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SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 4058--2014出口动物源性食品中玉米赤霉醇类残留量的检测方法免疫亲和柱净化-HPLC 和 LC-MS/MS 法Determination of residues of zeranols in foodstuffs of animal origin for export-HPLC and LC-MS/MS method with immunoaffinity column clean-up2015-05-01实施2014-11-19 发布中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局李真
SN/T 4058—2014前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位:中华人民共和国重庆出人境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院。本标准主要起草人:李贤良、曹淑瑞、唐柏彬、存显、彭涛、王国民、张雷。1
SN/T 4058—2014出口动物源性食品中玉米赤霉醇类残留量的检测方法免疫亲和柱净化-HPLC 和 LC-MS/MS 法1范围本标准规定了动物源食品中α-玉米赤霉醇、β-玉米赤霉醇、α-玉米赤霉烯醇、β-玉米赤霉烯醇、玉米赤霉酮和玉米赤霉烯酮残留量的高效液相色谱检测方法以及高效液相色谱-质谱/质谱检测确证方法。本标准适用于猪肉、鸡肉、鱼肉、牛肝、牛奶、鸡蛋及肉罐头等动物源食品中α-玉米赤霉醇、β-玉米赤霉醇、α-玉米赤霉烯醇、β-玉米赤霉烯醇、玉米赤霉酮和玉米赤霉烯酮残留量的定性确证和定量测定。液相色谱法不适用于猪肉样品。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法3方法提要样品经β-葡萄糖苷酸/硫酸酯复合酶水解后,采用乙醚提取(牛奶样品用乙腈提取)、氢氧化钠反萃取,经免疫亲和柱富集和净化后,采用HPLC及LC-MS/MS检测和确证,外标法定量。4试剂和材料除特殊注明外,所有试剂均为分析纯,水为符合GB/T6682规定的一级水。4.1甲醇:高效液相色谱级。4.22乙腈:高效液相色谱级。4.3三氯甲烷:高效液相色谱级。4.4乙醚。4.5冰乙酸。4.6三水合乙酸钠。4.7氢氧化钠。4.8磷酸:纯度大于85%。4.9氯化钠。十二水合磷酸氢二钠。4.104.11磷酸二氢钾。4.12氯化钾。0.05mol/L乙酸钠缓冲液:称取6.80g乙酸钠(4.6),用900mL水溶解,用冰乙酸(4.5)调节pH4.13
SN/T 4058--2014值为4.80,并定容至1L。4.140.5mol/L氢氧化钠溶液:称取2.00g氢氧化钠(4.7)用100mI水溶解。4.15²3.0 mol/L磷酸溶液:量取4 ml磷酸(4.8)和16 mL水,混匀。4.16磷酸盐缓冲液(pH7.40):分别称取8.00g氯化钠(4.9)、2.90g十二水合磷酸氢二钠(4.10)、0.24g磷酸二氢钾(4.11)和0.20g氯化钾(4.12),用900mI水溶解,再用NaOH溶液调节pH值为7.40,并定容至1L。4.17甲醇-乙腈-水(50:15:35,体积比):量取50mL甲醇,15mL乙腈和35mL水,混勾。4.18β-葡萄糖苷酸/硫酸酯复合酶:含134600U/mIβ-葡萄糖苷酸酶,5200U/mL硫酸酯酶(H-2,from Helix pomatia).4.19标淮品:α-玉米赤霉醇、β-玉米赤霉醇、α-玉米赤霉烯醇、β玉米赤霉烯醇、玉米赤霉酮和玉米赤霉烯酮的纯度≥98.0%,6种玉米赤霉醇类化合物信息表见附录A。4.20标准储备溶液:精确称取各标准品适量,用甲醇溶解并稀释,配制成浓度各100ug/mL标准品储备液,于一18℃保存,有效期3个月。4.21混合中间标准溶液:分别准确吸取各标准品储备液(4.20)1.0ml于100mL容量瓶中,用甲醇稀释,配制成浓度各1.0μg/mI混合标准储备液。4.22根据需要用检测所需流动相把混合中间标准溶液(4.21)稀释成适合浓度的混合标准工作溶液,现用现配。4.23免疫亲和柱:玉米赤霉醇类六合一免疫亲和柱,保存于 4℃冰箱中。取出免疫亲和柱,待柱内储存液流出后即可上样。4.240.22μm微孔滤膜:有机系。5仪器和设备5.1高效液相色谱仪,配二极管阵列检测器。5.2高效液相色谱-质谱/质谱仪,配电喷雾离子源(ESI)。5.3电子天平:感量为0.01g和0.1mg。5.4超声波清洗器。5.5旋涡混匀器。5.6恒温箱。5.7氮吹仪。5.8离心机:不低于5 000 r/min。5.9具塞塑料离心管:50 mL。6试样的制备与保存6.1肌肉、内脏和
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