SB 10388-2004畜禽肉中磺胺二甲嘧啶、磺胺甲噁唑的测定.pdf

ICS 67.120X 04SB备案号：14169—2004中华人民共和国国内贸易行业标准SB/T 10388-—2004畜禽肉中磺胺二甲嘧啶、磺胺甲噁唑的测定Determination of sulfamethazine and sulfamethoxazolein meat of livestock and poultry2004-08-04发布2004-09-01实施发布中华人民共和国商务部数码防份 SB/T 10388—2004前言本标准由中华人民共和国商务部提出：本标准由商务部屠宰技术鉴定中心负责起草，中国疾病预防控制中心营养与食品安全所、河北省疾病预防控制中心参加起草。本标准主要起草人：杨祖英、金社胜、刘震、宋书锋、韩会新、张新玲、刘文娟、王贵际。本标准委托商务部屠宰技术鉴定中心负责解释。1aa SB/T10388--2004畜禽肉中磺胺二甲嘧啶、磺胺甲唑的测定1 范围本标准规定了用高效液相色谱法测定畜禽肉中磺胺二甲嘧啶、磺胺甲唑的残留量。本标准适用于畜禽肉中磺胺二甲嘧啶、磺胺甲嗯唑的测定。2原理样品中磺胺二甲嘧啶、磺胺甲嗯唑经乙腈+三氯甲烷（10V+1V）提取后，又经过液-液分配转入水层进行净化后，用紫外检测器的高效液相色谱仪检测，外标法定量。3试剂和材料以下所用试剂，除特殊说明外，均为分析纯试剂，水为重蒸水。3.1乙腈（优级纯，作流动相用）。3.2甲醇（优级纯）。3.3正已烷。3.4三氯甲烷。3.5乙腈→三氯甲烷（10V→1V）。3.6乙腈+三氯甲烷(2V+1V)。3.7硫酸钠。3.8硫酸钠溶液：2%水溶液（质量浓度）。3.90.01mol/L磷酸盐缓冲液：3.58g磷酸氢二钠+1.56g磷酸二氢钠，用水溶解并定容至1000mL摇勾后，通过0.45μm微孔滤膜过滤。3.10冰乙酸。3.11标准品：纯度≥99%。3.11.1磺胺二甲嘧啶。3.11.2磺胺甲曬唑。3.12标准溶液3.12.1标准储备液：准确称取磺胺二甲嘧啶、磺胺甲嗯唑各10.0mg，分别用乙睛溶解，各移人100mL容量瓶中，并用乙稀释定容，摇勾。此溶液浓度各为100μg/mL。贮于冰箱中，有效期3个月。3.12.2混合标准中间液：分别吸取标准储备液各5.0mL于50mL容量瓶中.用流动相稀释至刻度，摇匀。即得含磺胺二甲嘧啶、磺胺甲嗯唑分别为10.0μg/nL的标准中间液。贮于冰箱中，有效期1个月。3.12.3混合标准工作液：分别吸取混合标准中间液0,0.05.0.10，0.25，0.50和1.0mL，分别放入各自的10mL容量瓶中，各用流动相稀释至刻度，摇勾，即得混合标准工作液，含磺胺二甲嘧啶、磺胺甲唑分别为0.0.05，0.10，0.25.0.50，1.00μg/mL的标准系列溶液。1 SB/T 10388—20044仪器和设备4.1高效液相色谱仪：附紫外检测器、4.2旋转蒸发仪：4.3涡流混勾器：4.4超声波发生器：4.5旋转蒸发仪4.6微孔滤膜过滤器：5测定步骤5.1试样处理取200g试样绞碎.称取5.0g（精确至0.00g)绞碎后的试样置于塑料试管中.加人约1g硫酸钠，乙晴+三氯甲烷（10V+1V）20mL，超声提取15min.2500r/min离心3min，过滤取滤液于蒸发瓶中.残渣再加乙嘴→三氯甲烷（10V+1V）20ml..超声提取15min.2500r/min离心3min，过滤合并滤液于蒸发瓶中.于.40℃水浴旋转蒸发仪上蒸发至干（如果量大，可分两次蒸）。残渣加人2.0mL2：硫酸钠水溶液和3.0ml正已烷：在涡流混匀器上剧烈混合：转人离心管中.4000r/min离心3min：用吸管吸去上层正已烷.并弃去，再用3.0mL正已烷洗水相一次.同法弃去正已烷。向水相中加入30mI.乙腈一三氯甲烷混合溶剂（2V+1V）.于涡流混匀器上剧烈混勾，用吸管吸去上层液并弃去：下层有机相转人蒸发瓶中于40℃水浴中旋转蒸发至干：准确加人1.0mL流动相溶解残渣于涡流混匀器上混匀3min：通过0.15um的微孔滤膜过滤。滤液作HPIC分析。5.2测定5.2.1液相色谱参考条件a）色谱柱：Hypersil0DS2250mm×4.6mm(内径）.粒径5μm：b）流动相：甲醇+0.01ml/L磷酸盐缓冲液+冰乙酸=25+75+1.1：c）检测波长：270nmd）流速：l.0ml/min5.2.2标准曲线依照上述色谱条件.分别进标准工作液各个点：每个标准液进20uL.测定其峰面积，然后以标准液浓度对雌面积作校准曲线·求出回归方程及相关系数。5.2.3样品的测定在上述色谱条件下，吸取已净化的样品溶液20uI.进行HPIC分析6结果6.1计算将标准出线各点的浓度与对应的峰面积进行回归分析，然后按式（1）分别计算供试样品中磺胺二甲嘧啶、磺胺甲瞩唑的含量。X S2 V