NYT 1595-2008芝麻中芝麻素含量的测定高效液相色谱法.pdf

ICS 67.200.20B 33NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 1595—2008艺麻中芝麻素含量的测定高效液相色谱法Determination of sesamin content--High performance liquid chromatography2008-05-16 发布2008-07-01实施中华人民共和国农业部发布 NY/ T 1595—2008前言本标准由中华人民共和国农业部种植业管理司提出并归口。本标准起草单位：中国农业科学院油料作物研究所。本标准主要起草人：李培武、张文、丁小霞、姜俊、汪雪芳、谢立华、陈小媚。 NY/T 1595—2008芝麻中芝麻素含量的测定高效液相色谱法1范围本标准规定了高效液相色谱法测定芝麻中芝麻素含量的方法。本标准适用于芝麻中芝麻素含量的测定。本方法芝麻素检出限为 0.2mg/kg。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的必威体育精装版版本。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本适用于本标准。GB 5491粮食、油料检验扦样、分样法GB/T 6682分析实验室用水规格和实验方法(GB/T 6682—1992，eqvISO3696—-1987)3原理样品中芝麻素经80%乙醇水溶液提取纯化，反相C1柱分离后，在波长290nm检测,外标法定量。4 试剂除非另有说明,在分析中仅使用符合国家标准的分析纯试剂和GB/T 6682规定的二级水。4.1 甲醇,色谱纯。4.2 乙醇,色谱纯。4.380%乙醇水溶液(V/V)。4.420μg/mL标样储备液：准确称取 4.0mg芝麻素标样于200mL容量瓶中，用80%乙醇-水溶液(4.3)溶解定容。4.5流动相,甲醇十水(V+V)=80+20。5仪器和设备5.1分析天平,感量 0.0001g。5.2离心机,转速为 17 500 rpm/min,可控温 6℃。5.3组织捣碎机,转速为 15 000 rpm/min。5.4高效液相色谱仪,带紫外检测器和反相 C1:柱。5.50.45 μum有机相滤膜。6分析步骤6.1试样制备按GB5491扦取样品。粉碎机粉碎，粉碎后样品过gp0.25mm筛，备用。6.2提取称取试样约 200 mg，置于 10 mL离心管中，加入 5mL 80%乙醇-水溶液，组织捣碎机15000 rpm/min匀浆 30 s。在 6℃下17500 r/min离心5min,取上清液于试管中;残渣中再加 5mL的1 NY/T 1595-200880%乙醇-水溶液提取,提取条件和步骤同上，合并两次上清液，混匀,经0.45um有机相滤膜过滤，滤液待液相色谱分析。6.3色谱分析取芝麻素标准储备液（4.4），用 80%乙醇-水溶液（4.3）稀释至 1 ug/mL、2 μug/mL、5 ug/mL、10 ug/mL、20 ug/mL标准使用液，连同样品依次进样，进行液相色谱检测，建立工作曲线。色谱条件：流速0.8mL/min，进样量10μL，柱温为室温，检测器波长290nm。7 结果计算样品中芝麻素含量测定结果数值以克每千克表示(g/kg),按式(1)计算：X= A×ViXD×1000(1)V2M式中:X—一样品中芝麻素含量的数值,单位为克每千克(g/kg);一将样品分析所得峰面积代入工作曲线，计算所得的进样体积样品中芝麻素含量的数值，单位A-为微克(μg);V1——加人流动相体积的数值,单位为毫升(mL);V2--进样体积的数值，单位为微升（μL）；D一样液的总稀释倍数;M一样品质量的数值,单位为克(g)。取两次平行测定结果的算术平均值为测定结果，结果保留两位小数。8精密度8.1 重复性在重复性条件下，获得的两次独立测定结果的绝对值不得超过算术平均值的10%，以大于这两个测定值的算术平均值的10%的情况不超过5%为前提。8.2再现性在再现性条件下，获得的两次独立测定结果的绝对值不得超过算术平均值的15%，以大于这两个测定值的算术平均值的15%的情况不超过5%为前提。2 80056L/XN中华人民共和国农业行业标准芝麻中芝麻素含量的测定高效液相色谱法NY/T 1595—2008***中国农业出版社出版(北京市朝阳区麦子店街18号楼)（邮政编码：100125网址： www.ccap. )北京昌平环球印刷厂印刷新华书店北京发行所发行各地新华书店经销***开本 880mmX1230mm 1/16印张 0.5字数 5千字2008年6月第1版2008年6月北京第1次印刷书号：16109·1688版权专有侵权必究举报电话：（010YT“1595-2008