SL 88-2012水质 叶绿素的测定 分光光度法.pdf

ICS 13. 160SLZ 16中华人民共和国水利行业标准SL 88—2012替代 SL 88—1994水质叶绿素的测定分光光度法Water quality--Determination of chlorophyll byspectrophotometry2012-07-31 发布2012-10-31实施中华人民共和国水利部发布 中华人民共和国水利部关于批准发布水利行业标准的公告2012年第25号中华人民共和国水利部批准《水质叶绿素的测定分光光度法》（SL88一2012）标准为水利行业标准，现予以公布。序号标准名称标准编号替代标准号发布日期实施日期水质‧叶绿素的测定分光光度法SL 88—2012SL 887.312012.10.31水利部2012年7月31日Tl SL 88—2012次目IV前言1范围...中ee2 方法原理干扰及消除3 4试剂和材料仪器和设备56水样的采集和保存7分析步骤+...............+·+.........8结果计算9精密度和准确度中专手中中中容甲+10质量保证和质量控制，11注意事项·I SL 88—2012前言本标准依据GB/T 1.1一2009 《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》、GB/T20001.4--2001《标准编写规则第4部分：化学分析法》的规则起草。本标准替代SL88一1994《叶绿素的测定（分光光度法）》，主要修订内容如下：修改了水样的保存方式：原标准规定水样在2～5℃冰箱中避光保存，新标准规定水样在24h内过滤，滤膜在一20℃以下的冰箱内保存；-修改了过滤藻类的滤膜：原标准使用醋酸纤维滤膜，新标准使用玻璃纤维滤膜；修改了水样过滤时的操作：原标准要求抽干滤膜，新标准不抽干滤膜，而是在减压状态下缓慢结束抽滤，最后用滤纸吸干水分；-修改了藻类细胞破碎方法：原标准使用研磨法，新标准使用反复冻融法；修改了提取时间：原标准提取24h，新标准提取4～12h；-修改了测定时的吸收波长：原标准在750nm、663nm、645nm、630nm下测定吸光度，新标准在750nm、664nm、647nm、630nm下测定吸光度;修改了计算公式，原标准中公式被新公式替代；一增加了校正脱镁叶绿素a的相关内容。本标准为全文推荐。本标准批准部门：中华人民共和国水利部。本标准主持机构：水利部水文局。本标准解释单位：水利部水文局。本标准主编单位：松辽流域水环境监测中心。本标准出版、发行单位：中国水利水电出版社本标准主要起草人：白焱、傅春艳、戴欣、潘曼曼、杨航、董华、石岩、鲁雪、李聪。本标准审查会议技术负责人：齐文启。本标准体例格式审查人：徐海峰、王艺。本标准所替代标准的历次版本为：SL 88--1994.IV SL 88-2012水质叶绿素的测定分光光度法1范围本标准规定了测定水中叶绿素的分光光度法。本标准适用于地表水中叶绿素的测定。当水样体积为300mL、使用1cm比色皿时，叶绿素a的检出限为0.11μg/L，测定下限为0.5μg/L；叶绿素b的检出限为0.25μg/L，测定下限为1.0μg/L；叶绿素 c 的检出限为0.25μg/L，测定下限为1. Oμg/ L2　方法原理将一定量水样用玻璃纤维膜过滤，收集藻类，使用反复冻融法对藻类细胞进行破碎，用90%丙酮溶液提取叶绿素，根据叶绿素光谱特性依次测定750nm、664nm、647nm、630nm波长下的吸光度，计算叶绿素的含量。3干扰及消除脱镁叶绿素a能干扰叶绿素a的测定，当含有脱镁叶绿素a时，应在测定叶绿素a的同时测定脱镁叶绿素a的含量，以校正干扰。校正脱镁叶绿素a时，分别测定酸化前后吸收池内的吸光度，代人公式中计算，以校正脱镁叶绿素a对叶绿素a的干扰。4试剂和材料除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂和纯水。4.1碳酸镁悬浊液：w（MgCO）=1%。于1.0g碳酸镁粉末中加人100mL纯水，搅拌成悬浊液。每次使用时应充分摇匀。4.2丙酮溶液：g(C;H.0）=90%。在900mL丙酮中加 100mL纯水。4.3盐酸溶液：c（HCl）二0.1mol/L。将8.5mL浓盐酸加人到500mL纯水中，冷却至室温后稀释至 1000mL。5仪器和设备分析时均使用符合国家标准的A级玻璃量器。5.1可见分光光度计。5.2抽滤器。5.3微孔滤膜：直径为47mm、孔径为0.7μm的玻璃纤维滤膜。5.4 真空泵。5.5低温冰箱：能控制在一40℃±1℃5.6离心机：转速能达到3000～4000r/min，宜使用带控温装置的离心机。5.7 培养皿：用来盛放、转移滤膜。5.8具塞玻璃离心管：10mL或15mL。5.9铝箔。5.10 镊子。1 SL 88—20125.114针式过滤器：0.45μum孔径的聚四氟乙烯有机相针式过滤器。5