QB 2409-1998化妆品中氨基酸含量的测定.pdf

分类号Y42QB备案号 2174-1998中华人民共和国轻工行业标准QB/T 2409-98化妆品中氨基酸含量的测定1998-11-25 发布1999-06-01实施国家轻工业局发布 QB/T 2409 -98前言本标准是按 GB/T 1.1一1993《标准化工作导则第 1 单元：标准的起草与表述规则厂第1部分：标准编写的基本规定》进行编写。本标准是根据氨基酸在一定 pH条件下，与节三酮反应生成蓝紫色化合物进行比色定量原理而制定的。本标准由国家轻工业局行业管理司提出。本标准由全国化妆品标准化中心归口。本标准由上海市日用化学工业研究所负贵起草。本标准主要起草人：甘平平、孔佳华、潘海燕、汤智凌。125 中华人民共和国轻工行业标准QB/T 2409 -98化妆品中氨基酸含量的测定范围1本标准规定了化妆品中氨基酸含量的三酮比色测定法。本标准适用于化妆品中蛋白质及其水解液、氨基酸含量的测定。本方法最小检测浓度为0.01%。2 引用标准下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准必威体育精装版版本的可能性。GB8170-87数值修约规则3原理蛋白质物质经水解成氨基酸，而氨基酸在一定的pH条件下，与荫三酮反应生成蓝紫色化合物，对其进行比色定量定，从而计算出相应的氨基酸含量。4 试剂分析中应使用分析纯（AR）试剂，试验用水应为蒸馏水或纯度相当的水。4. 1 2%三酮溶液称取三酮（HG3-984）1.0g：溶于一定量热水中，待冷却后定容至 50mL。该溶液每隔（2～3）天需重新配制。4.2磷酸盐缓冲溶液（pH=8.04）4.2.11/15mol/L磷酸二氢钾溶液称取磷酸二氢钾（GB1274）9.070g，溶于水中后定容至1L。4.2.21/15mol/L 磷酸氢二钠溶液称取磷酸氢二钠（GB1263）23.876g，溶于水中后定容至1L。4.2.3取4.2.1溶液5.0mL于100mL容量瓶中，用4.2.2溶液稀释至刻度，摇匀。4.3盐酸（GB 622） 6mol/L 溶液4.4氨基酸标准溶液（200μg/mL）准确称取白氨酸（L-Leucine 含量不小于 98%）0.2000g，用水溶解并定容至100mL，摇匀后再吸取 10mL于100mL容量瓶中加水稀释至刻度。4.5蜡块蜂蜡与石蜡之比为1:9。1999-06-01实施国家轻工业局1998-11-25批准126 QB/T 2409--985仪器5.1分光光度计：波长范围400nm～700mm5. 2 酸度计：分度值 0.02。5.3电磁搅拌器。5.4容量瓶：100，1000mL。5.5移液管：1，2，5.10mL5.6水浴锅。5.7 试管： 30mmX200mm.5.8分析天平：分度值0.0001g5.9刻度试管：25，100mL。5.10 烧杯： 100mL.6 测定步骤6.1 标准曲线的绘制准确移取氨基酸标准溶液0.0，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0mL（相当于氨基酸0，40，80，120，160，200μg）分别置于25mL刻度试管中，加水补充至4mL，然后各加入2%节三酮溶液和磷酸盐缓冲溶液各1mL，摇匀。置沸水浴中加热15min：取出冷却至室温，加水至刻度，摇匀。静置15min：用分光光度计在570nm波长下以水作参比，用1cm比色Ⅲ测定试液的吸光度，绘制吸光度对氨基酸含量（ug）的标准曲线。6.2样品前处理准确称取样品约5g（准确至0.001g）于试管，加入6mol/L盐酸溶液约10mL～20mL于沸水浴中水解约6h（对乳化体可先将试样置于沸水浴中破乳1h～2h）。加入约1g～2g蜡块约30min后，取出试管冷却。去除蜡块，将溶液移至100mL烧杯中，在酸度计上用碱液调节pH至7.5~8.0，再将溶液移入100ml，容量瓶中并加水稀释至刻度，摇匀待用。6.3 测定移取试液（6.2）1mL～~4mL置于 25mL刻度试管中，以下按6.1测定步骤进行。测得吸光度，通过标准曲线计算氨基酸的含量，同时做一空白样。7 结果表示样品中氨基酸含量（以白氨酸计）按下式计算：氨基酸含量（%）=(C,-C。)x100/ V×100m×106,式中：C,从标准曲线上查得样品的氨基酸的量，μg:Co-—从标准曲线上查得空白样的数值，μg:V移取样品溶液的量，mL;m---样品量，g。所得结果按GB8170修约用两位小数表示。8 精密度两次平行定结果之差应不大于其平均值的 10%。127