SNT 2534-2010进出口水果和蔬菜制品中展青霉素含量检测方法 液相色谱-质谱法与高效液相色谱法.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 2534—2010进出口水果和蔬菜制品中展青霉素含量检测方法液相色谱-质谱／质谱法与高效液相色谱法Determination of patulin in fruit and vegetable products for import and export-LC-MS/MS and HPLC method2010-09-16实施2010-03-02 发布中华人民共和国发布医 101015查询真国家质量监督检验检疫总局数码防伪 SN/T 2534—2010言前本标准的附录 A、附录 B和附录 C 为资料性附录,本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准由中华人民共和国河南出人境检验检疫局负责起草。本标准主要起草人：杨冀州、祝伟霞、袁萍、刘亚风、郭俊峰、魏蔚。 SN/T 2534-—2010进出口水果和蔬菜制品中展青霉素含量检测方法液相色谱-质谱/质谱法与高效液相色谱法 范围1本标准规定了水果和蔬菜制品中展青霉素的高效液相色谱检测方法和液相色谱-质谱/质谱检测和确证方法。本标准适用于苹果清汁、苹果浊汁、番茄酱、山楂片中展青霉素的高效液相色谱检测方法和液相色谱-质谱/质谱检测和确证方法。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引角而成为本标准的条款。凡是注明日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而，鼓励根据本标准达成协议的各方面凡是不注明日期的引用文件，其必威体育精装版版本适用于本标准。研究使用这些文件的必威体育精装版版本。1GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3试样的制备与保存3.1苹果清汁从所取样品中取出有代表性释品约500g/摇匀后装入洁净容器，密封并标明标记，将试样置于0℃～4℃条件下避光保存。3.2苹果浊汁、番茄酱从所取样品中取出有代表性样品约500g,用玻璃棒搅拌均匀，装人洁净容器作为试样，密封标明标记,将试样置于0℃～4℃条件下避光保存3.3山楂片从所取样品中取出有代表性样品约500g，用粉碎机粉碎，混和均匀，装入洁净容器作为试样，密封并标明标记。将试样置于0℃～4℃条件下避光保存。在制样操作过程中应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。第一法　液相色谱-质谱/质谱法4方法提要苹果清汁用乙腈稀释后直接固相萃取净化；苹果浊汁、番茄酱、山楂片样品先用果胶酶水解，再以乙酸乙酯提取，吹干浓缩后固相萃取净化，液相色谱-质谱/质谱测定，外标法定量。5试剂和材料除特殊注明外，所用试剂均为分析纯，水为 GB/T 6682规定的一级水。5.1乙腈:高效液相色谱级。5.2冰乙酸：高效液相色谱级。5.3乙酸乙酯。 SN/T 2534--20105.4果胶酶溶液(endogalacturonase):活度为 1 400 U/g。5.5pH4.0水溶液：量取700mL～800mL水，用冰乙酸调节pH4.0,加水定容至1000mL。5.61%乙酸溶液:量取10 mL冰乙酸与 990 mL水混合。5.7展青霉素标准品（patulin）：C,H.O4，CAS编号 149-29-1，纯度大于等于 99.5%。5.8标准储备溶液：准确称取展青霉素标准品 10 mg(5.7)，用乙酸乙酯溶解并定容至 100 mL,浓度相当于100 μg/mL,储备液贮存于一18℃以下，稳定6个月。5.9标准中间溶液：准确量取1.0mL标准贮备溶液(5.8)，用氮气吹干后溶于pH4.0水（5.5)中，定容.至 100mL,浓度相当于 1.0 μg/mL,储备液贮存于 0℃～4℃,稳定 3个月5.10标准工作溶液：根据需要用空白基质溶液将标准中间溶液(5.9)稀释成适当浓度的标准工作溶液,标准工作溶液应在使用前配制。5.11MycoSep?228 净化柱或相当者1)。5.120.45 μm微孔滤膜,水系。6仪器和设备6.1液相色谱串联四极杆质谱仪：配电喷雾离子源（ESI）。6.2分析天平:感量 0.1 mg,0.01 g。6.3涡旋混匀器。6.4 离心机:4 000 r/min。6.5氮气吹干仪。6.6pH计:测量精度士0.02。6.7粉碎机。7 测定步骤7.1样品提取7.1.1 清汁准确称取 2 g 试样（精确到0.01 g）于一具塞试管中，加人 6.0 mL 乙腈，涡旋混匀 2 min，于4 000 r/min离心5 min，转移全部上清液于试管中待净化。7.1.2浊汁、番茄酱、山楂片准确称取 5 g均匀试样（精确到0.01 g)于一具塞试管中，,加入 20 mL 水与150 μL 果胶酶溶液(5.4)混匀，室温下避光放置过夜，酶解后的溶液加人20 mL乙酸乙酯，涡旋提取3min，于4000 r/min离心5 min,转移上层乙酸乙酯提取液,再用 20 mL乙酸乙酯重复提取一次。合