SN_T 4140-2015出口鱼肉香肠和香精中多种杂环胺的测定 液相色谱-质谱/质谱法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 4140—2015出口鱼肉香肠和香精中多种杂环胺的测定液相色谱-质谱／质谱法Determination of heterocyclic amines in fish sausage and essence for export-LC-MS/MS method2015-09-01实施2015-02-09 发布中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局 SN/T 4140—2015前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国上海出人境检验检疫局、中华人民共和国新疆出入境检验检疫局。本标准主要起草人：赵善贞、周瑶、伊雄海、曹晨、曲栗、郭德华、邓晓军、李锋格、苏敏1 SN/T 4140--2015出口鱼肉香肠和香精中多种杂环胺的测定液相色谱-质谱/质谱法1范围本标准规定了出口食品和食品添加剂中1-甲基-9H-吡啶［4，3-b}吲哚（Harman）、9H-吡啶［4，3-6］吲哚（Norharman）、2-氨基-9H-吡啶［2，3-b}吲哚（AaC）、2-氨基-3-甲基-9H-吡啶［2，3-b吲哚（MeAaC）、2-氨基-1,6-二甲基咪唑-［4，5-b}吡啶（DMIP）、3-氨基-1，4-二甲基-5H-吡啶并［4,3-b］吲哚（Trp-P-1）、3-氨基-1-甲基-5H-吡啶［4,3-6吲哚（Trp-P-2）、2-氨基-3-甲基咪唑-［4，5-f}喹啉（IQ）、2-氨基-3,4-二甲基咪唑-［4,5-f]喹啉（MeIQ）、2-氨基-3-甲基咪唑-［4，5-f］喹喔啉（IQx）、2-氨基-3,8-二甲基咪唑-［4,5-f喹喔啉（8-MeIQx）、2-氨基-3，7,8-三甲基咪唑-［4，5-f喹喔啉（7,8-DiMeIQx）、2-氨基3，4,8-三甲基咪唑-［4,5-f］喹喔啉（4，8-DiMeIQx）、2-氨基-1-甲基-6苯基咪唑-［4，5-b］吡啶（PhIP）等14种杂环胺的制样和液相色谱-质谱/质谱测定方法。本标准适用于鱼肉香肠、肉脯以及柠檬香精、咸味香精中14种杂环胺的测定。2方法提要试样中的杂环胺类物质用乙睛提取，正已烷除去部分脂质杂质；香精中的杂环胺类物质用甲醇提取，调节至pH5.5～6.5。提取液以固相萃取小柱净化，液相色谱-质谱/质谱检测和确证，内标法定量。3试剂材料除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为去离子水。3.1乙腈：高效液相色谱级。3.2甲醇:高效液相色谱级。3.3正已烷：高效液相色谱级。3.4甲酸：高效液相色谱级。3.5浓盐酸:浓度 36%～38%。3.6氨水:浓度25%～28%。3.7氢氧化钠。3.8甲酸铵：高效液相色谱级。3.9²0.1 mol/L盐酸溶液：准确量取 9 mL浓盐酸（3.5）,水稀释定容至 1L。3.100.1mol/L氢氧化钠溶液：精确称取4.0g氢氧化钠（3.7），水稀释定容至1L。3.1110 mmol/L甲酸铵溶液：精确称取0.63g甲酸铵(3.8）,水稀释定容至1L。3.12含0.1%甲酸的乙腈：准确量取1ml.甲酸（3.4），乙腈稀释定容至1L。3甲醇-氨水（90十10，体积比）：量取90mL甲醇（3.2），加人10mL氨水（3.6），混匀。现用现配。3.133.14标准品：见附录A。3.15标准储备溶液：取适量标准品（3.14），分别用甲醇溶解定容至终浓度为500μg/mL，18℃避光冷冻保存。3.16标准中间溶液：用甲醇分别稀释标准储备溶液（3.15）至终浓度为10μg/mL，于4℃避光冷藏1 SN/T 4140—2015保存。3.17内标储备溶液：取适量Norharman-d7（3.14），用甲醇溶解定容至终浓度为500 μg/mL，一18℃避光冷冻保存。3.18内标中间溶液：用甲醇稀释内标储备溶液（3.17)至终浓度为10μg/ml，于4℃避光冷藏保存。3.19强阳离子固相萃取柱1)或相当者：60 mg,3 ml。4仪器和设备4.1液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）。4.2^分析天平：感量0.0001g和0.01g。4.3±均质器。4.4涡旋混匀器。4.5冷冻离心机：4000 r/min和15000 r/min。4.6固相萃取装置。4.7氮吹浓缩仪。4.88 pH计。5试样制备与保存5.1鱼肉香肠、肉脯取样品中有代表性的可食部分约500g，用组织捣碎机充分捣碎混匀，装人洁净容器作为试样，密封，并标明标记。将试样置于18℃避光保存。5.2香精取有代表性的样品约500g，充分混匀，装人洁净容器作为试样，密封，并标明标记。将试样置于常温处避光保存。5.