SNT 2040-2007日本松干蚧检疫鉴定方法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 2040--2007日本松干检疫鉴定方法Identification of the Japanese pine bast scale , Matsucoccus matsumurae (Kuwana)2007-12-24发布2008-07-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局数码防 SN/T 2040-2007前言本标准的附录 D为规范性附录,附录 A、附录 B、附录 C为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准由中华人民共和国山西出人境检验检疫局负责起草，中华人民共和国吉林出人境检验检疫局、吉林伊通县林业局森防站参加起草。本标准主要起草人：李惠萍、丁三寅、连庚寅、赵常胜、吴海军、魏春燕、巩红霞。本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。 SN/T 2040—2Q07日本松干检疫鉴定方法1 范围本标准规定了日本松干[Matsucoccus matsumurae（Kuwana)的检疫和鉴定方法。本标准适用于进境松属类的带皮原木、枝条、针叶、树皮及球果鳞片；松属类砧木的盆景、苗木上携带有的松干属和日本松干的检疫和鉴定。2术语和定义下列术语和定义适用于本标准。2. 1背疤dorsal cicatrice乏皮膜，内部为两个柱状分泌细胞,分布体背,有时可延为圆形，外圈为硬环,环内为具颗粒状表面之至腹面。2.2多孔盘腺multilocular dir为圆形盘腺，比背疤小，外真一圆环，内部小孔排列有多种形式2.3双孔管腺bilocular tubulär该种腺体表面开口为双孔或单孔，双孔凹人呈双管状2. 4珠体 cyst stage为珠科虫特有的-虫期，此期虫体近球形、梨形或椭圆形，主要特点是触角退化、无足，虫体多少变硬或坚硬，壳面常有光铎，形如珍珠，户器和气门极其发达。2. 5隐蔽期cryptic phas孵出若虫沿树干上下爬行活动1~～2d后，即潜于树皮裂缝和叶腋等处固定寄生，成为寄生若虫；此时虫体很小、隐蔽、很难发现和识别，即“隐蔽期”。2.6显露期 apparent phase寄生若虫脱皮后，触角和足等附肢全部消失，雌、雄分化，虫体迅速增大而显露于树皮缝外为“显露期”,这是危害最严重的时期。3原理日本松干隶属向翅目（Homeptera）、珠科（Margarodidae）、松干属（Matsucoccus），该属专性寄生松属（Pinus)植物（参见附录A），现知有32种，分布于全北区（指古北区和北美区）。日本松干的形态学特征和生物学特性是制定本标准的主要科学依据。4仪器、用具和试剂4.1　仪器生物显微镜、体视显微镜、光照培养箱、水浴锅。 SN/T 2040--20074.2　用具放大镜、剪刀、小刀、镊子、昆虫解剖针、1.5mL Eppendorf管、6 cm表面Ⅲ、载玻片、凹面载玻片、盖玻片、解剖刀、酒精灯、滤纸、小毛笔、标签、养虫瓶等。4.3试剂70%乙醇、95%乙醇、100%乙醇、10%氢氧化钠（或10%氢氧化钾）溶液、冰乙酸、酸乙醇溶液、酸性品红、二甲苯、石炭酸-二甲苯溶液、中性树胶、乙醇-甘油保存液（参见附录B)。5实验室鉴定5. 1 症状检查仔细检查松属类的带皮原木、枝条、针叶叶鞘、树皮、球果及松属类砧木的盆景、苗木上是否有白色或灰白色蜡粉、蜡丝、成虫羽化时遗留的蜕皮；如有，即进一步检查是否有橙色或棕红色成虫虫体，或是僵死于卵囊中的褐色虫体，如有用毛笔轻挑于有保存液的瓶中。此外注意有无白色的茧和褐色或黑褐色椭圆形珠体及橙褐色圆形、扁圆形珠体，如有，随寄主一同采下，置于养虫瓶。对有翘皮的植物，先用小刀挑去翘皮后再作检查；针叶叶鞘、球果鳞片缝要用放大镜细查。5.2饲养检查将珠体或茧连同寄主放人养虫瓶，寄主底部要垫放漫湿的棉纱布，置于20℃～25℃、相对湿度70%～75%的光照培养箱内，待成虫出现后，挑放于保存液或70%乙醇溶液中进行固定。5.3标本制备将保存液中的虫体移人装有10%氢氧化钠（或10%氢氧化钾)溶液的Eppendorf管中，如是活体标本须预先在70%乙醇溶液中固定1h～2h后再置于前述液体中；将放人标本的Eppendorf管置于40℃～50℃的水浴锅中加热，定时观察，当虫体涨满显淡褐色时移至凹玻片上，在体视显微镜下侧切，用沸水将内容物冲洗掉；将洗干净的虫体移人表面皿中,滴人酸乙醇中和5 min,用滤纸吸掉酸乙醇；一再加人70%乙醇浸泡5min，吸掉乙醇，滴人酸性品红溶液，染色12h～16h；用70%乙醇洗掉多余染色剂，再依次经过95%、100%乙醇脱水各5min；用滤纸吸掉乙醇，滴人石炭酸-二甲苯溶液,3min后吸掉；-滴二甲苯3min后，将虫体移人载玻片上的中性树胶中整姿后盖上盖玻片；待玻片标本晾干后，即可用生物显微镜来观察成虫