NY_T 564-2016猪巴氏杆菌病诊断技术.pdf

ICS 11.220B 41NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 564—2016代替NY/T564—2002猪巴氏杆菌病诊断技术Diagnostic techniques for swine pasteurellosis2016-10-26发布2017-04-01实施中华人民共和国农业部发布 NY/T564—2016前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草本标准代替NY/T564—2002《猪巴氏杆菌病诊断技术》。与NY/T564—2002相比.除编辑性修改外.主要技术变化如下：“范围”部分增述了多杀性巴氏杆菌定种的PCR鉴定方法和荚膜定型的多重PCR鉴定方法的适用性（见1）；“临床诊断”及“病理剖检”部分参照《兽医传染病学》（陈溥言主编）中相关描述进行了修改（见2和3);一“病原分离”部分删除了不适宜多杀性巴氏杆菌生长的麦康凯琼脂培养基，并将改良马丁琼脂培养基和马丁肉汤培养基改为更适宜多杀性巴氏杆菌生长的胰蛋白大豆琼脂培养基和胰蛋白大豆肉汤培养基（见）；新增了定种PCR鉴定方法（见4.4）；“英膜血清型鉴定”部分在原有的间接血凝试验（Carter氏荚膜定型法）的基础上义新增了另一种选择一一多重PCR英膜定型法，并对多杀性巴氏杆菌间接血凝试验程序表也进行了完善（见和4.5.2)；—附录A”部分增添了胰蛋白大豆琼脂培养基（TSA)和胰蛋白大豆肉汤培养基（TSB)的制备方法（见附录A.6和A.7）。本标准由农业部兽医局提出。本标准由全国动物卫生标准化技术委员会（SAC/TC181）归口。本标准起草单位：中国兽医药品监察所，本标准起草人：蒋玉文、张媛、李建、李伟杰、魏财义。本标准的历次版本发布情况为：——NY/T564—2002。I NY/T564—2016猪巴氏杆菌病诊断技术1范围本标准规定了猪巴氏杆菌病诊断的技术要求。本标准所规定的临床诊断、病理剖检和病原分离鉴定，适用于猪巴氏杆菌病的诊断。定种PCR适用于多杀性巴氏杆菌种的鉴定；间接血凝试验、荚膜定型多重PCR适用于多杀性巴氏杆菌荚膜血清型的鉴定；琼脂扩散沉淀试验适用于多杀性巴氏杆菌菌体血清型的鉴定2临床诊断潜伏期1d5d。临诊上，一般分为最急性型、急性型和慢性型3种形式。2.1最急性型2.1.1突然发病，迅速死亡。2.1.2体温升高（41℃～42℃），食欲废绝，全身衰弱，卧地不起，焦躁不安，呼吸困难，心跳加快。2.1.3颈下咽喉部发热、红肿、坚硬，严重者向上延至耳根，向后可达胸前。呼吸极度困难，常做犬坐姿势，伸长头颈呼吸，有时发出喘鸣声，口、鼻流出泡沫。2.1.4可视黏膜发，腹侧、耳根和四肢内侧皮肤出现红斑。2.1.5病程1d～2d。2.2急性型2.2.1体温升高（40℃～41℃），咳嗽，呼吸困难，鼻流黏稠液混有血液，触诊胸部有剧烈的疼痛，听诊有啰音和摩擦音，张口吐舌，犬坐姿势2.2.2皮肤有瘀血和小出血点，可视黏膜蓝紫，常有黏脓性结膜炎。2.2.3初便秘，后腹泻。2.2.4心脏衰竭，心跳加快。2.2.5病程5d～8d。2.3慢性型2.3.1持续性咳嗽，呼吸困难，鼻流少许黏脓性分泌物。2.3.2出现痴样湿疹。2.3.3关节肿胀。2.3.4食欲不振，进行性营养不良，泻痢，极度消瘦。3病理剖检3.1最急性型3.1.1皮肤有红斑；切开颈部皮肤时，可见大量胶冻样蛋黄或灰青色纤维素性黏液；咽喉部及其周围结缔组织出血性浆液浸润；全身黏膜、浆膜和皮下组织有大量出血点；水肿可自颈部蔓延至前肢。3.1.2全身淋巴结出血，切面红色3.1.3心外膜和心包膜有小出而点。3.1.4肺急性水肿。3.1.55脾有出血，但不肿大。 NY/T564-20163.1.6胃肠黏膜有出血性炎症变化3.2急性型3.2.1胸腔及心包积液；胸腔淋巴结肿胀，切面发红，多汁；全身黏膜、浆膜实质器官和淋巴结出血性病理变化。3.2.2纤维素性肺炎.肺有不同程度的肝变区.周围伴有水肿和气肿.病程长的肝变区内还有坏死灶，肺小叶间浆液浸润，切面呈大理石样纹理；胸膜常有纤维素性附着物.严重的胸膜与病肺粘连3.2.3支气管、气管内含有多量泡沫状黏液，黏膜发炎3.3慢性型3.3.1肺肝变区扩大并有黄色或灰色坏死灶.外面有结缔组织包裹，内含干酪样物质，有的形成空洞并与支气管相通，3.3.2心包与胸腔积液.胸腔有纤维素性沉着。3.3.3肋膜肥厚，与病肺粘连；在肋间肌、支气管周围淋巴结、纵隔淋巴结以及扁桃体、关节和皮下组织可见有坏死灶。4病原分离鉴定4.1病原分离4.1.1材料培养基胰蛋白大豆琼脂培养基（TSA，配制见A.6）、胰蛋白大豆肉汤培养基（TSB，配制见A.7）。试剂绵羊脱纤血、绵羊裂解血细胞全血、健康动物血清4.1.2器材二级生物安全柜、恒温培养箱（37℃）。4.1.3操作猪濒死或死亡后，无菌采取病死猪的心血或肝脏组织