SC_T 3041-2008水产品中苯并（α）芘的测定 高效液相色谱法.pdf

ICS 67.050B 50SC中华人民共和国水产行业标准SC/T 3041—2008水产品中苯并（a）花的测定高效液相色谱法Determination of benzo(a)pyrene in aquatic productsHigh performance liquid chromatography2008-08-07发布2008-08-07实施中华人民共和国农业部发布 SC/T 3041—2008前言本标准的附录A为资料性附录。本标准由中华人民共和国农业部渔业局提出。本标准由全国水产标准化技术委员会水产品加工分技术委员会归口。本标准起草单位：中国水产科学研究院南海水产研究所。本标准主要起草人：杨贤庆、陈胜军、李来好、岑剑伟、郝淑贤、戚勃、马海霞。J SC/T3041-2008水产品中苯并（a)芘的测定高效液相色谱法1范围本标准规定了水产品中苯并(a)芪的高效液相色谱测定方法本标准适用于水产品及水产加工品中苯并(a)芪的测定。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注目期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的必威体育精装版版本。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本适用于本标准。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法SC/T3016水产品抽样方法3方法原理试样经氢氧化钾皂化后用正已烷提取，通过固相柱净化，用正已烷二氯甲烷溶液洗脱，旋转蒸发器蒸干，残渣用乙睛溶解，经反相色谱柱分离，荧光检测器检测，外标法定量。4试剂除特别说明外，所用试剂均为分析纯。4.1水：符合GB/T6682一级水的要求，4.2乙腈：色谱纯。4.3甲醇。4.4正已烷。4.5二氮甲烷。4.6无水硫酸钠：650℃下灼烧4h，冷却至室温，贮存于干燥器中备用。4.7固相萃取柱：佛罗里柱（Florisil)，250mg，3mL，使用前活化。4.850%氢氧化钾溶液：称取50.0g氢氧化钾加适量蒸馅水溶解，冷御后，用蒸馏水稀释定容至100mL，摇匀即可。4.9正已烷二氯甲烷溶液：将2mL二氮甲烷加人到6mL正已烷溶液中。4.10苯并(a)芘标准品：纯度≥98.0%。4.11标准贮备液：准确称取苯并（a)芪标准品0.0100g，置于100mL容量瓶中，加乙脂定容至刻度，该贮备液浓度为100μg/mL。置4℃冰箱中密封保存（保存时间不超过3个月）。4.12标准工作液：准确吸取1.00mL的标准贮备液，置于100mL容量瓶中，用乙册稀释至刻度。分别准确吸取一定体积的该溶液，制成浓度为0.5ng/mL、5.0ng/ml.、10.0ng/mL、50.0ng/mlL、100.0ng/mL、150.0ng/mL、200.0ng/mL的标准工作液。5仪器设备5.1高效液相色谱仪：配荧光检测器。V SC/T3041-20085.2离心机:5 000 r/min。5.3超声波震荡器。5.4旋转蒸发器。5.5旋涡振荡器。5.6分析天平：感量0.01g和0.0001g。5.7氮吹仪。5.8高速组织捣碎机。5.9无水硫酸钠柱：砂芯玻璃层析柱中装无水硫酸钠25g。5.10固相萃取装置。5.11圆底烧瓶：50mL和100mL。5.12试管：10mL。5.13聚丙烯离心管：100mL。5.14微孔过滤膜：孔径0.45μm。6测定步骤6.1试样制备6.1.1鲜活水产品的试样制备：按SC/T3016的规定执行。6.1.2水产加工品的试样制备：抽取至少3个包装件，取试样200g绞碎混合均匀后分为两份，一份用于检验，另一份作为留样。6.2提取称取试样5g（精确至0.01g），加入250mL三角瓶中，加人25mL甲醇和50%的氢氧化钾溶液（4.8）10mlL，在60℃水浴中浸提30min，不时振摇。然后再超声振荡10min，转移至100mL聚丙烯离心管中，加人20ml.正已烷，旋涡混匀5min，4000r/min离心10min分层，取上层正已烷相经无水硫酸钠柱滤人100mL圆底烧瓶中，再用15mL正已烷按上述操作重复提取水相一次。将提取液在50℃水浴中旋转蒸发，当圆底烧瓶中剩下约1mL液体时，取下圆底烧瓶，将液体移人试管中，再加人2mL正已烷清洗，合并到试管中，重复清洗一次，收集的液体留过柱用。6.3净化先使用3mL二氯甲烷、5mL正已烷活化固相萃取柱（4.7），流速约为2mL/min。将提取液用10mL正已烷洗人柱子中，再用8mL的正已烷二氯甲烷溶液（4.9）洗脱，用50mL圆底烧瓶收集洗脱液。将洗脱液在50℃水浴中旋转蒸发浓缩，待瓶中剩下约1mL时，取下圆底烧瓶，将液体移入试管中，再加人2mL正已烷清洗圆底烧瓶2次，合并至试管中，氮气吹干，准确加人1.00mL乙睛，超声溶解后，用0.45