NY_T 3280.1-2018病毒微生物农药 棉铃虫核型多角体病毒 第1部分：棉铃虫核型多角体病毒母药.pdf

ICS 65.100B 17NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 3280.1-2018棉铃虫核型多角体病毒病毒微生物农药第1部分：棉铃虫核型多角体病毒母药Virus-basedinsecticides-—Helicoverpa armigera nucleopolyhedrovirus(HearNPV)-Part 1 : Helicoverpa armigera nucleopolyhedrovirus technical concentrate(TK)2018-12-01实施2018-07-27 发布Mharel!中华人民共和国农业农村部发布M NY/T 3280.1—2018前言NY/T3280《病毒微生物农药棉铃虫核型多角体病毒》分为3个部分：第1部分：棉铃虫核型多角体病毒母药；第2部分：棉铃虫核型多角体病毒水分散粒剂；一-第3部分：棉铃虫核型多角体病毒悬浮剂。本部分为NY/T3280的第1部分。本部分按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本部分由农业农村部种植业管理司提出并归口。本部分起草单位：农业农村部农药检定所、武汉中科威睿农业科技有限公司、中国科学院武汉病毒研究所。本部分主要起草人：孙修炼、王晓军、肖凤平、杨峻、类承凤、张忠信、郭明程。1 NY/T 3280.1—2018病毒微生物农药棉铃虫核型多角体病毒第1部分：棉铃虫核型多角体病毒母药1 范围本部分规定了棉铃虫核型多角体病毒母药的要求、试验方法、产品的检验与验收以及标志、标签、包装、储运、安全和保质期。本部分适用于以病毒包涵体为主要成分的棉铃虫核型多角体病毒母药。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T1601农药pH值的测定方法GB/T1604商品农药验收规则GB/T1605商品农药采样方法GB3796农药包装通则GB4789.2食品卫生微生物学检验菌落总数测定GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T8170数值修约规则与极限数值的表示和判定GB/T16150—1995农药粉剂、可湿性粉剂细度测定方法GB20813农药产品标签通则3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3. 1棉铃虫核型多角体病毒母药Helicoverpaarmigeranucleopolyhedrovirus(HearNPV）technicalconcentrate(TK)以棉铃虫核型多角体病毒包涵体为主要成分，有效含量为棉铃虫核型多角体病毒的含量，通常情况还会包含伴随病毒扩增而产生的宿主昆虫或细胞的生物组分。3. 2病毒包涵体polyhedralinclusionbody（PIB）病毒水平传播的主要载体形式，其结构特征是病毒粒子包埋于蛋白质基质的多角体中。3.3生测效价比potencyratio根据药物的药理和对生物体的作用设计试验，比较样品、标准品引起的生物反应，测定药物效价或其生物学活性。3. 4菌落形成单位colony forming units(CFU)由单个菌体或聚集成团的多个菌体在固体培养基上生长繁殖所形成的集落。指在琼脂平板上经过一定温度和时间培养后形成的每一个菌落，是计算细菌或霉菌数目的单位。1 NY/T3280.1—20183. 5 杂菌菌落总数numberof microbial contaminants将棉铃虫核型多角体病毒母药样品稀释后涂布在琼脂营养培养基上，所得到的微生物（真菌和细菌)菌落数之和。4要求4.1外观通常为灰白色或褐色均匀粉状物，无可见机械杂质，不应有结块；或者灰白色或褐色液体，存放过程中可能出现沉淀，经搅动能恢复原状，不应有结块。4.2规范项目及指标棉铃虫核型多角体病毒母药还应符合表1的要求。表1棉铃虫核型多角体病毒母药控制项目指标项目指标病毒包涵体数量，PIB/g或PIB/mL≥100亿生测效价比（标准品LCso/待测样品LCso），%≥80. 0杂菌菌落总数，CFU/g或CFU/mL≤1.0X107pH5. 0~7. 5(固体)干燥减量，%5.0细度（通过75μm标准筛），%≥95. 05试验方法5.1一般规定除非另有说明，本标准所用试剂均为分析纯，所述溶液均为水溶液，试验用水为GB/T6682中规定的三级水。5.2抽样按GB/T1605中固体制剂采样”“液体制剂采样”方法进行。用随机数表法确定抽样的包装件，最终抽样量应不少于200g（mL）。5.3PCR扩增及DNA测序法对病毒毒种的鉴定通过提取试样中病毒DNA作为模板，用HearNPVme53基因和dbp基因的特异性引物进行PCR扩增反应，琼脂糖凝胶电泳检测。当PCR扩增片段大小约为0.5kb时，回收扩增片段，并克隆到T载体上，用M