NYT 1485-2007香蕉穿孔线虫检疫检测与鉴定技术规范.pdf

ICS 65.020B 16NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 1485-2007香蕉穿孔线虫检疫检测与鉴定技术规范Detection and identification for Radopholus similis (Cobb) Thorne2008-03-01实施2007-12-18 发布中华人民共和国农业部发布 NY/ T 1485-2007前言本标准的附录 A 和附录 D 为规范性附录,附录 B、附录 C、附录 E 和附录 F 为资料性附录。本标准由中华人民共和国农业部提出并归口。本标准起草单位：全国农业技术推广服务中心、华南农业大学、广东省植物检疫站、北京市植物保护站。本标准主要起草人：王福祥、谢辉、吴仕豪、项宇、曹莉、张建华、周春娜、吴立峰、朱莉。I NY/T 1485-—2007香蕉穿孔线虫检疫检测与鉴定技术规范1范围本标准规定了香蕉穿孔线虫(Radopholus similis)的检疫检测和鉴定方法。本标准适用于本行业对植物、植物产品、土壤和其他植物生长介质中的香蕉穿孔线虫的检测和鉴定。2 术语、定义下列术语和定义适用于本标准。2. 1生长介质growing medium植物的根系在其中生长或用于此目的任何物质。2. 2检验inspection由官方对植物、植物产品或其他限定物进行直观检查，以确定是否存在有害生物和(或)是否符合植物检疫法规。2.3检测 test为确定是否存在有害生物或为鉴定有害生物而进行的除肉眼检查以外的官方检查。3原理香蕉穿孔线虫的形态学特征(（见附录 A)及其寄主范围、地理分布、生物学特性、为害症状和传播途径(参见附录 B)是本标准的依据。4仪器、用具及药品4.1仪器、用具采样用具：铲、枝剪、砍刀、聚乙烯塑料袋、油性笔、标签、记录本等。线虫分离用具：漏斗（直径10cm～14cm）、乳胶管、止水夹、浅筛盘、网筛（20目、400目）、离心机、试管、培养皿、面巾纸、漏斗架、离心机等。标本制作、鉴定仪器和用具：解剖镜、光学显微镜、凹玻片、平玻片、盖玻片、玻璃丝、酒精灯、恒温水浴箱、电热板、吸管、挑虫针、镊子、干燥器等。4.2药品40%甲醛、甘油、90%乙醇、蒸馏水、苯酚、乳酚、中性树胶、石蜡、硅胶、氯化钙、蔗糖、硫酸镁（MgSO4）、高岭土等。5现场检验和抽样5.1现场检验在种植、销售场地，对香蕉穿孔线虫的寄主植物进行调查，观察其生长状况，对地上部分表现附录B所述症状的植株，采集其根部及根际生长介质；若地上部无明显症状表现的，则随机抽取部分植株，观察1 NY/T 1485—2007其根部生长状况并取样。5.2抽样5.2.1地栽植物的抽样当田间或温室(大棚)内地栽的植物没有明显症状表现时，可采用对角线、棋盘式和平行跳跃式取样方法,确定取样点,在1 hm²～2 hm²的地块上至少取 20 个～30 个点。在取样点的植株根部,铲去表层土壤、杂草和其他杂物，取营养根10g～20g,根际土壤100g～200g,将各点土壤混合均匀后，倒去部分土壤，保留1000g～2000g土壤作为1个土样，根放在一起作为1个根样。对香蕉，可以采集根部距假茎5cm～15cm的根和距地表5cm～25cm土层的根际土壤；其他植物，可根据根系的深浅，采集营养根或须根及其周围土壤。当田间或温室(大棚)内地栽的植物表现明显症状时,在发病点的病株根部,采集表现症状的根及其周围的土壤。5.2.2盆栽植物的抽样对盆栽植物，当无明显症状表现时，随机抽取长势相对较弱的植株，采集其根和根际介质（或土壤），抽样率按植株数10000株(盆)抽3%～5%，植株数100株～10000株(盆)抽6%～10%，植株数100株（盆)抽样最低数不少于10株(盆），每株(盆)采集根5g～10g和根际介质(或土壤)50g～100g,每40株～50株(盆)植物的根和根际介质（或土壤)分别混合成1个根样和1个土样。当抽样数少于100株(盆)时,至少组成2个混合样品。当盆栽植物表现明显症状时，可以采集整个病株的根系及其周围的介质(或土壤)作为一个独立的样品。5.2.3抽样记录采集的样品放在塑料袋中封好袋口，贴上标签，防止不同样品相混，并将现场抽样结果填入《表1植物有害生物调查抽样记录表》参见附录C)。5.3样品保存采集的样品若不能及时分离，可将样品放在20℃～25℃的室内，将袋口打开透气，并注意保湿和避免阳光照射，样品保存时间不要超过1个月。6实验室检测鉴定6.1样品中线虫的分离根据样品类型和实验室条件，按照附录D中的一种或几种方法分离样品中的线虫。6.2线虫鉴定标本的制作参照附录E中的方法,将分离得到的线虫杀死、固定，制成标本鉴定。6.3线虫的形态鉴定在显微镜下对线虫标本的形态特征进行观察、测量和记述,并与附录A记述的香蕉穿孔线虫形态特征比较。7结果确定以雌、雄虫的