SN_T 2567-2010食品及包装品无菌检验.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 2567—2010食品及包装品无菌检验Asepsis detection for food and packages2010-05-27发布2010-12-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局敏驾质热 SN/T 2567—2010前言本标准按照GB/T1.1--2009给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国辽宁出人境检验检疫局。本标准主要起草人：齐震玉、曹际娟、卢行安、秦成、郑秋月、王刚、刘淑艳、蒋丹、宋慧君。 SN/T 2567-2010食品及包装品无菌检验1范围本标准规定了食品及包装品无菌检验方法。本标准适用于食品、宠物食品、包装品的无菌检验。2设备与材料2.1培养箱：25℃±1℃、35°℃±1℃和55℃±1℃2.2冰箱：0℃～4℃。2.3pH计。2.4厌氧培养装置。2.5灭菌试管：10.mL。2. 6三角瓶：250mL。2.7显微镜：10×~1.00×。3培养基和试剂3. 1缓冲蛋白陈水（BP）：见附录A第A.13.2营养肉汤（NB)：见附录A第A.2章3.3葡萄糖胰陈溴甲酚紫肉杨（GTB)见附录A第3.4豌豆溴甲酚紫肉汤（PE2）：见附录A第A.4章3.5脑肉培养基（CM)：见附录A第A.5章3.6马铃薯葡萄糖肉汤（PD1：见附录A第A.6敬3.7乳酸菌肉汤（APT）：见附录A第A.7章。3.83M涂抹棒》4检验方法4. 1样品制备4.1.1固体食品以无菌操作取25g样品，放人装有225mLBP肉汤的无菌均质杯内：于8000r/min均质2min，制成1：10样品勾液。4.1.2液体食品以无菌吸管吸取样品25ml放入装有225mLBP肉汤的无菌玻璃瓶（瓶内预置适当数量的玻璃1）3M涂抹棒由美国3M公司提供的产品的商品名。给出这一信息是为了方便本标推的使用者，并不表示对该产品的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。 SN/T2567—2010珠）中，充分混合，制成1：10的样品匀液。4.1.3食品包装品采用棉拭子法或3M涂抹棒法等方式进行表面涂抹取样。以无菌操作方式反复擦洗样品表面约20cm²～100cm²的区域，然后将棉球或海绵放入25mL无菌生理盐水中，进行充分洗涤，加225ml无菌生理盐水中充分混匀，此样品溶液为1：10。4.2肉汤增菌以无菌方式分别吸取1：10的样品稀释液10mL，各接种于100mLNB、GTB、PE-2、CM、PD和APT六种灭菌培养基中。接种后的六种培养基的培养条件如下：NB:35℃,3d;APT：需氧培养和厌氧培养，35℃，4d；-GTB:55℃,4d;-CM：55℃，厌氧培养，7d；-PE-2:36℃,7d;-PD:25 ℃,7 d。5结果观察与报告5.1如观察到上述培养基中有细菌生长现象，并经革兰氏染色确证，报告有菌。5.2如上述培养基中无菌生长，报告无菌。 SN/T 2567—2010附录A（规范性附录）培养基与试剂缓冲蛋白陈水(BP)A. 1A. 1. 1成分10 g蛋白陈5 g氯化钠9g磷酸氢二钠（NazHPO·12H2O)1.5 g磷酸二氢钾1 000 ml蒸馏水pH7.2制法A.1.2按上述成分配好后以大烧瓶装，121℃高压灭菌15min，临用时无菌分装于三角瓶中，每瓶225 mL.营养肉汤（NB)A.2A.2.1成分3 g牛肉浸膏10 g蛋白陈5 g氯化钠15 g～20 g琼脂蒸馏水1 000 mLA.2.2制法将上述各种成分溶解于蒸馏水内，校正pH7.2～7.4。再加入琼脂缓慢煮沸溶解，分装于三角瓶中,每瓶100mL。121℃灭菌15min。A. 3葡萄糖胰溴甲酚紫肉汤（GTB）A.3.1成分10 g胰蛋白陈3g牛肉浸膏10 g葡萄糖5g氯化钠溴甲酚紫0.04g(或1.6%酒精溶液2mL)蒸馏水1 000 mL3 SN/T 2567-2010A.3.2制法将上述各种成分（溴甲酚紫除外）加热搅拌溶解，调pH7.0士0.2，加入溴甲酚紫后分装于三角瓶中，每瓶100mL。121℃灭菌10min。A.4豌豆溴甲酚紫肉汤(PE-2)A.4.1成分酵母浸膏3 g蛋白陈20 g溴甲酚紫2mL（1.6%酒精溶液）蒸馏水1 000 mL未经处理的豌豆籽A.4.2制法将上述各种成分（豌豆籽除外）妞热搅拌溶解，孵加人溴甲酚紫分装于三角瓶中，每瓶100ml。再加人40粒～50粒豌豆籽，静置Irh以促进豌豆吸水。2-C-火菌1min。A.5疱肉培养基(CM)A.5.1成分新鲜牛肉50gt0 g蛋白陈30dog酵母浸膏5l0 g磷酸二氢钠.cg葡萄糖.cg可溶性淀粉2.0 g蒸馏水1 000.mlA.5.2制法将新鲜除脂肪和筋膜的牛肉500g切碎，加人蒸馏水。加热