NYT 1156.10-2008农药室内生物测定试验准则 杀菌剂第10部分：防治灰霉病试验盆栽法.pdf

ICS 65.100B 17NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 1156.10—2008杀菌剂农药室内生物测定试验准则盆栽法第10部分：防治灰霉病试验Guideline for laboratory bioassay of pesticidesPart 10:Potted plant test for fungicide control Botrytis cinerea Pers.2008-05-16 发布2008-07-01实施中华人民共和国农业部发布 NY/T 1156. 10--2008前言《农药室内生物测定试验准则杀菌剂》为系列标准：-第1部分：抑制病原真菌孢子萌发试验凹玻片法；一第2部分：抑制病原真菌菌丝生长试验平血法；一第3部分:抑制黄瓜霜霉菌病菌试验平Ⅲ叶片法;第4部分：防治小麦白粉病试验盆栽法；一第5部分：抑制水稻纹枯病菌试验蚕豆叶片法；第6部分：混配的联合作用测定；第7部分：防治黄瓜霜霉病试验盆栽法；-第8部分：防治水稻稻瘟病试验盆栽法；-第9部分：抑制灰霉病菌试验叶片法；-第10 部分：防治灰霉病试验盆栽法；1第11部分：防治瓜类白粉病试验盆栽法；-第12部分：防治晚疫病试验盆栽法；第13部分：抑制晚疫病菌试验叶片法；-第14部分：防治瓜类炭疽病试验盆栽法；一-第15部分：防治麦类叶锈病试验盆栽法；第16部分：抑制细菌生长量试验浑浊度法；本部分是《农药室内生物测定试验准则杀菌剂》的第 10部分。本部分由中华人民共和国农业部提出并归口。本部分起草单位：农业部农药检定所。本部分主要起草人：徐文平、朱春雨、刘学、吴新平、张薇、袁善奎。I NY/T 1156.10-2008农药室内生物测定试验准则杀菌剂盆栽法第10部分：防治灰霉病试验1范围本部分规定了盆栽法测定杀菌剂防治灰霉病的试验方法。本部分适用于农药登记用杀菌剂防治黄瓜、番茄、草莓、葡萄等作物灰霉病的室内生物活性测定试验。2仪器设备普通实验室常规仪器设备。2.1 电子天平(感量 0.1 mg)。2.2喷雾器械。2.3人工气候箱。2.4保湿箱。2.5移液管或移液器等。3 试剂与材料方法所用试剂，凡未指明规格者，均为分析纯;水为蒸馏水。3.1生物试材供试病菌为野生敏感型灰葡萄孢霉 Botrytis cinerea Pers．菌株。记录菌种来源。供试作物为感灰霉病品种，盆栽培养至2片～4片真叶期，编号备用。3. 2 试验药剂原药(或母药)。3.3 对照药剂采用已登记注册且生产上常用的原药（或母药），其化学结构类型或作用方式应与试验药剂相同或相近。4 试验步骤4.1孢子悬浮液制备将试验用病原菌在适宜的培养基上培养，或将病组织保湿培养，待产生孢子后，用无菌水洗下孢子，并用2层～4层纱布过滤，制成浓度为1×105个孢子/mL的悬浮液，备用。4.2 药剂配制水溶性药剂用蒸馏水溶解稀释。其他药剂选用合适的溶剂（甲醇、丙酮、二甲基甲酰胺或二甲基亚矾等)溶解，用0.1%吐温-80或其他合适的表面活性剂水溶液稀释。根据药剂活性,设置5个～7个系列质量浓度,有机溶剂最终含量一般不超过0.5%～1%。制剂可以直接用水稀释。4.3药剂处理将药液均匀喷施于叶面至全部润湿，待药液自然风干后备用。每处理3盆，4次重复，并设只含溶剂和表面活性剂而不含有效成分的处理作空白对照。1 NY/T 1156.10—20084.4接种与培养用孢子悬浮液喷雾接种。保护性试验在药剂处理后 24 h 接种；治疗性试验在药剂处理前 24 h 接种。接种后移至保湿箱中(相对湿度95%以上，温度20℃～22℃)黑暗条件下培养24h，然后在20℃～25℃、12h光暗交替(光照强度 5000Lux～10 000 Lux)、相对湿度 80%～90%的条件下培养7d。4.5调查待空白对照病叶率达到50%以上时，分级调查各处理发病情况，每处理至少调查30片叶，分级方法为：0级:无病斑;；1级:病斑占整个叶面积的5%以下;3级:病斑占整个叶面积的5%～15%；5级：病斑占整个叶面积的15%～25%；7级:病斑占整个叶面积的25%～50%；9级:病斑占整个叶面积的50%以上。5数据统计分析5.1计算方法根据调查数据，计算各处理的病情指数和防治效果。5. 1. 1 病情指数按公式(1)计算，结果保留小数点后两位Z(N: Xi)X =-X 100(1)NX9式中:X病情指数;N各级病叶数；i—相对级数值;N——调查总叶数。5. 1.2防治效果按公式(2)计算，结果保留小数点后两位。_ CK --- PTP=X 100:(2)CK式中：p一防治效果，单位为百分数（%）；CK--空白对照病情指数；PT--药剂处理病情指数。5.2 统计分析用 DPS(数据处理系统)、SAS(统计分析系统)或 SPSS(社会科学统计程序)等标准统计软件对药