QB_T 5289-2018蜂胶牙膏中白杨素含量的测定 高效液相色谱法.pdf

ICS 71.100.40QB分类号：Y43备案号：65157-2018中华人民共和国轻工行业标准QB/T胶牙膏中白杨素含量的测定高效液相色谱法Determination of chrysin in propolis toothpaste high performance liquid chromatography2018-07-04发布2019-01-01实施中华人民共和国工业和信息化部发布 QB/T 5289-2018前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准由中国轻工业联合会提出。本标准由全国口腔护理用品标准化技术委员会牙膏分技术委员会（SAC/TC492/SC1）归口。本标准起草单位：福建爱洁丽日化有限公司、浙江方圆检测集团股份有限公司、广州质量监督检测研究院、国家轻工业牙膏蜡制品质量监督检测中心。本标准主要起草人：杨俊武、杨铭、郭长虹、刘家、刘文玉。本标准为首次发布。1 QB/T5289-2018蜂胶牙膏中白杨素含量的测定高效液相色谱法1范围本标准规定了蜂胶牙膏中白杨素含量测定方法的原理、试验方法、精密度、检出浓度和定量浓度。本标准适用于蜂胶牙膏中白杨素的含量的测定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3方法原理取牙膏以乙醇振荡溶解，超声波提取其中的蜂胶特征性活性物（白杨素），离心过滤处理，取清液用带二极管阵列检测器的高效液相色谱仪分析测定，通过峰面积外标法定量计算白杨素含量。4试验方法4.1一般规定除非另有说明，所用试剂均为色谱纯，水为符合GB/T6682的一级水。4.2仪器和设备a)高效液相色谱仪：配有二极管阵列检测器；b)C18色谱柱（250mmx4.6mm，5μm），或相当的色谱柱；c)0.45μm水相过滤膜；d)0.45μm有机相过滤膜；e)分析天平：精确至0.0001g;超声波仪；g)振荡器；h)高速离心机：转速不小于4000r/min4.3试剂a)白杨素对照品，纯度不小于98%；b)甲醇;c)乙醇;d)磷酸;0.15%磷酸水溶液：移取1.5mL磷酸（4.3.4）至1L容量瓶中，用水定容，用0.45um水相过e)滤膜过滤。4.4测定步骤4.4.1色谱条件a)流动相：甲醇、0.15%磷酸水溶液；分离条件如表1所示；b)流量：1.0mL/min;c)柱温：30℃；d)检测器：二极管阵列检测器；e)检测波长：270nm； OB/T5289-2018f)进样量：10μL。表1分离条件甲醇时间/min0.15%磷酸水溶液 64360257525~322564.36 32~3333~4564 364.4.2标准备液称取白杨素对照品10mg，精确至0.0001g，置于10mL棕色容量瓶中，以甲醇定容，混匀并使之溶解。此溶液浓度为1mg/mL，置于2℃～4℃保存。保存时间为1个月。4.4.3标准工作溶液移取上述白杨素标准贮备液适量，以甲醇稀释配制标准工作系列溶液，浓度分别为1mg/L、5mg/L、10 mg/L、50 mg/L、100mg/L。4.4.4样品溶液的制备先将牙膏样品挤去大约20mm，然后称取牙膏样品约10g于棕色容量瓶中（精确至0.0001g），加入约25mL水，分散完全后，用乙醇定容至100mL，磁力搅拌至均匀，超声处理20min后，4000r/min离心分离15min，上清液用2mL的一次性注射器吸取，经0.45μm微孔滤膜过滤后待测。4.4.5标准溶液和样品溶液的测定准确吸取上述白杨素标准工作溶液各10uL，分别注入液相色谱仪，按色谱条件（4.4.1）进行测定，谱图参照附录A中图A.1和A.2。以白杨素的含量为X轴，以其相应的峰面积为Y轴，绘制标准曲线。准确吸取10uL样品溶液，注入液相色谱仪，测定其白杨素峰面积，由标准曲线计算试样溶液中白杨素的浓度。4.4.6结果计算按公式（1）计算样品中白杨素的含量（X）：=CV(1)m式中：X——牙膏中白杨素含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；一由标准曲线查出试样溶液中白杨素的浓度，单位为微克每毫升（ug/mL）；CV—样品最终定容体积，单位为毫升（mL）；一试样质量，单位为克（g）。m --5精密度、检出浓度和定量浓度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不应超过算术平均值的10%。白杨素含量的检出浓度为0.1mg/L，定量浓度为0.3mg/L。2 QB/T5289-2018附录A（资料性附录）液相色谱参考谱图mAU270nm,4nm (1.00)1007550-25-00.02.55.07.510.012.515.