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ICS 65.020B 39NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 1842—2010人参皂苷的测定Determination of ginsenosides in ginseng2010-05-20 发布2010-09-01实施中华人民共和国农业部发布
NY/T 1842-2010前言本标准的附录 A为资料性附录。本标准由中华人民共和国农业部种植业管理司提出并归口。本标准起草单位:农业部参茸产品质量监督检验测试中心。本标准主要起草人:陈丹、李月茹、侯志广、王艳梅、初丽伟、潘浦群、宋桂茹。
NY/T 1842—2010人参皂苷的测定1范围本标准规定了测定人参中9种人参皂苷的高效液相色谱方法。本标准适用于人参中人参皂苷 Rbl、Rb2、Rb3、Rc、Rd、Re、Rgl、Rg2 和 Rf 的测定。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的必威体育精装版版本。凡是不注日期的引用文件,其必威体育精装版版本适用于本标准。GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T 15517.1模压红参分等质量标准3原理试样经乙醚脱脂后,用甲醇索氏提取,提取后的样液用SPE C18柱净化,利用高效液相色谱仪(紫外检测器)对试样中的9种人参皂苷进行分离和测定,外标法定量4试剂和材料除非有说明,所用试剂均为分析纯,水为GB/T 6682中规定的一级水。4.170%乙醇溶液:取 700mL无水乙醇,用去离子水稀释至1000mL。4.2甲醇:色谱纯。4.3 乙醚。4.4人参皂苷标准品:Rb1、Rb2、Rb3、Rc、Rd、Re、Rgl、Rg2、Rf(含量 98%)。4.5标准混合溶液:逐-准确称取 0.183 g Re、0.163 g Rgl、0.102 g Rf、0.102 g Rg2、0.255 g Rb1、0.306gRc、0.367gRb2、0.408gRb3、0.214gRd(精确至0.0001g)人参皂苷标准品,置于100mL容量瓶中,用甲醇定容,配制成质量浓度为 1.8g/L、1.6g/L、1.0g/L、1.0g/L、2.5g/L、3.0g/L、3.6g/L、4.0 g/L和2.1g/L的混合标准溶液,贮存在一18℃以下冰箱中,有效期 6 个月。5 仪器5.1高效液相色谱仪:配有紫外检测器。5.2电子天平:感量为0.001g。5.3电子天平:感量为0.0001g。5.4旋转蒸发仪。5.5 索氏提取器。5.6控温水浴。5.7循环水多用真空泵。5.8 粉碎机。5.9样品筛:孔径0.25mm。1
NY/T 1842-—20105. 10 SPE Cis小柱:1 000 mg 填料,6 mL。5.11微量进样器:5μL~50 μL。6试样制备按 GB/T15517.1—1995中6.3的规定执行。7 分析步骤7.1样品提取准确称取人参干样2g(精确至 0.001g),加入100 mL乙醚于索氏提取器中,提取 1h,弃去乙醚,待残渣中乙醚挥干后,再加人甲醇回馏8h。7.2样品净化7.2.1 SPE Ci:柱的预处理先用 20mL去离子水淋洗 SPE C1柱,然后用20mL的甲醇进行活化,再用 20mL去离子水平衡。待水与柱筛板近平时上样7.2.2提取液的处理提取液在60℃水浴条件下,经旋转蒸发仪减压浓缩至近干,氮气吹干,加人4mL去离子水充分摇匀。取 2mL注人预先活化好的 SPE Ci8柱中,待液面与柱筛板近平时,倒人 10mL去离子水淋洗 SPEC18柱,弃去流出液,待淋洗液液面与柱筛板近平时,加入25mL乙醇溶液(4.1)洗脱 SPE C1柱,收集洗脱液于50mL刻度试管中,氮气吹至25mL以下,用甲醇定容至25mL,混匀后,用0.2μm滤膜过滤,待测。7.3测定7.3.1仪器参考条件 色谱柱:Cig(4.6 mmX300 mmX0.5 μm)或相当者。 流动相:甲醇十水。7.3. 1.3 柱温:47℃。流速:0.5 mL/min~0.8 mL/min。检测波长:202nm。进样量:10μL。梯度洗脱程序见表1。表1梯度洗脱程序甲醇流速时间%mL/minmin520. 50~2020~2352~570. 5~0. 8570.823~360.836~3957~650. 839~716565~520.8~0.571~74520. 574~847.3.2标准曲线的绘制用混合皂苷标准工作液(4.5)按着梯度洗脱程序进行分析。准确吸取0 mL、2 mL、4 mL、6mL、2
NY/T 1842—-20108mL、10mL混合皂苷标准溶液(4.5),分别置于 10 mL容量瓶中,用甲醇稀释至刻度,准确吸取
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