NY_T 3141-2017饲料中2%2C6-二甲基-3%2C5-二乙酯基-1%2C4-二氢吡啶的测定 液相色谱-串联质谱法.pdf

ICS 65.120B 46NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 3141-2017饲料中2,6-二甲基-3,5-二乙酯基-1,4-二氢吡啶的测定，液相色谱一串联质谱法Determination of 1,4-dihydro-2,6-dimethyl-3,5-pyridinedicarboxylic acid diethyester in feeds-Liquid chromatography-tandem mass spectrometry2017-12-22发布2018-06-01实施中华人民共和国农业部发布 NY/T 3141—2017前言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由农业部畜牧业司提出。本标准由全国饲料工业标准化技术委员会（SAC/TC76)归口。本标准起草单位：农业部饲料质量监督检验测试中心（成都）。本标准主要起草人：赵立军、张静、李宏、林顺全、廖峰、曾晓芳、魏、李云。- NY/T3141—2017饲料中2,6-二甲基-3,5-二乙酯基-1,4-二氢吡啶的测定液相色谱一串联质谱法1范围本标准规定了饲料中2,6-二甲基-3,5-二乙酯基-1，4-二氢吡啶含测定的液相色谱一串联质谱法。本标准适用于配合饲料、浓缩饲料、精料补充料和添加剂预混合饲料中2，6-二甲基-3，5-二乙酯基-1，4-二氢吡啶的测定，本标准方法的检出限为0.1mg/kg，定量限为0.5mg/kg。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本义件。凡是不注日期的引用义件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T14699.1饲料采样GB/T20195动物饲料试样的制备3原理试样中的2，6-二甲基-3，5-二乙酯基-1，4-二氢吡啶经提取，固相萃取柱净化后用高效液相色谱一串联质谱仪测定，外标法定量。4试剂和材料除非另有说明，所有试剂均为分析纯和符合GB/T6682规定的一级水。4.1甲醇：色谱纯。4.2乙晴：色谱纯。4.3乙酸铵：色谱纯。4.4甲酸：色谱纯。4.595%甲醇溶液：取甲醇（4.1)95mL.加水定容至100mL，摇匀，即得。4.690%乙腈溶液：取乙腈（4.2)90mL加水定容至100ml，摇勺，即得。4.72,6-二甲基-3,5-二乙酯基-1,4-二氢吡啶对照品：纯度大于98.0%。4.8标准储备溶液：准确称取适量2，6-二甲基-3,5-二乙酯基-1，4-二氢吡啶对照品（精确到0.1mg），用乙睛溶解、定容，配成储备溶液浓度为1mg/ml，转移至棕色瓶。一20℃冰箱内保存，有效期为3个月。4.9标准中间溶液：准确吸取2,6-二甲基-3,5-二乙酯基-1，4-二氢吡啶储备溶液（4.8)0.2ml，用乙睛稀释、定容至100ml，使之浓度为2.0ug/ml,转移至棕色瓶。一20℃冰箱内保存，有效期为1个月。4.100.1%甲酸十5mmol/L乙酸铵水溶液：称取乙酸铵（4.3)0.385g加水定容至1000ml，加人甲酸（4.4)1ml，摇匀，即得。4.11固相萃取柱：Cig固相苯取柱（200mg/3mL）；或性能相当的分析柱。1 NY/T 3141—20174.12微孔滤膜：0.22μm，有机相。4.13密封盖塑料离心管：50ml。5仪器和设备5.1高效液相色谱一串联质谱仪（配电喷雾离子源）。5.2分析天平：感量为0.1mg和0.01g各1台。5.3离心机：转速为8000r/min及以上。5.4超纯水器。5.5涡旋混合器。5.6振荡器。5.7固相萃取装置。6采样和试样制备按照GB/T14699.1的规定抽取有代表性的饲料样品，用四分法缩减取样。按GB/T20195的规定制备试样，全部通过0.28mm孔筛，充分混勺，装入密闭容器中，避光低温保存，备用。7分析步骤7.1提取7.1.1配合饲料、浓缩饲料或精料补充料：准确称取2g（精确到0.01g），置于250ml.具塞锥形瓶中，加人95%甲醇（4.5)50ml。置于振荡器上中速振荡30min，静置2min。移取适量上清液于离心管中，以8000r/min离心5min。准确吸取上清液0.2ml，用95%甲醇（4.5）定容至10ml，作为备用液。7.1.2添加剂预混合饲料：准确称取1g（精确到0.01g），置于250ml具塞锥形瓶中，加人90%乙（4.6)50ml。置于振荡器上中速振荡30min，静置2min。移取适量上清液于离心管中，以8000r/min离心5min。准确吸取上清液0.1ml，用90%乙睛（4.6)定容至10ml，作为备用液。7.2净化7.2.1配合饲料、浓缩饲料或精料补充料：固相苯取柱依次用甲醇3mL、水3ml活化（活化后萃取柱内水相液面高于柱筛板1