NY 765-2004高致病性禽流感 样品采集、保存及运输技术规范.pdf

ICS 11.220B 41NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 765-2004高致病性禽流感样品采集、保存及运输技术规范2004~02-17 发布2004-02-17实施中华人民共和国农业部发布 NY/T 7652004前 言本标推中附录 A和附录 B为规范性附录。本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由全国动物检疫标准化技术委员会归口。本标准起草单位：农业部动物及动物产品卫生质量监督检验测试中心、农业部兽医诊断中心。本标准主要起草人：王玉东、郭福生、龚振华、王宏伟、曲志娜、王娟、刘俊辉、蒋正军。1 NY/T 765--2004高致病性禽流感样品采集、保存及运输技术规范1范围本标准规定了高致病性禽流感病料采集、保存和运输的方法。本标准适用于疑似高致病性禽流感禽样品的采集、保存及运输。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的必威体育精装版版本。凡是不注日期的引用文件,其必威体育精装版版本适用于本标准。NY/T 768高致病性禽流感人员防护技术规范3采样前的准备3.1采样要求3.1.1根据采样目的,采集不同类型和不同数量的样品。3.1.2采样人员必须是兽医技术人员，熟悉采样器具的使用,掌握正确的采样方法。3.2器具和试剂3.2.1器具动物检疫器械箱、保温箱或保温瓶、解剖刀、剪刀、镊子、酒精灯、酒精棉、碘酒棉、注射器及针头。样品容器（如西林瓶、平皿、1.5mL塑料离心管、10mL玻璃离心管及易封口样品袋、塑料包装袋等)。试管架、塑料盒（1.5mL小塑料离心管专用）、铝饭盒、瓶塞、无菌棉拭子、胶布、封口膜、封条、冰袋。采样刀剪等器具和样品容器须经无菌处理。3.2.2 试剂加有抗生素的 pH7.4等渗磷酸盐缓冲液（PBS）(配制方法见附录 A)。3.3记录和防护材料不于胶标签、签字笔、圆珠笔、记号笔、采样单、记录本等；口罩、一次性手套、乳胶手套、防护服、防护帽、胶靴等。4样品采集4.1 基本要求应从死禽和处于急性发病期的病禽采集样品，样品要具有典型性。采样过程要注意无菌操作，同时避免污染环境。采样人员要按NY/T768的要求加强个人防护。4.2病死禽4.2.1一般采集组织样品。取死亡不久的5只病死禽采样,病死禽数不足5只时,取发病禽补齐5只。4.2.2每只禽采集肠管及肠内容物1份；肺和气管样品1份；肝、脾、肾、脑等各1份，并分别采集。上+ NY/T 765—2004述每个样品取样重量为15g～20g,放于样品袋或平皿中。如果重量不够可取全部脏器(如脾脏)。4.2.3不同禽只脏器不能混样,同-一禽只不同脏器一般不能混样。将样品封口,贴好标签。4.3 病禽无病死禽时,采集病禽样品。4.3.1拭子样品取5只病禽采样，每只采集泄殖腔拭子和喉气管拭子各1个，将样品端剪下,分别置于含有抗生素PBS 的(加 1.0 mL～1.3 mL PBS)小塑料离心管中,封好口,贴好标签。泄殖腔拭子采集方法将棉拭子插人泄殖腔约1.5cm～2 cm,旋转后沾上粪便。粪便样品小珍禽采泄殖腔拭子容易造成伤害，可只采集5个新鲜粪便样品（每个样品1g～2g），置于内含有抗生素 PBS（加 1 mL～1.5 mL PBS)的西林瓶中,封好口,贴好标签。保存粪便和泄殖腔拭子的 PBS 中抗生素浓度提高5倍(配制方法见附录A)。喉气管拭子采集方法将棉拭子插人口腔至咽的后部直达喉气管，轻轻擦拭并慢慢旋转,沾上气管分泌物。保存喉气管拭子的 PBS 中抗生素浓度(配制方法见附录 A)。4.3.2血清样品采集 10 只病禽的血样,心脏或翅静脉采血,每只病禽采血样 2 mL～3mL,盛于西林瓶中或 10 mL离心管中经离心或自然放置析出血清后,将血清移到另外的西林瓶或小塑料离心管中，盖紧瓶塞,封好口,贴好标签。不同禽只的血样不能混合。4.3.3组织样品当需要采集组织样品时,将5只病禽宰杀,组织样品采样方法同4.2。4.4整禽采样4.4.1适于禽主或兽医部门采样。4.4.2将病死禽或病禽装人塑料袋内,至少用两层塑料袋包装，同时和血清样品一起用保温箱加冰袋密封包装，由采样人员12h内带回或送到实验室。4.4.3要求死禽和病禽总数不少于5只;组织采样方法同4.2。4.4.4血清样品不少于10份,每份不少于1.5mL。采血方法同4.3.2。4.5采样单及标签等的填写样品信息详见附录B，采样单要用钢笔或签字笔逐项填写（一-式三份），样品标签和封条应用圆珠笔填写，保温容器外封条用钢笔或签字笔填写，小塑料离心管上可用记号笔作标记。应将采样单和病史资料装在塑料包装袋中，随样品一起送到实验室。4.6包装要求4.6.1每个组织样品应仔细分别包装，在样