SNT 2338-2009草莓滑刃线虫检疫鉴定方法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 2338—2009草莓滑刃线虫检疫鉴定方法Quarantine identification of Aphelenchoides fragariae(Ritzema Bos)Christie2009-07-07 发布2010-01~16实施中华人民共和国发布0075让国家质量监督检验检疫总局效码防伪 SN/T 2338--2009前言本标准的附录 D为规范性附录,附录 A、附录 B和附录 C为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位为中华人民共和国珠海出人境检验检疫局和珠海市质量计量监督检测所。本标准主要起草人：陈其文、张卫东、廖力、蒋立琴、乐海洋、徐淼锋、张建军、刘勇、彭仁。本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。 SN/T 2338—2009草莓滑刃线虫检疫鉴定方法1范围本标准规定了草莓滑刃线虫检疫和鉴定方法。本标准适用于进出境花卉、苗木、盆景及草莓、柑橘、番茄等经济作物中草莓滑刃线虫的检疫鉴定。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的必威体育精装版版本。凡是不注且期的引用文件，其必威体育精装版版本适用于本标准。SN/T1157进出境植物苗木检疫规程SN/T1158进出境植物盆景检疫规程3符号和缩略语L=体长;a=体长/最大体宽；b一体长/体前端至食道与肠连接处的距离；c=体长/尾长；St二口针长度;V=体前端至阴门处距离100T=泄殖腔口至精巢末端的距离×10b/体长tail=尾长;spicule一交合刺长度。4原理中文名称：草莓滑刃线虫学名:Aphelenchoides frage(Ritzema Bos,1890)Christ1932ntea滑刃目（Aphelenchida）、滑刃科（Aph-分类地位：线形动物门（Nematoda，侧尾腺纲（Secernerelenchoididae),滑刃属（Aphelenchoides)草莓滑刃线虫是一种芽叶寄生线虫。主要危害植物地上部分的腋芽、嫩叶和花序，被侵染的植株表现为生长不良，发生矮化和畸形，导致枝弱叶稀，顶芽凋枯，开花减少，产量及品质降低。草莓滑刃线虫主要依靠带芽苗木、接穗等无性繁殖材料传播扩散。其雌雄虫的形态学特征是制定该检疫鉴定方法的主要依据，传播途径、寄主范围、地理分布（参见附录 A)和生物学特征是鉴定的辅助依据。5仪器和用具5.1仪器生物显微镜（100倍～1000倍）、体视显微镜（10倍以上，具透射光源）、电热恒温箱、冰箱。5.2　用具钟面皿或培养皿、盖玻片、载玻片、凹玻片、玻璃纤维丝、试管、烧杯、小镊子、剪刀、挑针、浅盘、打孔器、指形管、酒精灯、干燥器、滤纸或纱布、漏斗、漏斗架、乳胶管、止水夹、加热板、分样筛（100目、500目）。 SN/T 2338—20096 试剂乙醇、指甲油、石蜡、FG固定液（福尔马林：甘油：蒸馏水=10：1：89）、4%甲醛、乳酚油（苯酚20mL、乳酸20mL、甘油 40mL和蒸馏水20mL混合而成）。7现场检疫对草莓、柑橘、番茄、花卉、苗木、盆景等芽叶部分进行检查，重点选取矮化、矮缩和畸形等症状的苗木，如无可疑症状则按要求随机取样。取样后立即置密封塑料袋，标记后及时送实验室检测。具体抽样比例按SN/T1157和SN/T1158执行。8实验室检验8.1线虫分离用浅盘分离法或漏斗法分离线虫（参见附录B)。8.2体视显微镜镜检分离获得的水样在10倍以上体视显微镜检查，初步观察线虫的形态特征。8.3标本制作挑出若干分离到的线虫虫体，置于载玻片上制作临时玻片或永久玻片（参见附录C)。8.4生物显微镜观察、摄影和测量应针对雌、雄虫主要鉴定特征仔细观察并显微摄影，重点包括整体形态、头区轮廓、口针、侧线、尾部形态、雌虫生殖系统及雄虫交合刺等，并在每张图片上加相应标尺，测量并计算a、b、c和V等值。9形态鉴定特征9.1滑刃线虫属形态鉴定特征虫体长度中等到长，热杀死后，雌虫虫体直到腹弯，雄虫通常尾部向腹面弯成沟状整个虫体呈“J”形；侧线通常4条，偶尔2或3条；头部略缢缩，头架骨化弱；口针较细，有基部球或基部膨大，口针长度通常为10 um～12 um，般不超过 20 um;食道前体部圆柱形，中食道球发达、卵圆形或方圆形，中食道球瓣发达，后食道腺叶发达、覆盖肠的背面；排泄孔位于中食道球后水平处。雌虫阴门位于虫体中后部，一般位于体长的60%～70%;单生殖腺、前伸，后阴子宫囊通常存在并常含有精子，偶尔后阴子宫囊缺；尾呈圆锥形，尾端形态多样：钝圆或细圆，指状或分叉或有1个腹突，有或无尾尖突，尾尖突形态多样。雄虫尾呈圆锥形、向腹面弯