SNT 1743-2006食品中诱惑红、酸性红、亮蓝、日落黄的含量检测 高效液相色谱法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1743-2006食品中的诱惑红、酸性红、亮蓝、日落黄的含量检测高效液相色谱法Determination of allure red AC,carmosine, brillint blue FCF,sunset yellow FCF in food-High performance liquid chromatogarphic method2006-01-26 发布2006-08-16实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局 中华人民共和国出人境检验检疫行业标准食品中的诱惑红、酸性红、亮蓝、日落黄的含量检测高效液相色谱法SN/T 1743—2006*中国标准出版社出版北京复兴门外三里河北街16号邮政编码：100045网址 www. bzcbs. com电话：6852394668517548中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷*开本880×12301/16印张0.5字数8千字2006年5月第一版　2006 年5月第一次印刷印数 1--2 000* SN/T 1743-2006前言本标准的附录 A为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国上海出人境检验检疫局。本标准主要起草人：杨惠琴、唐毅锋、韩丽、盛永刚。本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。 SN/T 1743—2006食品中的诱惑红、酸性红、亮蓝、日落黄的含量检测高效液相色谱法1范围本标准规定了食品中诱惑红、酸性红、亮蓝、日落黄的液相色谱检测方法。本标准适用于糖果、饮料中诱惑红、酸性红、亮蓝、日落黄的检测。2制样2.1试样制备：从抽取的原始样品中取可食部分，均勾捣碎，液体样品混匀。将样品充分混勾，分出约500g，作为试样，装人清洁容器中，标明标记。2.2试样保存：将试样冷藏保存。2.3在抽样和制样过程中，必须防止样品受到污染。3测定方法3.1方法提要糖果、饮料中的人工合成着色剂用聚酰胺吸附法提取，过滤后，采用反相高效液相色谱技术进行分离测定,外标法定量。3.2试剂和材料除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为二次去离子水。3.2.1聚酰胺粉：200目。3. 2.2乙醇-氨溶液:取1mL氨水,加人100 mL乙醇中 70%。3.2.3甲醇-甲酸溶液:取 60 mL甲醇和40 mL甲酸混匀。3.2.420%柠檬酸溶液：取200g柠檬酸溶解于1I.水中。3. 2.5硫酸：10mL硫酸和100mL水混匀。3.2.610%钨酸钠水溶液：取 10 g钨酸钠溶解于100 mL水中。3.2.7乙酸：色谱纯。3.2.8甲醇：色谱纯。3. 2. 9乙酸铵。3.2.10日落黄、诱惑红、亮蓝、酸性红标准品：纯度大于98%。3.2. 11标准溶液：准确称取适量的着色剂标准品，用水配制成为1.0mg/mL的标准储备溶液，根据需要再用水稀释，配成适当浓度的标准工作溶液。3.3仪器和设备3.3. 1液相色谱仪，配有紫外检测器。3.3.2旋涡混匀器。3.3.3离心机：最大转速5000r/min。3.4分析步骤3.4.1提取、净化3.4.1.l果汁和汽水等样品：取50mL样品加热，驱除二氧化碳，然后用水稀释定容经0.45μm滤膜1 SN/T1743-2006过滤后供液相色谱分析。固体类样品：取已粉碎样品10g，加30mL乙醇-氨溶液溶解，置水浴上浓缩至20mL，用20%柠檬酸溶液调pH3.5~4.5，如需可加1mL10%钨酸钠溶液，使蛋白质沉淀。将上述溶液加热至70℃，加人聚酰胺粉0.5g~1.0g，充分搅拌，用20%柠檬酸溶液调pH3.5~4.5，使色素完全被吸附，以3000r/min，离心3min。弃去离心后所得的上层清液，用甲醇和甲酸溶液洗去天然色素，再用水洗至溶液为中性，最后用乙醇-氨溶液解析，至吸附剂为白色，收集解吸液，加乙酸中和，定容至100mL，经0.45um滤膜过滤后供液相色谱分析。3.4.2测定色谱条件250×4.6mm（内径），粒度5μma）色谱柱：Ci18b）流动相：甲醇+乙酸铵（0.02mol/L）（5+95）c）梯度：甲醇20%~35%，3%/min；35%~98%.9%/min：98%~98%继续6min；d）进样量：10μL；e）检测波长：254nm；f）柱温：室温。色谱测定根据样品中色素的含量情况，选定峰面积相近的标准工作溶液，标准工作溶液和样品中的色素的响应值均应在仪器的检测线性范围内。取相同体积样液和合成着色剂标准使用液分别注人高效液相色谱仪。在色谱条件下，日落黄、诱惑红、亮蓝、酸性红的参考保留时间依次为7.532min、9.291min、10.288min、10.834min，标准品的色谱图参见附录A中的图A.13.4.3空白试验除不加试样外。按上述测定步骤进行3.5结果计算