SN_T 3136-2012出口花生、谷类及其制品中黄曲霉毒素、赭曲霉毒素、伏马毒素B1、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、T-2毒素、HT-2毒素的测定.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 3136--2012出口花生、谷类及其制品中黄曲霉毒素、赭曲霉毒素、伏马毒素B1、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、T-2 毒素、HT-2 毒素的测定Determination of aflatoxins, ochratoxin , fumonisin B, , deoxynivalenolT-2 and HT-2 toxins in peanut ,grain and their products for export2012-05-07 发布2012-11-16 实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局 SN/T 3136-2012前言本标准按照 GB/T 1.1一2009给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国江苏出人境检验检疫局、中华人民共和国山西出入境检验检疫局。本标准主要起草人：朱臻怡、宋欢、冯民、连庚寅、严蔚东、花锦、何健、赵笑天。I SN/T 3136—2012出口花生、谷类及其制品中黄曲霉毒素赭曲霉毒素、伏马毒素B1、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、T-2 毒素、HT-2 毒素的测定1范围本标准规定了出口花生、谷类及其制品中黄曲霉毒素 Bi、B2、G1、G2，赭曲霉毒素 A,伏马毒素 B1，脱氧雪腐镰刀菌烯醇,T-2 毒素,HT-2 毒素的测定—液相色谱-质谱/质谱检测方法。本标准适用于出口花生、谷类及其制品中黄曲霉毒素 B、B2、G1、G2，赭曲霉毒素 A，伏马毒素 B1脱氧雪腐镰刀菌烯醇,T-2 毒素和 HT-2 毒素的测定。2 制样2.1固体试样制备将样品按四分法缩分至1kg，全部磨碎并磨细至粒度小于2mm，混匀，均分成两份作为试样，分别装人洁净的容器内，密封，标明标记。在抽样和制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。2.2试样保存将试样于 4℃下避光保存。3方法提要样品经PBS溶液和甲醇-水溶液提取，提取液经稀释、过滤后，用免疫亲和柱净化，通过淋洗去除免疫亲和柱上的杂质，随后用洗脱液过柱，将目标物分离下来，氮吹干后定容。以液相色谱-质谱/质谱测定，外标法定量。4试剂和材料除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为超纯水。4.1甲醇:高效液相色谱纯。4.2乙腈：高效液相色谱纯。4.3甲苯。4.4 甲酸。4.5乙酸铵。4.6磷酸氢二钠(Na²HPO4·12H²O)。4.7 氯化钾。4.8 磷酸二氢钾。4.9氯化钠。1 SN/T 3136---20124.10浓盐酸。4.110.1 mol/L HCl溶液：量取 9 mL浓盐酸至1000 mL容量瓶中，用水稀释至刻度线。4.121 mol/L NaOH溶液:称取 40.0 g 固体 NaOH,溶于 1 000 mL水中。4. 13 pH 7. 4 PBS溶液:称取 0. 20 g KC1、0. 20 g KHz PO4、2. 92 g Na2 HPO4 · 12H2O 和 8. 00 g NaCI用900mL水溶解，然后用0.1mol/L HCl溶液或1mol/L NaOH溶液调节pH值到7.4。4.1410 mmol/L乙酸铵溶液：准确称取0.385g乙酸铵，用水溶解并转移至500mL容量瓶中，加2.5 mL甲酸，用水定容至刻度。4.15甲苯-乙腈溶液（99＋1）：量取 99mL甲苯和1mL乙腈，混合均匀4.16甲苯-乙酸溶液(99+1)：量取 99 mL甲苯和1mL乙酸，混合均匀。4.17乙腈-水溶液（50+50)：量取50mL乙腈和50mL水，混合均匀。4.18黄曲霉毒素 BI、B2、G1、Gz（aflatoxin B、B2、Gi、G²）,赭曲霉毒素 A(ochratoxin A),伏马毒素 B（fumonisin B,），脱氧雪腐镰刀菌烯醇（deoxynivalenol），T-2毒素（T-2|toxin）和HT-2毒素（HT-2toxin)标准品：标准物质纯度为≥98%,标准品信息见表A.1。4.19黄曲霉毒素B、B2、G、G，标准储备液：分别准确称取适量的标准物质，用甲苯-乙腈溶液(99+1)配制成浓度为1 mg/mL的标准储备溶液。4℃下避光保存。4.20赭曲霉毒素A标准储备液：准确称取适量的赭曲霉毒素_A标准物质，用甲苯-乙酸溶液(99+1)配制成浓度为1 mg/mL的标准储备溶液。4℃下避光保存。4.21伏马毒素B标准储备液：准确称取适量的伏马毒素B：标准物质，用乙腈-水溶液（50+50)配制成浓度为1 mg/mL的标准储备溶液。4 ℃下避光保存。4.22脱氧雪腐镰刀菌烯醇标准储备液：准确称取适量的脱氧雪腐镰刀菌烯醇标准物质，用乙腈配制成浓度为 1 mg/mL 的标准储备溶液