QB_T 5095-2017口腔清洁护理用品 牙膏中尿囊素的测定 高效液相色谱法.pdf

ICS 71.100.40分类号：Y43QB备案号：58778-2017中华人民共和国轻工行业标准QB/T5095-2017口腔清洁护理用品牙膏中尿囊素的测定高效液相色谱法Oral care and cleansing products-Determination of alantan in toothpastes-High performance liquid chromatography2017-04-12发布2017-10-01实施中华人民共和国工业和信息化部发布 QB/T5095-2017前 言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准由中国轻工业联合会提出。本标准由全国口腔护理用品标准化技术委员会牙膏分技术委员会（SAC/TC492/SC1）归口。本标准起草单位：上海美加净日化有限公司、无限极（中国）有限公司、广州市倩采化妆品有限公司、广州薇美姿实业有限公司。本标准主要起草人：陈健芬、施裔磊、梁裕昊、黄金莲、徐春生、陈敏珊。本标准为首次发布。I QB/T5095—2017口腔清洁护理用品牙膏中尿囊素的测定高效液相色谱法1 范围本标准规定了高效液相色谱法测定牙膏中尿囊素的方法要点、试剂与标准物质、仪器、分析步骤、结果计算、回收率、标准偏差和允许差。本标准适用于牙膏、漱口水、牙粉中尿囊素含量的测定。本标准尿囊素的检测限为0.08μg/mL，定量下限为0.20μg/mL。若取1.0g样品，尿囊素的最低检出浓度为8mg/kg，最低定量浓度为20mg/kg。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682一2008分析实验室用水规格和试验方法3方法要点将牙膏用水分散，超声波提取其中的尿囊素成分，然后离心分离并过滤处理，滤液用带紫外检测器的高效液相色谱仪分析测定，外标法通过峰面积进行定量计算。4试剂与标准物质4.1一般规定除非另有说明，在分析中仅适用确认为分析纯的试剂和水为GB/T6682一2008规定的一级水。4.2试剂4.2.1尿囊素对照品：纯度不大于99%。4.2.2甲醇：HPLC级。4.2.3磷酸二氢钾。4.2.4滤膜：0.45μm，水相。4.3标准储备液称取尿囊素对照品10mg（精确至0.0001g），用水溶解并定容至100mL，摇匀，作为含尿囊素100.0μg/mL的标准储备液。储备液于0℃～4℃避光条件下，可保存7天。4.4标准工作液将标准储备液用水逐级稀释，配制成浓度为1.0μg/mL、2.0μg/mL、2.5μg/mL、5.0μg/mL、10.0μg/mL、25.0μg/mL、50.0μg/mL、100.0μg/mL的标准工作液。4.55mmol/L磷酸二氢钾缓冲溶液称取磷酸二氢钾0.68g（精确至0.0001g），用水溶解并定容至1000mL，经0.45μm水相微孔滤膜过滤，并超声脱气10min。5仪器5.1高效液相色谱仪：配紫外检测器。5.2DionexAcclaimTM120型C18色谱柱（4.6mm×250mm，5μm），或相当的色谱柱。1 QB/T5095-20175.3磁力搅拌器。5.4超声波清洗器。5.5离心机。5.6分析天平：精度0.0001g。分析步骤66.1试样处理牙膏试样先挤去大约20mm，再称取1g（精确至0.0001g）试样于100mL容量瓶中，用水溶解并定容至刻度。磁力搅拌至牙膏分散均匀，超声萃取10min后，将试样溶液装入10mL离心管中，4000r/min以上离心分离10min。冷却至室温后，上清液经0.45um水相滤膜过滤，备用。注：样品称取量可根据牙膏中尿囊素的含量而定，此处尿囊素含量的参考值为1500mg/kg。6.2测定6.2.1色谱条件参考按照表1设定液相色谱条件。表1液相色谱条件设定值仪器参数210紫外检测器波长/nm20 进样量/μL30柱温/℃尿囊素对照品用等度洗脱方式分析，洗脱程序见表2。表22对照品参考程序0.5流量/（mL/min）流动相5mmol/L磷酸二氢钾：甲醇=95：5（体积分数）牙膏试样用梯度洗脱方式分析，洗脱程序见表3表3牙膏试样参考程序B：甲醇/%A：5mmol/L磷酸二氢钾/%时间/min流量/（mL/min）0.5 5.0095.05.00.5 95.010.0055.045.01.011.0045.01.055.019.005.00.5 95.020.005.00.5 95.030.006.2.2标准工作曲线准确吸取4.4制备的标准工作液20uL，分别注入高效液相色谱仪，按照6.2.1的色谱条件进行测定以尿囊素的浓度为X轴，其相应的峰面积为Y轴，绘制标准工作曲线。尿囊素标准溶液的液相色