SN_T 2802-2011进出口动物源性食品中苯佐卡因残留量的测定 液相色谱法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 2802—2011进出口动物源性食品中苯佐卡因液相色谱法残留量的测定Determination of benzocaine residues in foodstuffs of animal origin forimport and export--Liquid chromatographic method2011-07-01实施2011-02-25 发布中华人民共和国发布Y国家质量监督检验检疫总局 SN/T 2802—2011前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国海南出人境检验检疫局。本标准主要起草人：开智、卓海华、徐莉、纪少凡、庞书南。 SN/T 2802--2011进出口动物源性食品中苯佐卡因残留量的测定液相色谱法范围本标准规定了进出口动物源性食品中苯佐卡因的液相色谱测定方法，本标准适用于猪肉、牛肉、鸡肉、猪肝、罗非鱼、鲈鱼、三文鱼、鳗鱼、虾中苯佐卡因残留量的测定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法3方法提要试样中的苯佐卡因经乙腈提取，正已烷和HLB固相萃取柱净化,用带紫外检测器的超高效液相色谱进行测定，外标法定量。4试剂和材料所有试剂除特殊注明外,均为分析纯,水为GB/T6682规定的级水，4. 1乙腈:HPLC级。4.2 甲醇:HPLC级。4.3正已烷:HPLC级。4.4无水硫酸钠：650℃灼烧4,h，在干燥器内冷却至室温，贮于密封瓶中备用。4.55%甲醇溶液：量取5mL申醇,加水定容至100mL。4.6苯佐卡因标准品（Benzocaine;CAS编号：94-09-7,分子式：C;H1NO2）：纯度≥99.0%。4.7标准储备液（200 μg/mL）：准确称取适量苯佐卡因标准品，用甲醇（4.2)配制成浓度为 200 uμg/mL的标准储备液，该标准储备液可置于4℃冷藏避光保存8个月。4.8标准中间液：取适量标准储备液（4.7），用甲醇稀释成浓度为1 μg/mL的标准中间液，可置于4℃冷藏避光保存1个月。4.9标准工作液：取适量标准中间液（4.8），用甲醇水溶液（4十6）稀释成浓度分别为0.010μg/mL，0.025 μg/mL,0.050 μg/mL,0.10 μg/mL,0.30 μg/mL的标准工作溶液,即配即用。4.10HLB固相萃取小柱:6 mL,200 mg;临用前依次以 5 mL 甲醇、5 mL水活化,保持柱体湿润。4.11无水硫酸钠玻璃层析柱（内径2cm、长度21 cm）)：玻璃柱内填人5g无水硫酸钠（4.4）。4.12微孔滤膜:0.22 μm，有机系。5仪器和设备5.1超高效液相色谱仪：配紫外检测器。 SN/T 2802--20115.2组织捣碎机。5.3分析天平：感量分别为0.1mg和10mg。5.4离心管:50 mL,具盖。5.5 涡旋混合器。5.6 离心机:9000 r/min。5.7旋转真空蒸发仪。5.8氮气吹干仪。6试样制备和保存从原始样品中取出有代表性的可食部分样品，用高速组织捣碎机充分捣碎均匀，装人洁净容器作为试样，密封，并标明标记。在制样过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化，制备好的试样于18℃以下避光冷冻存放。7 测定步骤7.1　提取称取5g试样（精确至0.01g），置于50mL离心管（5.4）中，加人15mL乙腈（4.1），涡旋提取2min，9000r/min离心10min,将上清液转至另一50mL离心管中，样品残渣再加15mL乙腈重复提取一次，合并提取液，过无水硫酸钠玻璃层析柱(4.11），收集流出液，待净化。7.2　净化流出液(7.1)中加人15 mL正已烷(4.3），涡旋1min，以4000 r/min离心5 min,弃去上层正已烷，将下层乙腈转至旋转蒸发仪中,40℃以下旋转蒸发浓缩至大约1mL,加人10 mL水,稀释混匀，以小于1mL/min 的流速过 HLB柱（4.10）,待样液完全流出后，用5mL5%甲醇溶液（4.5)淋洗柱体，弃去全部流出液，抽干，以5mL甲醇（4.2)洗脱，将收集的洗脱液于40℃下用氮气吹至大约0.8mL,加水准确定容到2.0mL,过0.22 μm滤膜，供液相色谱测定。7.3测定7.3.1色谱条件 色谱柱:BEH C18,1.7 μm,2.1 mmX50 mm 或相当者。流动相：甲醇-水溶液（4十6,体积比）。 流速:0.40 mL/min。 柱温:40℃。进样量:10μL。检测波长:289 nm。7.3.2色谱测定用