SNT 1746-2006进出口大豆、油菜籽和食用植物油中赭曲霉素A的检验方法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1746—2006进出口大豆、油菜籽和食用植物油中赭曲霉毒素A的检验方法Inspection of ochratoxin A in soybean , rapeseed/canolaand edible vegetable oils for import and export2006-01-26 发布2006-08-16 实施13中华人民共和国理荐发布数码防伤国家质量监督检验检疫总局 中华人民共和国出人境检验检疫行业标准进出口大豆、油菜籽和食用植物油中赭曲霉毒素 A 的检验方法SN/T 1746—2006*中国标准出版社出版北京复兴门外三里河北街16号邮政编码：100045网址 www.bzcbs. com电话：6852394668517548中国标准出版社秦皇岛印剧厂印刷*印张 1.25字数30千字开本880×12301/162006年5月第一次印刷2006年5月第一版印数 1—2 000* SN/T 1746—2006言前本标准的附录A为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国上海出人境检验检疫局、北京中检维康技术有限公司、上海博尼生物科技有限公司。本标推主要起草人：褚庆华、郭德华、王敏、王雄、沈建英。本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。 SN/T 1746--2006进出口大豆、油菜籽和食用植物油中赭曲霉毒素A的检验方法范围1本标准规定了进出口大豆、油菜籽和食用植物油中赭曲霉毒素A含量检验的抽样、制样，以及免疫亲和柱层析净化高效液相色谱法和免疫亲和柱层析净化荧光光度法测定大豆、油菜籽和食用植物油中赭曲霉毒素 A的方法。本标准适用于进出口大豆、油菜籽和食用植物油中赭曲霉毒素A的检验。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修改版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的必威体育精装版版本。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本适用于本标准。GB/T 5524植物油脂检验取样、扦样法.SN/T0800.1进出口粮油、饲料检验抽样和制样方法3抽样和制样3.1大豆、油菜籽：按照SN/T0800.1的规定执行。3.2食用植物油：按照GB/T5524的规定执行。4免疫亲和柱层析净化高效液相色谱法（第一法）4.1方法提要试样经过甲醇或甲醇-水提取，提取液经过滤、稀释后，滤液经过含有赭曲霉毒素 A 特异抗体的免疫亲和柱层析净化，以甲醇洗脱，洗脱液供带有荧光检测器的高效液相色谱仪测定，外标法定量。4.2 试剂和溶液除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为重蒸水。4.2.1甲醇：色谱纯。4.2.2甲醇+水(8+2):取80 mL甲醇加20mL水4.2.3氯化钠。4.2.4碳酸氢钠。4.2.5吐温-20(Tween-20)。4.2.6淋洗缓冲液：称取25g氯化钠、5g碳酸氢钠溶于水中，加人0.1mL吐温-20，用水稀释至1L。.4.2.7乙腈：色谱纯。4.2.8磷酸钠。4.2.9十六烷基三甲基溴酸铵(C-tab)。4.2.10赭曲霉毒素A标准品：纯度大于99%。4.2.11赭曲霉毒素 A标准储备溶液：用甲醇(4.2.1)配制 0.100 mg/mL 的赭曲霉毒素 A标准储备液，保存于4℃冰箱备用。4.2.12赭曲霉毒素 A标准工作溶液:准确移取适量的赭曲霉毒素 A标推储备液,用甲醇稀释成标准1 SN/T 1746--2006工作溶液。4.3仪器设备4.3.1高效液相色谱仪：带有荧光检测器。4.3.27高速均质器：18 000 r/min～22 000 r/min。4.3.3玻璃注射器：10mL。4.3.43玻璃试管：直径12 mm,长75 mm,无荧光特性。4.3.5空气压力泵。4.3.6微量注射器：100μL。4.3.7#槽纹折叠滤纸。4.3.8#赭曲霉毒素 A 免疫亲和柱。4.3.9玻璃纤维滤纸：直径11 cm,孔径1.5μm,无荧光特性。4.4分析步骤4.4.1提取准确称取试样50.0 g(准确到0.1g)(大豆需要磨细且粒度≤2 mm)于均质器配置的搅拌钵中，加人5.0g氯化钠（4.2.3)及100mL甲醇（4.2.1)（适用于油菜籽）或100mL甲醇+水（8+2)（4.2.2），以均质器高速搅拌提取1min。以槽纹折叠滤纸（4.3.7)过滤，准确移取10.0ml.滤液并加人40.0mL水稀释，用玻璃纤维滤纸（4.3.9)过滤至滤液澄清，滤液备用。4.4.2净化将免疫亲和柱（4.3.8)连接于10mL玻璃注射器（4.3.3)下。准确移取10.0ml.样品提取液于玻璃注射器中，将空气压力泵(4.3.5)与玻璃注射器相连接，调