NY_T 571-2018马腺疫诊断技术.pdf

ICS 11.220B 41NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 571-2018代替NY/T571—2002马腺疫诊断技术Diagnositc techniques for strangles2018-06-01实施2018-03-15发布中华人民共和国农业部发布 NY/T 571—2018目次前言ⅢI引言范围·12规范性引用文件3临床检查4细菌学检查5综合判定.+.......-:溶液的配制附录A（规范性附录））PCR扩增产物参考序列附录B(资料性附录) NY/T 571—2018前言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准代替NY/T571—2002《马腺疫诊断技术》。与NY/T571—2002相比，除编辑性修改外主要技术变化如下：“引言”部分更正马腺疫为三类动物疫病；一增加了对病原菌进行鉴定的PCR方法（见4.5）；一对病原菌分离培养基进行调整（见4.3.3，附录A）。本标准由农业部兽医局提出。本标准由全国动物卫生标准化技术委员会（SAT/TC181)归口。本标准起草单位：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所。本标准主要起草人：王晓钧、郭巍、戚亭。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：-NY/T 571—2002。I NY/T 571—2018引言马腺疫是马、驴、骤的一种急性传染病，该病以症状命名，典型症状为发热、上呼吸道及咽喉黏膜呈现卡他性炎症，颌下淋巴结表现急性化脓性炎症，幼驹最易感染。病原体为C型链球菌马链球菌马亚种(Streptococcus equi subspecies equi,S equi)。第1125号)将该病确定为三我国《一、二、三类动物疫病病种名录》中华人民共和国农业部公告类动物疫病。IⅢI NY/T 571—2018马腺疫诊断技术1范围本标准规定了马腺疫临床检查、细菌学检查和综合判定的技术要求。本标准适用于马、驴、骤等马属动物马腺疫的诊断。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本文件。食品安全国家标准食品微生物学检验β型溶血性链球菌检验GB 4789.111食品安全国家标准食品微生物学检验培养基和试剂的质量要求GB4789.281GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法兽医诊断样品采集、保存和运输技术规范NY/T541:3临床检查3.1器材体温计、马保定架、胶手套、线手套、工作服。3.2消毒药根据情况，可从0.1%升汞水、3%来苏儿、0.1%新洁尔灭或75%酒精等消毒药中选择一种使用。3.3检查方法保定被检马，重点检查鼻腔和颌下淋巴结，以3.2消毒药洗净破溃处。3.4临床特征3.4.1一过型腺疫鼻腔黏膜潮红，流出浆液性或黏液性鼻液，颌下淋巴结轻度肿胀。3.4.2典型腺疫体温39℃～41℃，鼻腔流出黏性至脓性鼻液。颌下淋巴结肿大，表面凹凸不平，触之硬实，界限清楚，如鸡蛋大甚至拳头大。周围发生炎症时，肿胀加剧，充满整个下颌间隙，界限不清，热痛明显。随着炎症的发展，局部组织肿胀化脓，肿胀完全成熟，自行破溃，流出大量黄白色黏稠脓汁。随后，创内肉芽组织新生，逐渐愈合。病程2周～3周。6月龄～12月龄幼驹最易感染本病。3.4.3恶性型腺疫如果病马抵抗能力很弱，则马链球菌可由颌下淋巴结的化脓灶转移到其他淋巴结，形成化脓灶，甚至转移至肺和脑等器官，发生脓肿，体温多稽留不降，常因极度衰弱或继发脓毒败血症死亡。3.4.4临床判定符合3.4.2～3.4.3描述的临床症状,可诊断为马腺疫。4细菌学检查4.1病料标本采集按照NY/T541的规定，用消毒药(3.2)对病马颌下淋巴结未破溃脓肿进行消毒，然后用注射器刺1 NY/T 571—2018人脓肿，吸取脓汁注人灭菌小试管中。如果脓肿已经破溃，则用灭菌生理盐水浸湿的棉棒蘸取脓汁或鼻腔分泌液放于灭菌小试管中，立即检查，或放4℃冰箱中保存待检。4.2直接镜检4.2.1器材显微镜、载玻片。4.2.2操作方法将病料标本涂于载玻片上，干燥，固定，进行革兰氏染色（见附录A)。4.2.3显微镜观察在显微镜下先用低倍镜和高倍镜观察，再用油镜观察。4.2.4菌体形态特征马链球菌的形态及染色特征是在脓球间散布着由几个甚至上百个球菌组成的波浪状弯曲的长链条，各菌大小不等，多呈扁球状，直径约1um，菌体着色不均，革兰氏阳性。4.3分离培养4.3.1器材恒温箱、镊子、铂金耳、酒精灯。4.3.2试剂符合GB4789.11、GB4789.28规定的糖发酵管。4.3.3培养基10%血清肉汤、THB培养基、5%～10%血清琼脂平板、哥伦比亚血琼脂平板配制方法见附录A。4.3.4操作方法用铂金耳钩取病料，接种于10%血清肉汤或THB培养基做增菌培养，接种于5%～10%