月桂基磺酸盐胰蛋白陈肉汤(LST肉汤）：见A.12。5.12革兰氏染色液：见A.13。5.13IMViC生化鉴定试剂盒。5.14.大肠埃希氏菌测试片。注：本部分中稀释液均为磷酸盐缓冲液（5.1)或无菌生理盐水（5.2)6　样品制备6.1.称量法无菌方法打开送检的样品，用无菌剪刀（4.2）均匀剪样，在电子天平（4.3）上准确称取剪下的样品25g样品，剪碎后加人到盛有225mL无菌稀释液的全滤网无菌均质袋（4.4）中，用拍击式均质器（4.5）拍打-1min～2imin，充分混匀，得到个1：10的样品匀液。6.2：多点采样洗脱法无菌方法打开送检的样品，在样品四周和中间均匀布控~5个采样点，用无菌规格板（4.6)按每个采样点20cm²面积范围剪裁，每20平方厘米采样面积为1份检样，每个样品共采集5份检样，采样面积为100cm²。将上述采集好的5份检样放人盛有