NY_T 3137-2017饲料中香芹酚和百里香酚的测定 气相色谱法.pdf

ICS 65.120B 46NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 3137—2017饲料中香芹酚和百里香酚的测定气相色谱法Determination of carvacrol and thymol in feeds-Gas chromatography2017-12-22 发布2018-06-01实施中华人民共和国农业部发布 NY/T 3137—2017前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草本标准由农业部畜牧业司提出。本标准由全国饲料工业标准化技术委员会（SAC/TC76)归口。本标准起草单位：上海市农业科学院农产品质量标准与检测技术研究所、上海市饲料质量监督检验站。本标准主要起草人：赵志辉、董茂锋、杨海锋、韩微、白冰、饶钦雄。I NY/T 3137—2017饲料中香芹酚和百里香酚的测定气相色谱法1范围本标准规定了饲料中香芹酚和百里香酚含量测定的气相色谱检测方法。本标准适用于配合饲料、浓缩饲料、添加剂预混合饲料、混合型饲料添加剂中香芹酚和百里香酚的测定。本标准方法中香芹酚和百里香酚的定量限均为5mg/kg。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本义件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T14699.1饲料采样GB/T20195动物饲料试样的制备3原理试样中香芹酚和百里香酚经乙酸乙酯提取后，经无水硫酸钠、N-丙基乙二胺和石墨化炭黑分散固相萃取净化，带火焰离子化检测器的气相色谱仪检测，外标法定量。4试剂除非另有说明，所有试剂均为分析纯和符合GB/T6682中规定的一级用水。4.1乙酸乙酯。4.2乙酸乙酯：色谱纯。4.3无水硫酸钠：在100℃烘箱内，烘8h，密封保存。4.4 N-丙基乙二胺(PSA):40 μm～60 μm。4.5石墨化炭黑（GCB)：40μm～100μm。4.6香芹酚对照品：纯度≥98%。4.7百里香酚对照品：纯度≥99.5%4.8香芹酚和百里香酚标准储备溶液（10.0mg/ml）：分别准确称取香芹酚（4.6）和百里香酚（4.7)0.25g（精确至0.0001g，视其含量，换算成100%再称样），置于25mL容量瓶中，用乙酸乙酯（4.2)溶解，定容至刻度，摇勺。使香芹酚和百里香酚浓度为10.0mg/mL，储存于4℃冰箱中，有效期为3个月。4.9标准中间溶液(1000.0μg/ml)：准确取标准储备溶液5.0ml，置于50ml容量瓶中，用乙酸乙酯（4.2)定容至刻度，摇匀，配制成香芹酚和百里香酚浓度为1000.0μg/mL的标准中间溶液，有效期为2周。4.10标准工作溶液：准确量取标准中间溶液0.010mL、0.10ml、0.50mL、1.0ml、4.0mL置于10mL容量瓶中，用乙酸乙酯（4.2)定容至刻度，摇匀，配制成香芹酚和百里香酚浓度为1.0μg/ml、10.0ug/ml、50.0μg/ml、100.0μg/ml和400.0μg/ml的标准工作溶液，临用现配。5仪器和设备5.1实验室常用仪器设备。1 NY/T 3137—20175.2分析天平：感量0.0001g。5.3分析天平：感量0.01g。5.4离心机：转速4000r/min及以上。5.5样品筛：孔径0.45mm。5.6超声仪。5.7涡动混合器。5.8微孔滤膜：0.45μm,有机相。5.9气相色谱仪（配有火焰离子化检测器）。6采样和试样制备按GB/T14699.1的规定抽取有代表性的样品，四分法缩减取样。按GB/T20195的规定磨碎，通过0.45mm孔筛，混匀，装人密闭容器中，避光低温保存备用。7分析步骤7.1提取称取一定量的试样（配合饲料、浓缩饲料和添加剂预混合饲料6.00g，混合型饲料添加剂1.00g），置于50ml离心管中，加20.0ml乙酸乙酯（4.1），超声波（5.6)提取90min不超过30℃），其间用手摇动2次，以4000r/min离心1min（5.4），待净化。7.2净化取1.0ml提取液于存有50mg无水硫酸钠（4.3）、50mgPSA（4.4）、50mgGCB(4.5)的2ml离心管，涡旋混合30s，经滤膜（5.8)过滤，待测。7.3测定7.3.1气相色谱参考条件色谱柱：毛细管色谱柱（5%二苯基/95%二甲基聚硅氧烷），30.0m×0.25mm×0.25μm，或性能相当者；升温程序：80℃保持1min，以10℃/min升至120℃，再以5℃/min升至145℃，最后以35℃/min升至250℃，保持2min;载气流速：1.0ml/min（恒流模式）；进样体积：1uL（不分流进样）；进样口温度：250℃；检测器温度：300℃；氢气流量：30ml/min；空气流：300ml/min