NY_T 3144-2017饲料原料 血液制品中18中β-受体激动剂的测定 液相色谱-串联质谱法.pdf

ICS 65.120B 46NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 3144-2017饲料原料血液制品中18种β－受体激动剂的测定液相色谱一串联质谱法Determination of 18 β-agonists in blood products feedstuff-Liquid chromatography-tandem mass spectrometry(LC-MS/MS)2017-12-22 发布2018-06-01实施中华人民共和国农业部发布 NY/T 3144—2017前 言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草本标准由农业部畜牧业司提出。本标准由全国饲料工业标准化技术委员会（SAC/TC76）归口。本标准起草单位：中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所[国家饲料质量监督检验中心(北京）。本标准主要起草人：索德成、王培龙、李阳、王瑞国、苏晓鸥、樊霞、周炜、冯三令、李宏- NY/T 3144—2017饲料原料血液制品中18种β-受体激动剂的测定液相色谱-串联质谱法1范围本标准规定了饲料原料血液制品中18种β-受体激动剂测定的液相色谱-串联质谱法。本标准适用于血球蛋白粉、水解血粉、血球蛋白粉、血粉、发酵血粉中克仑特罗（Clenbuterol）、沙丁胺醇（Salbutamol）、莱克多巴胺（Ractopamine）、齐帕特罗（Zilpaterol）、氯丙那林（Clorprenaline）、特布他林（Terbutaline）、西马特罗（Cimaterol）、西布特罗（Cimbuterol）、马布特罗（Mabuterol）、溴布特罗（Brombuterol）、班布特罗（Bambuterol）、克仑普罗（Clenproperol）、妥布特罗（Tulobuterol）、利托君（Ritodrine）、沙美特罗（Salmeterol）、克仑塞罗福莫特罗（Formoterol）、苯乙醇胺A（PhenylethanolamineA)18种β-受体激动剂的测定。本标准方法检出限为1μg/kg，定量限为5μg/kg。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本义件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T14699.1饲料采样GB/T20195动物饲料试样的制备3原理饲料原料血液制品经酶解处理后，用混合型阳离子固相萃取小柱净化，吹干，稀释液溶解，液相色谱-串联质谱仪检测，基质添加校正、外标法定量。4试剂除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯试剂，实验室用水符合GB/T6682中一级水的规定。4.1甲醇：色谱纯。4.2甲酸：色谱级。4.3乙酸铵提取液（pH=5.2）：取乙酸铵15.4g，用1000mL水溶解，用乙酸调pH至5.2。4.4样品稀释溶液：取甲酸0.1mL，乙腈10mL，加水90ml，混勺。4.5氨水甲醇溶液：取5mlL氨水与95ml甲醇混合。4.6高氯酸溶液：取30mL高氯酸与70ml.水混合。4.7克仑特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺、齐帕特罗、氯丙那林、特布他林、西马特罗、西布特罗、马布特罗、溴布特罗、班布特罗、克仑普罗、妥布特罗、利托君、沙美特罗、克仑塞罗、福莫特罗和苯乙醇胺A对照品：纯度≥98%。4.8β-受体激动剂标准储备液：分别精密称取各种β-受体激动剂对照品至棕色容量瓶中，用甲醇配成浓度为1mg/mL的标准储备液，2℃～8℃冷藏保存，有效期12个月。4.9β-受体激动剂标准工作液：分别精密吸取各种β-受体激动剂储备液（4.8），用样品稀释溶液稀释- NY/T 3144—2017成浓度为1μg/ml的标准工作液。2℃～8℃冷藏保存，有效期3个月。4.10β-葡萄糖苷酸酶/芳基硫酸酯酶：β-盐酸葡萄糖醛苷酶≥85000u/mL。4.11氮气：纯度99.9%。4.12固相萃取小柱：混合型阳离子交换柱（3ml,60mg）,或其他性能相当的小柱。4.13滤膜：0.22μm，有机材质。5仪器和设备5.1液相色谱串联质谱仪：配有电喷雾电离源。5.2氮吹仪。5.3离心机：转速不低于8000r/min。5.4粉碎机。5.5涡旋振荡器。5.6恒温水浴振荡摇床。5.7固相苯取装置。5.8天平：感量0.01g；感量0.00001g。6采样和试样的制备按GB/T14699.1的规定抽取有代表性的样品，用四分法缩减取样，按照GB/T20195的规定制备样品，粉碎过0.45mm孔径筛，混合均匀，装入磨口瓶中备用。7分析步骤7.1提取称取2g（精确至0.01g）样品于50ml离心管中，准确加人20ml.乙酸铵提取液（4.3）和50μlβ-葡萄糖背酸酶/芳基硫酸酯酶，37℃水解过夜（应大于16h），然后于8000