SN_T 1004-2013出口罐头食品中尿素残留量的测定.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1004—2013代替SN/T 1004—2001出口罐头食品中尿素残留量的测定Determination of urea residues in canned foods for export2013-08-30 发布2014-03-01实施中华人民共和国[发布国家质量监督检验检疫总局 SN/T 1004--2013前言本标准按照GB/T1.1--2009给出的规则起草。本标准代替SN/T1004--2001《出口蘑菇罐头中尿素残留量检验方法》。本标准与 SN/T1004一2001相比，除编辑性修改外主要技术变化如下：标准名称改为“出口罐头食品中尿素残留量的测定”；标准的适用范围扩展为：食用菌、水果、蔬菜、鱼类和肉类罐头；增加液相色谱法作为第一法；分光光度法改为第二法，并对方法条件进行了改进；删除了抽样部分的内容。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国厦门出人境检验检疫局检验检疫技术中心、中华人民共和国云南出人境检验检疫局。本标准主要起草人：徐敦明、张缙、王裔耿、李志煌、彭云霞、陈达捷、周昱。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：-SN/T 1004-2001。 SN/T 1004--2013出口罐头食品中尿素残留量的测定第一法‧液相色谱法1范围本标准规定了出口罐头食品中尿素残留量的高效液相色谱检测方法本标准适用于食用菌、水果、蔬菜、鱼类和肉类罐头中尿素残留量的测定。2方法提要试样用1%乙酸溶液提取，占顿醇荧光衍生化，液相色谱-荧光检测器测定，外标法定量。3试剂和材料除特殊注明外，所有试剂均为分析纯，水为去离子水3.1甲醇：色谱纯。3.2三氯甲烷：色谱纯。3.3乙酸：色谱纯。3.4 盐酸。3.5辛烷基磺酸钠。3.6占顿醇(Xanthydrol,CAS号 90-46-0）:纯度大于 99%3.71%乙酸溶液：取10mlL乙酸于1.000mL容量瓶，用水定容至1000mL。3.81%盐酸溶液：取10mL盐酸于1000mL容量瓶，用水定容至1000mL。3.920mmol/L辛烷基磺酸钠水溶液：准确称取20／mmol（4.32g)的辛烷磺酸钠溶于1000ml水中，用磷酸调节 pH 至 4.0。3.10占顿醇衍生剂：准确称取0.1g占顿醇于-100mL容量瓶；用甲醇溶解并定容至100mL。3.11尿素标准品（Urea,CAS 号 96-45-7）:纯度大于 99%。3.12标准贮备溶液：准确称取尿素标准品100.0mg，用水溶解并定容至:100mL，获得1g/L的标准贮备液。3.13标准工作溶液：现配现用，标准贮备液用水逐级稀释成所需浓度的标准工作溶液。3.14微孔滤膜：0.22μm,有机相型。4仪器和设备4.1高效液相色谱仪：配有荧光检测器。4.2组织捣碎机。4.3均质器。4.4涡旋混合器。1 SN/T 1004—20134.5 离心机。4.6分析天平:感量0.1 mg和0.01 g。4.7 容量瓶:50 mL、100 mL、1 000 ml.。4.8移液器:10～100 μL和 100～1 000 μl。4.9聚丙烯离心管:50 ml 和15 mL,具塞。5试样的制备与保存5.1要求在制样的操作过程中，应防止样品污染或发生残留物含量的变化。5.2试样制备取代表性样品约500g，用捣碎机捣碎，混匀。试样均分为两份，装人洁净容器，密封，并标明标记。5.3试样保存将试样于一18℃冷冻保存。6测定步骤6.1 提取称取试样5.0g（精确到0.1g）于50ml.具塞离心管中，加人20mL1%乙酸溶液（3.7），均质2min，加人5mL三氯甲烷，均质2min，以3000r/m离心3min，提取上清液，过滤。在盛有残渣的离心管内再加人20ml1%乙酸水溶液，均质2min，再离心过滤。合并提取液并用水定容至50ml.混匀,待衍生。6.2　衍生化准确吸取0.5ml提取液和各级标准工作液（0.2mg/I、2mg/L、20 mg/L、200 mg/1、1000 mg/I.），分别加人2mL进样瓶中，依次加人0.4mL甲醇，50μL占顿醇衍生剂（3.10)和50μl1%盐酸溶液，盖紧瓶盖，混匀，衍生 5min,过0.22 μm 滤膜后，供 HPLC测定。6.3　测定6.3.1色谱条件色谱条件如下：a）色谱柱:Ci柱,长 250 mm,内径 4.6 mm，粒径5 μm,或相当者;b）柱温:35 ℃；流动相：20mM辛烷基磺酸钠水溶液（3.9）+乙腈（65+35，体积比）；c）d）流速:1 mL/min;e）进样量：20μL;f)）检测波长：激发波长213nm，发射波长308nm。6.3.2定量测