PI染色法测细胞周期(共25张PPT).pptxVIP

PI染色法测细胞周期;一） 细胞DNA含量检测;;单参数直方图;DNA细胞周期分析;2倍体;含量与凋亡关系;2. 凋亡研究;Dip %CV: 6. 用于细胞周期、细胞倍体以及凋亡的检测。 因此，整个复制周期可以描述为G0/G1，S，G2/M期。 在G0/G1峰前出现一个亚二倍体峰，即凋亡峰。 图 Annexin V/PI双标记分析细胞凋亡和坏死 凋亡细胞的FSC ？SSC ？ 在G0/G1峰前出现一个亚二倍体峰，即凋亡峰。 Dip %CV: 6. Dip G2-M: 9. 凋亡细胞的FSC ？SSC ？ Dip G2-M: 9. 加入5mlPBS，1500rpm离心5min，去上清液。 当DNA复制结束成为4倍体时，细胞进入G2期，G2期细胞继续合成RNA及蛋白质，直到进入M期，因此，单纯从DNA含量无法区分G2期和M期； 细胞坏死时，细胞肿胀，FSC ？，SSC ？ 检测调亡，可进行抗肿瘤药物研究和某些因素对细胞的损伤机理的研究。 正常人静止体细胞有46条染色体，相当于7. Dip G0-G1: 73. 加入500ulPBS轻轻吹打细胞团成细胞悬液，在旋涡状态下逐滴加入2ml-20℃95%冷乙醇，混匀后固定30min。 Dip S: 17. 单细胞和核的上机浓度应约106/ml。;;;根据凋亡细胞的特点来检测;;;;;细胞浓度及质量要求;;DNA content Dip %CV: 6. 根据凋亡细胞的特点来检测 Date acquired: 14-Jan-03 一） 细胞DNA含量检测 加入500ulPBS轻轻吹打细胞团成细胞悬液，在旋涡状态下逐滴加入2ml-20℃95%冷乙醇，混匀后固定30min。 重要的是染料要足够，以保证饱和结合。 在细胞周期(G0，G1，S，G2 ，M)的各个时期，DNA含量随各时相呈现出周期性的变化：在G1期，细胞开始RNA和蛋白质的合成，但DNA含量仍保持二倍体； 细胞坏死时，细胞肿胀，FSC ？，SSC ？ Dip %CV: 6. 根据凋亡细胞的特点来检测 检测调亡，可进行抗肿瘤药物研究和某些因素对细胞的损伤机理的研究。 因此，整个复制周期可以描述为G0/G1，S，G2/M期。 Dip G2-M: 9. 肿瘤组织中的各种DNA倍体 结合DNA指数分析，还可进行凋亡、异倍体等检测。 当DNA复制结束成为4倍体时，细胞进入G2期，G2期细胞继续合成RNA及蛋白质，直到进入M期，因此，单纯从DNA含量无法区分G2期和M期； Dip %CV: 6. 加入5mlPBS，1500rpm离心5min，去上清液。 Dip %CV: 6.;