SNT 1933.1-2007食品和水中肠球菌检验方法 第1部分：平板计数法和最近似值测定法.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1933.1-2007食品和水中肠球菌检验方法第1部分：平板计数法和最近似值测定法Detection of Enterococci in food and water-Part 1 : Method for plate count and MPN2007-05-23 发布2007-12-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局数码防伪 SN/T 1933.1—2007前言SN/T1933《食品和水中肠球菌检验方法》分为两个部分：一第1部分：平板计数法和最近似值测定法；一第2部分：滤膜法。本部分为SN/T1933的第1部分。本部分的附录 B为规范性附录,附录 A是资料性附录。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本部分由中华人民共和国辽宁出人境检验检疫局负责起草。本部分主要起草人：郑秋月、曹际娟、于灵、赵昕、王金玲、徐杨。本部分系首次发布的出入境检验检疫行业标准。 SN/T 1933.1--2007食品和水中肠球菌检验方法第1部分：平板计数法和最近似值测定法范围SN/T1933的本部分规定了食品和水中肠球菌平板计数、最近似值测定的检验方法。本部分适用于生活用水、生产加工用水及食品中肠球菌的检验2规范性引用文件下列文件中的条款通过SN/T1933的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成协议的各方研究是否可使用这些文件的必威体育精装版版本。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本适用于本部分。GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法SN/T0330出口食品中微生物学检验通则3术语、定义和缩略语3.1术语和定义下列术语、定义和缩略语适用于SN/T1933的本部分。肠球菌Enterococci一类革兰氏阳性球菌,兼性厌氧,无芽胞和荚膜，可分解胆汁七叶苷。是评估食品、水、食品加工设备、食品生产环境等卫生状况的指标菌之一3.2略缩语3.2.1 BEA胆汁七叶苷琼脂。3.2.2 BHIB脑心浸液肉汤。3.2.3 BHIA脑心浸液琼脂。4设备和材料4.1电子天平：感量为0.001g。4.2恒温水浴箱：46℃±1℃。4.3恒温培养箱：35℃±0.5℃,36℃±1℃，45℃±0.5℃,35℃±2℃。4.4均质器。4.5振荡器。4.6移液管:容量 1 ml,10 mL。4.7培养皿。5培养基和试剂实验用水符合GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法的要求。除另有规定外，试剂为分析纯。5.1叠氮化钠葡萄糖肉汤（见附录第A.1章）。5.2肠球菌肉汤（见附录第 A.2章）。1 SN/T 1933.1-20075.3KF链球菌琼脂（见附录第 A.3章）。一肠球菌琼脂（胆汁七叶苷叠氮钠琼脂）（见附录第A.4章）。5.45.5胆汁七叶苷琼脂（BEA琼脂）（见附录第A.5章）。5.6脑心浸液肉汤（见附录第 A.6 章）。5.7含 6.5%氯化钠(NaCI)脑心浸液肉汤（见附录第 A.7章）。脑心浸液琼脂（见附录第 A.8章）。5.85.9缓冲蛋白陈水（见附录第.9章）。6样品制备6.1抽样数量及抽样方法抽样数量及抽样方法按SN/T0330进行6.2样品的贮存和运送采样后应尽快进行检验，冷冻样品如不能立即进行检验，应置于一18℃保存。应冷藏保存的待检样品在运送实验室过程中应于1℃～4℃保存。样品采集后8h之内要完成检验。6.3　制样6.3.1水及液体饮料：污染程度低的水及液体饮料可以直接进行检验；污染程度严重的水及液体饮料吸取25mL样品，加人225mL缓冲蛋白陈水中充分混匀，制成1：10样品匀液6.3.2固体或半固体食品：无菌操作取25g样品放入装有225mI，缓冲蛋白陈水的均质杯内，以8 000r/min均质1min～2min;制成1：10样品匀液。6.3.3以上样品制备可根据样品污染程度及检验需要，进一步制成10倍递增的样品稀释液。7检验程序食品和水中肠球菌平板计数法检验程序见图，25g(mL)+225／mL缓冲蛋白陈水10倍梯度稀释选择2个～3个适宜连续稀释度，各取1.mL分别加入灭菌培养血或肠球菌琼脂KF琼脂36℃±1℃ 48 h±2 h35℃±2℃ 24 h±2 h确证实验肠球菌阳性菌落计数及计算:报告结果图1食品和水中肠球菌平板计数法的检验程序示意图2 SN/T 1933.12007食品和水中肠球菌最近似值（MPN)测定法检验程序见图2。25 g(mL)+225 ml.缓冲蛋白陈水10倍梯度稀释选择3个适宜连续稀释度，各取1mL分别加入肉汤中A肠球菌肉汤管叠氮化钠萄萄糖肉汤管35℃±2℃ 24 h±2 h37℃ ± 1 ℃, 24 h~48 h1鑫坊. +:变黑不变黑混浊无混浊+确证实验肠球菌