NY_T 1964.2-2010农药登记用卫生杀虫剂室内试验试虫养殖方法 第2部分：淡色库蚊和致倦库蚊.pdf

ICS 65.100B 17NY中华人民共和国农业行业标准NY/T1964.2—2010农药登记用卫生杀虫剂室内试验试虫养殖方法第2部分：淡色库蚊和致倦库蚊Rearing methods of vector insects for laboratory test of public healthinsecticides registration-Part 2: Culex pipiens pallens and Culex pipiens quinquefasciatus2010-12-23发布2011-02-01实施中华人民共和国农业部3发布 NY/T 1964.2—2010前言《农药登记用卫生杀虫剂室内试验试虫养殖方法》为系列标准。第1部分：家蝇第2部分：淡色库蚊和致倦库蚊第3部分：白纹伊蚊第4部分：德国小本部分是《农药登记用卫生杀虫剂室内试验试虫养殖方法》的第2部分。本部分遵照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本部分由中华人民共和国农业部提出并归口。本部分起草单位：农业部农药检定所、济南市疾病预防控制中心、军事医学科学院微生物流行病研究所、中国科学院动物研究所、广东省疾病预防控制中心。本部分主要起草人：朱春雨、辛正、张宏军、张洪杰、李梅、葵松武、嵇莉莉。I NY/T1964.2—2010农药登记用卫生杀虫剂室内试验试虫养殖方法第2部分：淡色库蚊和致倦库蚊1范围本部分规定了农药登记用卫生杀虫剂室内药效试验用淡色库蚊和致倦库蚊的养殖方法和控制指标。本部分适用于农药登记用卫生杀虫剂室内药效试验用淡色库蚊和致倦库蚊的养殖。2术语和定义下列术语和定义适用于本文件。2.1世代generation指卵从离开母体到发育为成虫，且能产生子代为止的个体发育史。3仪器和材料3.1饲养笼：在框架上缚以蚊帐纱布制成的方形纱布笼。饲养笼不小于20cmX20cmX20cm；网孔目数≥16目；笼的一面正中开一个直径15cm～18cm的圆孔，连接与开孔直径相同，长30cm～50cm的布袖或直接在笼的一面接长30cm～50cm的布袖。3.2塘瓷盆、盘或其他盛水容器。3.3塘瓷碗、瓷碗或其他小盛水容器3.4捞网：60目。3.5吸管。3.6纱布条。3.7海绵。3.8培养皿：Φ6cm~9cm。3.9葡萄糖。3.10酵母粉。3.11肝粉：将鸡肝或猪肝煮熟并剥离掉大、中血管，放入60℃～80℃烤箱中烘干后粉碎，过80目筛，制成鸡肝或猪肝粉。3.12小鼠大鼠配合饲料。3.13小鼠吸血固定夹（图1)或人工膜吸血装置。4饲养条件温度：（26±2）℃。相对湿度：（75士10)%。光照：12：12(L：D)。1 NY/T1964.2-—20101—上夹片；6一弹性拦网；2——边框；7——铰接销轴；3——弹性拦网；8—弹簧；4—--下夹片；9—.锁紧金属片。5-~边框；-注：使用方法是将小鼠置于上下夹片的弹性拦网之间，利用锁紧金属片锁定上下边框，将小鼠夹持。图1小鼠吸血固定夹5操作步骤5.1成虫5.1.1试验用成虫取蚊蛹700只～800只，置于盛水容器内，所占水面积应不超过水面总面积的80%。将盛容器放人饲养笼中，第1d羽化成虫弃之不用，第2d将盛容器移入另一饲养笼中羽化24h，取出盛蛹容器，标注羽化时间。开始羽化成虫时，饲养笼内应放入培养血，内盛用5%～10%葡萄糖溶液浸透的海绵，并每天更换。试验结束，应采用非药物方法处死剩余超龄期成虫，或转为传代用成虫。世代饲养结束，应清洗饲养笼、饲养用培养血、海绵等。5.1.2传代用成虫羽化与饲养.1取蚊500只～600只，置于盛水容器内，蛹所占水面积不超过水面总面积的80%。.2将盛蛹容器放入饲养笼中，待其全部羽化后取出容器。或用成虫。.3按进行伺养。.4成虫羽化第3d～6d，饲养笼中，放入用固定夹固定的小白鼠或人工膜吸血装置，夜间或黑暗条件下供雌蚊吸血6h～12h。收集卵成蚊吸血后第3d，饲养笼内放入接卵杯（塘瓷或其他材质的杯或碗），杯内加入其容量50%～70%的清水，收集卵块1d～2d，每天进行接种繁殖。2 NY/T1964.2—20105.2幼虫5.2.1传代用幼虫直径32cm糖瓷盆内，加入3L脱氯清水，放人6块～8块卵块，以饲养幼虫500条～600条为宜。幼虫孵化后，用吸管吸取5%酵母一肝粉混悬溶液（肝粉与医用酵母粉按1：2的质量比例混匀，加水配成的混悬液）1mL，将混悬液添加到塘瓷盆底部一圈。1龄～2龄幼虫每天早、晚各喂食1次。间隔4h～6h用纱布条或其他工具刮膜1次，喂食前先刮膜后喂食。幼虫生长至3龄～4龄，用10%酵母一肝粉混悬溶液或小鼠大鼠配合饲料饲喂，根据幼虫密度和食量决定饲料加入量，每天刮膜1次2次。5.2.2蛹幼虫化蛹后，蛹量少时，用吸管将蛹移人盛脱氯清水的容器中；蛹量大时，把幼虫和蛹一起捞人5℃～10℃水中